Drug Screening Experiment in vitro of Mycoplasma wenyonii in Cattle

RPMI-1640 was used as the basic culture medium and 30% calf serum was added. Using Berenil, tetracycline,dipterex,tiamulin,imidocarb,florfenicol,ethacri-dine,primaquine phosphate and other drug powder,the drug screening experiment in vitro of Mycoplasma wenyoni was made under the conditions of 37 ℃, 5% CO2. The results showed that the effects of ethacridine was the best ,and that of dipterex and primaquine phosphate were next. The toxicity of dipterex was greater. Berenil, imidocarb and florfenicol were efficient.

基于计算机筛选与分子模拟技术的宁夏肉牛血红蛋白源抗氧化肽的鉴定

采用3种酶解法(碱性蛋白酶(E1组)、胃蛋白酶+胰蛋白酶(E2组)、碱性蛋白酶+胃蛋白酶+胰蛋白酶(E3组))制备宁夏肉牛血红蛋白酶解产物,并筛选出抗氧化活性最佳组分;利用氨基酸分析和液相色谱-串联质谱鉴定分子质量<3 kDa酶解产物的氨基酸组成和序列,利用计算机分析技术筛选出潜在的抗氧化肽,并验证其活性;通过分子模拟技术进一步研究宁夏肉牛血红蛋白抗氧化肽的作用机理。结果表明,E3组酶解效果最佳,超滤后<3 kDa的组分表现出更佳的抗氧化活性(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除率的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为(18.382±0.023)mg/mL和(0.246±0.012)mg/mL);E3(分子质量<3 kDa)组富含疏水性和芳香族氨基酸,且鉴定和筛选出4条活性最佳的抗氧化肽,氨基酸序列分别为DWGHSW、VFYPW、GTGW和TYFPHF;其中,VFYPW表现出最高的DPPH自由基清除率(IC_(50):(0.350±0.013)mg/mL)和ABTS阳离子自由基清除率(IC_(50):(9.482±0.122)μg/mL),其次为DWGHSW;氢键和疏水作用使DWGHSW和VFYPW与Keap1蛋白(PDB ID:2FLU)形成稳定的复合物。该研究可为宁夏肉牛血红蛋白肽作为天然源抗氧化补充剂的应用提供理论依据,有助于宁夏肉牛血液资源的高值化利用。

寻甸县肉牛寄生虫病筛查及流行病学调查

为履行好寻甸县肉牛科技特派团职责,助推寻甸县“一县一业”肉牛产业示范县创建,打造世界一流“绿色食品牌”,推动高原特色农业高质量发展。2021-2022年云南省寻甸县肉牛科技特派团成员对寻甸县16个乡镇,29个肉牛养殖场(户),1个肉牛交易市场,1个屠宰场共采集654份粪便样品和899份全血样品进行了肉牛寄生虫的筛查。结果显示:29个养殖场的899份全血样品中检出巴贝斯虫阳性12份,阳性率为1.33%,阳性场5个,场阳性率17.24%;31个检测场点筛查654份粪便,共筛查出检出了线虫、吸虫、球虫、绦虫、螨虫5类寄生虫虫卵及卵囊,寄生虫总感染数176份,平均感染率为26.91%,其中球虫55份,感染率最高,为8.43%;吸虫47份,感染率为7.68%;牛带绦虫30份,感染率为4.60%;线虫32份,感染率为4.91%,疥螨12份,感染率为1.83%,混合感染的病例44份,占总感染病例的0.25%。阳性场27个,场总体阳性率为87.10%,其中吸虫场阳性率为58.06%;球虫场阳性率51.61%;线虫场阳性率48.38%;绦虫场阳性率38.71%,疥螨场阳性率25.80%。市场环节寄生虫感染率最高,为38.33%(23/60),养殖环节次之,为26.31%(151/574),屠宰环节最少,为10%(2/20)。部分乡镇感染率高;放牧牛群和犊牛感染率较高。本调查结果为寻甸县肉牛寄生虫防控提供了科学的参考依据,指导养殖户规范管理,制定科学的驱虫程序,强化环境消毒等防控措施,切实提高养殖效益和肉牛产品品质,为寻甸肉牛“绿色食品牌”打造贡献兽医力量。

一株瘤胃源产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及其酶学特性研究

该研究从西藏黄牛瘤胃液中筛选一株高产纤维素酶的菌株,通过形态观察、生理生化试验和分子生物学技术对其进行鉴定,并对其酶学特性进行初步研究。结果表明,筛选获得一株高产纤维素酶的菌株N30,并被鉴定为灿烂类芽孢杆菌(Paenibacillus lautus),其发酵72 h时,纤维素酶活力最高,为15.6 U/m L。该纤维素酶的最适反应温度为55℃,在10～35℃之间保持较高的酶活力,相对酶活力>80%;最适反应pH值为4.5,在p H 3.5～9.0时相对酶活>60%;金属离子Ag^(2+)、K^(+)、Mg^(2+)、Fe^(2+)、Zn^(2+)、Co^(+)对纤维素酶活力有促进作用,而金属离子Cu^(2+)对纤维素酶活力有抑制作用。

强化堆肥中木质纤维素降解的功能菌株筛选鉴定

采用多种筛选相结合的方法,从土壤、秸秆、牛粪等不同来源的样品中分离得到3株具有木质纤维素降解能力的细菌,其同时具有使堆肥快速升温和有效除臭潜力。经菌体形态观察、生理生化分析及16S r DNA鉴定,此3株细菌均属于Bacillus sp.。堆肥功能验证试验结果表明,添加此3株功能菌可使堆肥中纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别比对照提高31.31%、19.57%和14.33%;堆肥结束时的发芽率达到93.3%,高出对照36.6%。此3株功能细菌具有很好的促进堆肥中木质纤维素降解和提高堆肥腐熟度的能力,可以考虑将其应用于较大规模的牛粪或其他畜禽粪便的堆肥处理。

利用荧光定量PCR进行饲料中牛羊源性成分检测的快速筛选

通过荧光定量PCR进行饲料中牛羊源性成分的快速筛选研究,其可以快速的检测饲料中是否含有牛羊源性成分,避免了常规检测中大量阴性样品造成的巨大工作量,并首次对饲料中牛羊源性成分进行定量分析,推导出定量计算公式,且灵敏度比常规的PCR检测方法高100倍以上。

奶牛临床型乳腺炎治疗药物筛选及疗效

从 2个不同地点奶牛场临床分离鉴定出奶牛临床型乳腺炎的病原菌 ,其中链球菌、葡萄球菌为主要病原菌。以试管二倍稀释法测定 14种抗菌药物对临床分离病原菌的最小抑菌浓度 (MIC) ,以恩诺沙星 (≤ 0 .0 6～ 1m g/ L )、环丙沙星 (≤ 0 .0 6～ 2 mg/ L)及阿莫西林的 MIC较低。以青霉素 +链霉素为对照 ,选择恩诺沙星、阿莫西林、克拉维酸合剂 (4∶ 1)、阿莫西林作临床疗效试验。结果证明 :0 .5 %阿莫西林 (2 0 0 mg) +克拉维酸 (5 0 mg)合剂 (4∶ 1)溶液 5 0 m L乳房灌注 ,每天 2次 ,平均疗程 3.6 d,对临床型乳腺炎有较好疗效。

不同药物对温氏附红细胞体体外杀灭效果研究

[目的]筛选对温氏附红细胞体体外杀灭具有最佳效果的药物。[方法]以RPMI-1640为基础培养液,加入30%犊牛血清,选用盐酸土霉素、恩诺沙星、磺胺对甲氧嘧啶、硫酸庆大霉素、磷酸伯氨喹啉、盐酸咪唑苯脲、贝尼尔7种药物,在37℃、5%CO2的环境下,进行温氏附红细胞体体外药物杀灭试验。[结果]磷酸伯氨喹、盐酸咪唑苯脲对牛附红细胞体的体外杀灭效果最佳,当培养液药物浓度为2 000μg/ml,药物与附红细胞体作用6 h时,红细胞染虫率显著下降到30%以下。盐酸土霉素、恩诺沙星、贝尼尔和磺胺对甲氧嘧啶对附红细胞体均有一定作用。硫酸庆大霉素具有较强抗菌作用,但对牛附红细胞体病无效。[结论]该研究为临床选择抗附红细胞体病的合适药物提供理论依据。

牛粪厌氧发酵的载体筛选试验研究

为了提高厌氧发酵装置的效率,人们研究了各种各样的方法和措施,其中应用填料或载体使生物菌能够延长驻留期是其中的方法之一,开展载体筛选及其结构设计在厌氧发酵装置中的试验,有助于对此问题的深入研究以及将其成果应用于生产实践。通过静态载体筛选试验选择了玻璃纤维作为载体、PVC塑料管作为载体骨架制成的装置在动态序批式厌氧发酵装置中进行了试验。结果表明:此载体骨架结构对于牛粪动态厌氧发酵具有明显的提高产气效率、改变产气质量和促进有机物转化为挥发性脂肪酸的作用。

奶牛真菌性乳房炎敏感药物的筛选

以引起奶牛乳房炎的5株酵母样真菌作为研究对象,选用制霉菌素等5种抗真菌用药物、痢菌净等10种常用抗生素和黄连等8味中草药制剂,进行体外敏感药物的筛选。结果显示:5株酵母样真菌对制霉菌素、痢菌净、黄连制剂均高度敏感,对氟康唑、氟苯尼考等多种药物不敏感。

发酵牛羊粪的纤维素分解菌筛选

通过固体培养初选和摇瓶发酵复选,从腐烂的秸秆、腐草、腐树干中筛选获得酶活较高的真菌、放线菌和细菌各2株,将6个菌株分别接种到不同的碳源的牛羊粪中,经过2d培养后测定其CMC酶活。结果表明:不同菌种对同一粪便的酶活力不一样;同一菌株在不同粪便中表现的酶活力也不一样。其中,P2-6和P2-7在牛粪上酶活力最强,P2-6和B2-6及P2-7在羊粪上酶活力较强。最终确定以上3株菌株为牛羊粪堆肥发酵的首选菌株。

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)持续感染牛的筛查与胚胎移植

为了保证胚胎移植的效果,达到良种繁育的目的,对胚胎移植的受体牛进行了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)-持续感染(PI)牛的筛查。首先采取受体牛血清样本,然后提取样本RNA,反转录为c DNA,进行RT-巢式PCR,根据琼脂糖凝胶电泳结果,确定受体牛是否是BVDV-PI牛。初次检测结果为阴性的牛,可作为胚胎移植的备选牛。初检阳性的牛,进行隔离,3周后进行复检,连续进行两次复检,如果3次检测结果都为阳性,认定该牛为BVDV-PI牛,予以淘汰。如果复检为阴性,则判为BVDV急性感染牛,可继续使用。结果 108头受体牛中,确认3头受体牛为BVDV-PI牛,予以淘汰,BVDV-PI牛阳性率2.8%。剩下的105头受体牛,通过直肠检查可用于胚胎移植的81头。45天后孕检,怀孕61头,受胎率75.3%。

阳性水牛、黄牛IgG筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库

为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,从感染日本血吸虫的水牛、黄牛血清中纯化IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44日龄)噬菌体展示c DNA文库。经每种动物IgG三轮(总计六轮)筛选后,随机挑取53个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析。获得了9个EST序列,其中7个EST序列与已知基因或表达序列标签同源,2个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,以噬菌体展示载体的10B衣壳蛋白开放阅读框(open reading frame,ORF)为依据,对上述7个与Gen Bank数据库资料同源的EST进行对码分析,结果 7个EST序列能和噬菌体展示载体阅读框对码,为有效展示序列。其中3个EST具有较高的重复度,在51个有效克隆中,25个为HSP70 homolog基因,15个为Keratin9基因有重复,6个为Ornithine--oxo-acid transaminase基因。研究结果显示,HSP70 homolog基因、Keratin9基因和Ornithine--oxo-acid transaminase基因作为诊断家畜血吸虫病候选抗原基因,值得进一步开展克隆、表达和诊断效果评估方面的研究。

广西生物垫床养牛厚度筛选及菌种优化研究

[目的]生物垫床养牛成功的关键在于垫料厚度和菌种的选择使用。垫料一般以稻壳、木糠为主,市场上菌种质量参差不齐,且价格昂贵,导致效果千差万别。本研究主要对垫料厚度和菌种进行筛选试验,以获得能够适用于广西地区牛用生物垫床的最适厚度和最优菌种,为生物垫床的推广应用提供数据支撑。[方法]研究以木糠作为垫料,A、B2个菌种开展研究,分设3个不同厚度(5 cm,10 cm,15 cm)6个组和无垫料2个组。[结果]结果表明,第1组和第4组(5cm垫料厚度)腐坏面积大,差异显著(P<0.0.5)。第3组和第6组(15 cm垫料厚度)板结的垫料多,造成垫料的浪费,差异显著(P<0.0.5)。第2组和第5组之间垫床的影响差异不显著(P>0.0.5),生物垫料组(第2组和第5组)的氨气浓度与无(粪)垫料组(第7组和第8组)差异显著(P<0.0.5)。[结论]第2组的生物垫料和A菌种成本低、腐坏面积小,10 cm的垫料厚度是比较理想的垫料厚度,适合广西牛用生物垫床的饲养要求。

治疗奶牛乳房炎蒙药复方中最佳抑菌成分复方的筛选研究

为了筛选治疗奶牛乳房炎的最佳抑菌组方,试验采用牛津杯法从乳房炎患牛乳样中分离出致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,再从治疗奶牛乳房炎蒙药复方的9种有效成分中筛选出4种对这2种细菌均有最佳抑菌效果的成分;根据抑菌圈直径,结合L8(24)正交试验设计,筛选出最佳成分组方,再根据L9(34)正交试验优化用药剂量,进行体内抑菌试验,选出保护率最佳的抑菌组方。结果表明:抑菌组方与盐酸环丙沙星的抗菌保护率均为62.5%。说明抑菌组方体内抑菌效果与盐酸环丙沙星相当,并且获得了治疗奶牛乳房炎纯天然蒙药抑菌成分复方。

肉牛粪污中纤维素降解菌的分离筛选

为了获得有效降解肉牛粪污中纤维素的细菌,采用以羧甲基纤维素钠为碳源的方法对牛粪及其自然堆肥样品进行纤维素降解菌的分离,对已分离菌株进行形态学和分子生物学鉴定,再结合纤维素刚果红水解圈测定和滤纸条降解试验做进一步研究。结果表明,以羧甲基纤维素钠为碳源,初步分离得到牛粪样品及堆肥中32株纤维素降解菌,进一步筛选得到有刚果红水解圈菌株4株,分别为XQ-1、XQ-2、XQ-3、XQ-4,其对滤纸条具有一定的降解能力,经16S rDNA鉴定,4株菌株分别为大肠埃希菌(Escherichia coli)、黏质沙雷菌(Serratia marcescens)、雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)和费格森埃希菌(Escherichia fergusonii)。

高寒牧区育肥牛饲料配方筛选试验及效益分析

[目的]高寒牧区肉牛育肥对饲料的要求与其他地区存在着明显的差异,环境因素、气候条件、饲草料现状都是制约肉牛育肥产业发展的瓶颈。因此选择适宜的饲料配方对高寒牧区肉牛育肥产业的发展显得极为重要。[方法]本饲料配方筛选试验通过组间对比选择,筛选出适宜高寒牧区肉牛育肥的试验配方。在实际应用中取得了较好的效果。[结果]表明:筛选出适合本地育肥牛的1号料和3号料,饲喂1号料的A组比饲喂2号料的B组和4号料的D组,头均日增重高84g和142g(P<0.01)差异极显著,头均多获利81.80元和147.18元;饲喂3号饲料的C组比饲喂2号料的B组和4号料的D组,头均日增重高64g和122g(P<0.01)差异极显著。[结论]头均多获69元和133.84元。

3种不同瘤胃缓冲剂对肉牛消化利用的影响

[目的]评价3种瘤胃缓冲剂对肉牛的采食量和消化利用率的影响。[方法]试验对24头425 kg左右西门塔尔肉牛服用缓冲剂后的采食量、粪筛数据以及养分表观消化率进行分析。[结果]日粮中添加0.8%巴菲特处理的采食量较日粮中添加2%小苏打和1%瘤胃缓冲剂分别增加了2.6%和1.94%,日粮中添加0.8%巴菲特处理粪便筛上层、中层、下层占比试验后较试验前分别降低了44.7%,59.14%以及增高了55.92%。日粮中添加0.8%巴菲特处理肉牛的DM、GE、CP、NDF和ADF的表观消化率都有不同程度提高(P<0.05)。[结论]日粮中添加0.4%巴菲特瘤胃修复剂可提高肉牛的采食量,对其饲料表观消化率有明显的促进作用。

干旱半干旱区肉牛育肥典型日粮筛选试验

[目的]为筛选原料来源广泛、价廉物美的原材料进行育肥肉牛日粮配制。[方法]选择年龄18~24月龄、体重250~300kg健康的西门达尔杂种肉牛30头,随机分为试验Ⅰ、Ⅱ组,每组15头;试验Ⅰ组、Ⅱ组粗饲料分别为青贮玉米秸秆、氨化麦秸,自由采食。试验Ⅰ组随机分为A、B、C三个组,试验Ⅱ组随机分为D、E、F三个组,每组平均5头,依次分别饲喂混合精料配方1、配方2和配方3,育肥牛在同舍以组为单位分栏饲喂90天后。[结果]显示：试验Ⅰ组日增重比试验Ⅱ组高13.98%（P〈0.05）、饲料报酬高9.55%;其中试验Ⅰ组中B组的日增重1.34kg,分别比A、C、D、E、F组提高13.56%（P〈0.05）、16.52%（P〈0.0541.05%（P〈0.01）、11.67%（P〈0.05）和25.23%（P〈0.01）,饲料报酬3.77：1,分别比C、D、E、F组提高9.16%、9.59%、5.28%和11.29%。试验Ⅱ组中E组的平均日增重为1.20kg、饲料报酬为3.98：1,同组育肥效果最好;头均纯收入试验Ⅰ组高于试验Ⅱ组295.2元,试验Ⅰ组B组效益最好,试验Ⅱ组E组效益最好。[结论]肉牛育肥生产中,在日粮精料相同情况下,日粮中饲喂青贮玉米秸秆育肥效果显著好于饲喂氨化麦秸;但选用青贮玉米秸秆为粗饲料时,选用B组混合精料配方育肥效果最好;选用氨化麦秸为粗饲料时,选用E组混合精料配方育肥效果最好。两个粮配方在定西及类似地区均有取材方便、价格较低的特点,值得在肉牛育肥中推广。