葡萄膜炎患者外周血T细胞TCR BV亚家族克隆性的初步研究

为探讨葡萄膜炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)TCR BV CDR3谱系特点及多态性,为其免疫发病机制研究提供实验基础。采用RT-PCR扩增TCR BV 26个亚家族CDR3的方法,经免疫扫描谱型技术分析对葡萄膜炎患者PBMC中TCR BV CDR3的谱系漂移情况进行研究。结果显示:(1)5例正常健康人PBMC TCR BV CDR3谱型绝大多数呈正态(或高斯)分布,4例葡萄膜炎患者TCR BV CDR3扫描谱型均出现非正态分布的异常峰型,包括寡峰/寡峰趋势,偏峰和不规则异常峰型;(2)在26个TCR BV亚家族中,不同亚家族异常峰型出现的频率不同,非正态异常峰型出现频率较高的亚家族有BV2和BV17(均为3/4),而BV5.2、BV6、BV15和BV18亚家族均未出现异常峰型;(3)TCR BV2和BV17两个亚家族在HLA-B27阴性的3个患者均出现非正态异常峰型,而在HLA-B27阳性(合并强直性脊柱炎)的患者并未出现异常。葡萄膜炎患者PBMC TCRBV部分亚家族的异常表达可能与该病的免疫发病机理有关,为葡萄膜炎发病机制的进一步研究提供依据。

强直性脊柱炎患者外周血CD4+、CD8+ T细胞TCR BV CDR3多态性分析

为探讨AS患者外周血CD4＋、CD8＋T细胞TCR BV CDR3谱型多样性特点,为AS免疫发病机制及治疗提供基础依据。应用RT-PCR方法分别扩增AS患者CD4＋、CD8＋T细胞TCR BV 26个亚家族CDR3区,采用免疫指纹技术进行TCR BV各家族基因扫描和谱型分析。结果显示,正常健康人CD4＋、CD8＋TCR BV绝大多数亚家族谱型呈现正态分布（或高斯）分布;AS患者CD4＋T细胞绝大多数TCR BV家族呈现与健康对照相似的正态分布,仅少数家族呈不规则异常峰型或偏峰,极少家族出现寡克隆趋势和单克隆,不同患者的CD4＋TCR BV家族异常峰型率在4%（1/26）~27%（7/26）;AS患者CD8＋T细胞,大多数BV家族呈现非正态异常峰型,而少部分家族呈现正态分布的钟型峰图,不同患者CD8＋TCR BV家族异常分型率在27%（7/26）~77%（20/26）,呈现寡克隆趋势,寡克隆和单克隆峰型的家族数量明显多于CD4＋T细胞。由此可知,T细胞在AS的免疫发病机理中扮演重要角色,且提示CD8＋T细胞在AS发病机制中起主导作用。

强直性脊柱炎患者外周血T细胞受体β链可变区基因谱系多态性的初步研究

目的探讨强直性脊柱炎（AS）患者外周血T细胞受体B链可变区互补决定区3（TCRBVCDR3）谱系多态性，为AS免疫发病机制研究提供实验依据。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增AS患者外周血单个核细胞（PBMC）中T细胞TCRBV的26个亚家族CDR3，经免疫扫描谱型技术分析TCRBVCDR3的谱系多态性情况。结果20例活动期AS患者TCRBVCDR3扫描谱型均出现非正态的异常峰型，包括单峰、寡峰／寡峰趋势、偏峰和不规则异常峰型。其中有18例患者部分亚家族出现寡克隆／寡克隆趋势增生，有1例患者BV16和BV18的2个亚家族出现单克隆增生。5名健康对照PBMCTCRBVCDR3谱型绝大多数呈高斯分布。结论AS患者外周血TCRBVCDR3谱系具有显著多态性和谱系漂移特点，进一步表明T细胞在AS免疫发病机制中扮演重要角色。单，寡克隆增生的T细胞有可能是AS发病中的自身反应性T细胞。