口腔扁平苔藓T细胞受体BV基因的优势取用初探

目的:研究口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者损害组织中浸润的T细胞受体(T cell receptor,TCR)BV基因的取用格局。方法:采用实时定量聚合酶链反应,分析OLP患者损害组织中浸润的T细胞和外周血中T细胞TCR BV基因的取用格局。采用GraphPad Prism version 5.00软件对数据进行Mann-Whitney U检验。结果:43例OLP患者的损害组织对BV4、BV14和BV18基因的取用显著高于39例OLP患者外周血对这些BV基因的取用。结论:OLP患者损害组织浸润的T细胞优势取用BV4、BV14和BV18基因,提示带有BV4、BV14和BV18基因的T细胞参与了OLP的发病。

类风湿关节炎患者T细胞受体BV基因的表达

目的 检测中国人群中类风湿关节炎（ Ｒ Ａ） 患者 Ｔ 细胞 Ｔ Ｃ Ｒ Ｂ Ｖ 基因表达的偏移。方法 采用半定量 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 方法，分析６ 例 Ｒ Ａ 患者的外周血、关节液、滑膜（ 每例均取三种标本） 中新鲜分离的未经 Ｉ Ｌ２ 刺激的 Ｔ 细胞 Ｔ Ｃ Ｒ Ｂ Ｖ１ ～２０ 基因片段的表达。结果 患者外周血与正常人外周血 Ｔ Ｃ Ｒ Ｂ Ｖ 基因表达格局相似；患者关节液与滑膜 Ｔ Ｃ Ｒ Ｂ Ｖ 基因表达格局相似；而患者关节内（ 关节液＋ 滑膜） Ｔ Ｃ Ｒ Ｂ Ｖ 基因表达格局与外周血相比， Ｂ Ｖ２ 、 Ｂ Ｖ７ 、 Ｂ Ｖ１１ 高， Ｂ Ｖ１３１ 、 Ｂ Ｖ２０ 低。结论 Ｒ Ａ 患者关节内 Ｔ 细胞在对 Ｔ Ｃ Ｒ Ｂ Ｖ 基因片段的优势表达。

识别猪SLA的特异性人T细胞系TCR BV基因取用格局和CDR3结构多样性分析

不同T细胞克隆TCR分子的序列不同 ,所识别的抗原特异性也不同。其中第三互补决定区 (CDR3)变异最大 ,是TCR主要的抗原结合部位。本文采用荧光标记半定量PCR技术 ,用DNA测序仪作程序分析 ,了解猪细胞抗原致敏前后的人T细胞群和 5个T细胞系 2 4个TCRBV基因家族取用格局 ,并以TCRα链C区的基因片断作为内参对取用情况作定量估计。发现首次抗原致敏后培养 2周的T细胞除了BV2 4、BV8和BV10未能检测出 ,其它BV基因都有不同程度的取用。然而 ,5个细胞系的TCRBV基因呈现十分有限的取用格局 ,其中两个CD4+ T细胞系都取用BV12和BV14;3个CD8+ T细胞系中都优势取用BV1,有两个还取用BV19。CD4+ T细胞系和CD8+ T细胞系之间TCRBV无交叉取用 ,提示两类细胞识别的抗原表位存在差异。进一步用变性凝胶扫描分析上述T细胞系取用TCRBV中的CDR3的多样性 ,发现未经抗原致敏的T细胞BV的CDR3结构为多峰型且呈正态分布 ,表明涉及多种结构不同的细胞克隆 ;而抗原特异性T细胞系CDR3除了一个CD8+ T细胞系BV1有两个主峰外其它无例外地都显示单峰或者仅一个主峰 ,这从另一个角度证明建系T细胞的单克隆性。

T细胞识别HLA DRB1 0901分子显示TCR BV基因取用的高度局限性

目的分析ＤＲ９纯合细胞刺激下ＤＲ９阴性正常人ＴＣＲＢＶ基因片段的取用格局，确定和分离出ＤＲ９关联性疾病中的自身反应性Ｔ细胞克隆。方法常规方法获取ＰＢＭＣ经ＰＣＲ－ＳＳＯ和ＰＣＲ－ＲＦＬＰＤＮＡ分型，确定ＤＲ、ＤＱ、ＤＰ等位基因后，进行单向混合淋巴细胞培养，抽提总ＲＮＡ并合成第一链ｃＤＮＡ，定量ＰＣＲ检测２２种ＴＣＲＢＶ基因片段的取用格局。结果Ｔ细胞对ＤＲ９分子的识别和扩增具有寡克隆性，２例都有ＢＶ７和ＢＶ１６片段的优势取用，而片段ＢＶ１９和ＢＶ１０则在２例中分别表达。结论实验结果表明，共有ＢＶ７和ＢＶ１６片段的优势取用是ＤＲ９抗原等分子经直接途径激活了带有相应ＴＣＲＢＶ细胞的结果；而片段ＢＶ１９和ＢＶ１０在２例中分别表达可能是不同ＨＬＡ背景的ＡＰＣ间接递呈ＤＲ９抗原的结果。