Bt-CryV基因对马铃薯的遗传转化

文章以马铃薯品种东农303的脱毒微型薯为外植体,利用农杆菌介导法将Bt-CryV基因转入马铃薯中,同时优化影响遗传转化的因素,包括激素种类与浓度、休眠期、脱菌抗生素种类与浓度、共培养时间、筛选方式等。获得21株Kan抗性植株进行PCR和PCR-Southern检测,其中10株为阳性植株,证明外源基因已经整合到植物的基因组上。

棉铃虫对Bt杀虫蛋白抗性测定方法的研究

对饲料混合法 ,体重抑制率法 ,浸叶接虫法进行比较研究 ,结果表明 ,饲料混合法比较稳定 ,比较适宜作为抗性测定的方法。用饲料混合法测定比较不同龄期幼虫的测定结果 ,确定 2龄作供试幼虫为宜。比较不同处理天数下的生测结果 ,确定 Bt粉剂对 2龄幼虫的适宜处理时间为 5d,Cry1Ac为 14d。用改进稀饲料隔离饲养供试幼虫的方法后 ,得到理想的生测数据 ,生测时间延长到 14d,对照死亡率也能控制在 2 0 %以下。从我们 1998年对棉铃虫的抗性监测结果说明 ,尽管田间棉铃虫对 Bt ICP未达抗性水平 ,但对 Cry1Ac型蛋白敏感性已有降低 。

热处理对BT-20钛合金组织和性能的影响

研究了不同的加热温度及冷却方式对BT-20合金组织和性能的影响,获得该合金在三种热处理制度下的显微组织图以及所对应的室温力学性能。经分析得出该合金经950℃×1h空冷后形成的α+β双态组织中,等轴初生α相含量少,次生α相含量多,呈晶间集束α域。此种组织的BT-20合金具有较优的综合性能。

转基因棉花中Bt蛋白鉴定方法的研究现状

转基因棉花是推进中国棉花产业发展,造福广大棉农的必然举措,然而,如何确定和建立一种简单、快速、方便的转Bt基因棉花检测、鉴定方法成为制约其推广、应用的关键。文章对生物测定法、酶联免疫法(EL1SA法)和SDS-PAGE电泳法等三种当前常用的Bt基因棉花鉴定方法进行了归纳、分析与讨论,并指出了各方法存在的问题及不足,同时,还对已有研究报道的Dot-ELISA法、协同凝集反应、抗生素抗性鉴定法等进行了简单阐述,为进一步推动转Bt基因棉花鉴定方法的研究奠定基础。

运用BT模式进行城市轨道交通建设

BT模式是解决我国城市轨道交通建设资金不足,提高建设效率的有效途径之一。介绍BT融资模式的内涵和应用意义,对我国城市轨道交通BT模式进行分析,阐述其适合的运作方式,以及运作中关键问题的控制措施,最后提出运用BT模式促进非政府资本进入城市轨道交通建设的建议。

基因枪法和农杆菌介导的Bt抗虫基因转化芥蓝

以芥蓝品种小香菇为试材,分别采用基因枪法和农杆菌介导转化法将Bt抗虫基因Cry2Aa2转化到芥蓝中,并对两种转化方法进行了优化和比较。结果表明:基因枪法在轰击距离为6cm、轰击次数为1次时转化效率最高,为0.43%;农杆菌介导转化法以带子叶下胚轴为外植体、预培养2d、侵染10min、共培养2d、抑菌培养5d后转入筛选培养基为最佳参数,转化效率为0.37%。经PCR和PCR-Southern鉴定,基因枪法和农杆菌介导转化法均成功将目的基因导入芥蓝基因组中。经抗虫性表型鉴定,T_0代转基因芥蓝植株对甘蓝夜蛾幼虫的抗性高于非转基因植株。

利用根箱法解析转双价(Bt+CpTI)基因棉花对土壤微生物数量及细菌多样性的影响

利用根箱法对棉花根部土壤进行分区采集,并采用传统平板培养和DGGE克隆测序技术相结合的方法,对转双价基因棉和常规棉3个生长时期(播种后40 d、50 d和60 d)不同根区土壤细菌、放线菌和真菌数量及细菌多样性进行对比分析。平板培养结果表明,与常规棉相比,转双价基因棉S1根区土壤细菌、放线菌的数量显著降低,而S2根区土壤细菌、放线菌、真菌和S3根区土壤细菌、真菌的数量显著增加(P<0.05);DGGE图谱分析表明,在棉花生长的3个时期内,转双价基因棉和常规棉根区土壤细菌多样性指数、均匀度和条带数均无显著差异(P>0.05),2种棉花处理间有着很强的相似性,不受转双价基因棉种植的影响。转双价基因棉种植仅改变了根区土壤可培养微生物数量,对细菌多样性无显著影响。

Bt生物农药毒力效价检测方法综述

Bt生物农药是目前应用广泛而有效的一种微生物杀虫剂,防治虫害效果好,不污染环境,无残留,能保持农产品的优良品质;对哺乳动物毒性较低,使用中对人、畜比较安全。综述了检测Bt生物农药的毒力效价的几种方法,主要包括孢子计数法、生物测定法、免疫PCR技术法、高效液相色谱法等,并对各种方法的研究状况和存在问题进行了简要评述。

F_1代法监测田间棉铃虫对转Bt基因棉的抗性

采用表达单价Cry1Ac毒素的转Bt基因棉棉叶喂饲法比较了棉铃虫Helicoverpa armigera(Hbner)抗、感亲本及正反交后代在Bt棉上5d的发育速率,确定棉铃虫在Bt棉上5d发育到2龄中期以上、体重≥0.6mg的个体作为判别抗性纯合子的标准。2006年采用F1代法在室内用Bt棉叶喂饲法检测河北省邱县Bt棉田棉铃虫对Bt棉的抗性等位基因频率。结果表明,127头田间雄虫中24头携带抗性基因,估测抗性等位基因频率为0.94(95%CI:0.044～0.145),该值为在国内首次检测到的高抗性等位基因频率。该地区长期大面积种植转单价Bt棉和缺少非Bt棉作为有效庇护区导致田间抗性快速进化,需要尽快采取有效的抗性治理策略。本文还讨论了影响大田产生抗性的因素以及田间存在的抗性风险等。

基于ECM-Theil方法的BT项目承包商选择研究

随着我国新型城镇化建设的不断推进,BT项目管理模式在工程项目建设中所占的比重逐渐增大,科学合理地选择BT项目承包商至关重要。在业主方研究视角下,结合BT项目工程特点,选取12个评价指标,构建BT项目承包商选择评价指标体系。在功效系数优化方法(ECM)的基础上,引入Theil指数方法确定评价指标权重,结合工程实例,利用ECM-Theil项目承包商选择模型计算BT项目承包商的总功效系数,并对承包商进行优劣排序,选择最优BT项目承包商,该研究可为BT项目承包商的选择提供参考和科学依据。

转Bt基因抗虫棉田棉盲蝽预测预报方法的改进研究

针对江苏沿海地区转B t基因抗虫棉田棉盲蝽发生量加大、发生期提前和绿盲蝽比例明显上升等新情况,研究制定出了"两个改进、两个加强和一个建立"的B t棉田棉盲蝽预测预报新方法,即改进调查方法、改进短期预报方法,加强对成虫的预测、加强对重点发生阶段的预测,建立棉盲蝽预测预报数据库。

茶树Bt和Cpti双价抗虫基因转化研究(简报)

利用转基因获得抗虫茶树品种是防治茶树害虫的重要途径。将含有Bt和Cpti双价抗虫基因的质粒转入感受态E.coitl DH5α菌株并进行培养、提取和扩增后的质粒,注入茶树花期的子房内,种植接种后的茶籽,并对获得的植株进行检测。

施氮方式对转基因棉花Bt蛋白含量及产量的影响

为研究氮肥运筹对棉花叶片、棉蕾和棉铃不同器官中Bt蛋白含量的影响,2009—2010年,以抗虫杂交棉中棉所72为试验材料,在大田条件下进行了不同基肥:花铃肥:盖顶肥施氮比例(分别为0∶0.4∶0.6、0.2∶0.4∶0.4、0.4∶0.4∶0.2、0.6∶0.4∶0)的试验。结果表明,施氮方式对棉花不同器官中Bt蛋白含量有明显影响。总体表现为随着氮肥前移,棉花幼嫩器官中Bt蛋白含量呈明显增加的趋势,而老熟器官中Bt蛋白含量呈明显降低的趋势。施氮方式对棉花幼嫩器官中Bt蛋白含量的影响比老熟器官明显,尤其是对幼嫩叶片Bt蛋白含量的影响大于幼小的棉蕾和棉铃器官。抗虫棉采用基肥∶花铃肥∶盖顶肥为0.4∶0.4∶0.2的施氮方式,总体能提高前中期棉花器官Bt蛋白的含量,有利于提高其抗虫性能;减少后期棉花器官Bt蛋白的含量,减轻对环境的压力;而且比其余3种施氮方式的籽棉产量和皮棉产量分别增加4.15%—11.24%、3.73%—12.01%。

应用单雌系F_2代法检测棉铃虫对转Bt基因棉抗性等位基因的频率

用单雌系 F2 代遗传方法检测了棉铃虫对转Bt基因棉 (新棉 3 3 B) Bt毒素蛋白的抗性等位基因频率。研究结果表明 ,河北邱县转 Bt基因棉新棉 3 3 B只种植 1年的情况下 ,棉铃虫自然种群中抗性等位基因的频率 >5.8× 1 0 - 3 ,该方法的灵敏度比区分剂量法和机率分析 (抗性倍数 )法高一个数量级以上。文章还对转

一种基于SDS溶液高效提取土壤残留Bt蛋白的方法

通过对SDS浓度、孵育温度和孵育时间3种提取条件的研究,建立了一种基于SDS溶液的提取土壤中残留Bt蛋白的方法(简称SDS法)。在ρ(SDS)为2 g.L-1、孵育温度为50℃、孵育时间≥4 h条件下,采用SDS法可有效地从不同类型土壤样品中提取残留Bt蛋白,提取效果明显好于碳酸盐法、人造蠕虫肠道蛋白提取液法和PBST(phosphate buffer solution with Tween-20)法。

RGB格式数据向BT.656视频标准转换的关键技术

针对当前多数场合需要将RGB格式图像数据转换成BT.656视频标准的现状,提出了基于FPGA的实现方案,分析了系统的各组成模块和关键技术。利用状态转移机制,产生了BT.656视频标准时序;通过线性循环补偿法,避免了RGB向YUV格式转换的颜色失真现象;使用带有输入输出选择控制功能的FIFO电路,解决了输入输出数据的速率匹配问题。仿真验证结果表明,所提出的方案效果良好,具有广阔的应用前景。

Bt基因表达载体的构建及对茶树遗传转化的研究

用限制性内切酶HindⅢ和BglⅡ从pGA4 71质粒中切取Bt基因并转入载体pCAMBIA2 30 1中 ,构建后的质粒含Bt基因、intron -GUS基因和NPTⅡ基因。将构建后的质粒转化大肠杆菌 ,通过三亲交配法分别导入农杆菌菌株LBA4 4 0 4、EHA10 5、pRi15834中。以茶树叶片、愈伤组织为转化的受体材料 ,用农杆菌介导法将其转入茶树中 ,获得了GUS瞬间表达。以潮霉素作为愈伤组织筛选的选择性试剂 ,效果明显优于卡那霉素 ,适宜浓度为 2 0 μ/ml;以卡那霉素作为茶树叶片材料的筛选试剂 ,50 μ/ml为宜。

转Bt基因早粳稻对土壤微生物数量及其区系结构的影响

研究了种植转Bt基因早粳稻对土壤微生物数量及其区系结构的影响,为转基因水稻环境释放及评估其生态风险提供依据。以田间种植的转Bt基因早粳稻各个生长发育阶段的根际及行间土壤为试材,用平板计数法测得土壤细菌、放线菌和真菌数量及丰度等数据。结果表明,在水稻生长发育的返青期、分蘖期、孕穗期、抽穗期和成熟期,田间根际及行间土壤细菌、放线菌和真菌的数量及丰度等性状,在转Bt基因早粳稻HD1、HD2等品系及其受体品种间或HD3、HD4等品系及其受体水稻间均未见显著不同。寒地转Bt基因早粳稻田间土壤微生物区系状态与普通水稻相比较没有明显变化。该研究进一步证实了转Bt基因水稻对土壤微生物数量及区系结构没有显著影响。

BT工程项目风险分析和分配研究

近年来,BT模式在基础设施建设中大量运用,由于BT项目和基础设施的本身特点,使得BT项目运作过程不确定性加大,风险增加。加强风险管控,风险责任分配是保证项目成功运行的关键。通过分析基础设施建设BT项目的风险因素,构建了风险指标体系和风险分配评价标准,在此基础上运用多属性离差最大化和熵权法原理,建立了BT项目风险分配模型。最后通过算例说明模型的运用。研究表明,模型有助于确定BT项目风险责任的分配顺序和风险承担程度。

水热法制备NBT-BT粉体的研究

用水热法制备了0.94(Bi0.5Na0.5)TiO3-0.06BaTiO3粉体,并对其进行了XRD分析和SEM分析。结果表明NaOH浓度对相组成和合成粉体的形态颗粒有重要影响。在NaOH浓度为10 mol/L的条件下制得纯净的粒径约为0.5μm的(Bi0.5Na0.5)TiO3-BaTiO3(NBT-BT)粉体,并对反应过程的机理进行了预测。