罗非昔布对胰腺癌BXPC-3细胞裸鼠移植瘤血管形成的影响

背景与目的:肿瘤血管形成在肿瘤细胞浸润性生长中起了重要作用,增加表达的环氧合酶-2与快速生长肿瘤中的血管形成有关。本研究目的是观察选择性环氧合酶-2抑制剂—罗非昔布抑制胰腺癌生长的体内效应,以及对胰腺癌移植瘤相关血管形成的影响。方法:将表达有环氧合酶-2的人胰腺癌细胞BXPC-3种植入裸鼠皮下,形成移植瘤。经口灌入罗非昔布30mg·(kg·d)-1,共8周,记录肿瘤大小,采用Ⅷ因子免疫组化显示血管密度,BXPC-3细胞上的血管内皮生长因子(VEGF)检测亦用免疫细胞化学染色。采用RT-PCR和明胶酶法检测胰腺癌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达及酶活性的变化。结果:罗非昔布对裸鼠胰腺癌移植瘤的肿瘤重量抑瘤率为73.64%,肿瘤体积抑瘤率为87.74%。实验组胰腺癌组织微血管密度犤(1.5±0.2)个/200倍放大视野犦明显低于对照组犤(4.7±1.5)个/200倍放大视野犦。与对照组比较,罗非昔布显著降低了胰腺癌BXPC-3细胞中VEGF、MMP-2mRNA的表达以及酶活性。结论:减少胰腺癌相关的血管形成是罗非昔布阻止胰腺癌生长的机制之一。

COX-2抑制剂联合survivin反义寡核苷酸抗胰腺癌BxPC-3细胞的效应

目的:探讨COX-2抑制剂和survivin反义寡核苷酸联合应用对胰腺癌BxPC-3细胞的抗肿瘤效应及其可能机制.方法:应用胰腺癌BxPC-3细胞进行研究,将BxPC-3细胞分为4组:A组(对照组),B组(Celecoxib 80μmol/L)组,C组(300 nmol/L survivin ASODN),D组(80μmol/L celecoxib+300 nmol/L survivin ASODN).采用MTT检测细胞增殖.流式细胞仪检测细胞凋亡率,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,并用RT-PCR检测Bcl-2、survivin和Mcl-1的mRNA国的变化.结果:将80μmol/L celecoxib和300 nmol/L survivin反义寡核苷酸单独或联合作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h和48h,D组细胞的存活率明显低于B,C组(24h:41.0%±0.4% vs 71.0%±2.2%,63.3%±4.5%;48h:34.2%±1.1% vs 61.6%±1.7%,55.0%±3%;P<0.01).作用24h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,D组细胞的凋亡率明显高于B,C组(30.33%±3.49% vs 11.93%±1.17%,22.07%±0.93%;P<0.01).caspase-3活性在B,C,D组明显高于对照组(0.04867±0.0021,0.02967±0.0021,0.08767±0.0042 vs 0.007±0.0001;P<0.01),D组细胞的caspase-3活性明显高于B,C组(0.08767±0.0042 vs 0.04867±0.0021,0.02967±0.0021;P<0.01).用100μmol/L塞来昔布作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h后,survivin/β-actin和Mcl-1/β-actin的mRNA的比值明显低于对照组(0.68±0.05 vs 1.05±0.06,P<0.01),而Bcl-2/β-actin的mRNA的比值无明显变化(0.99±0.02 vs 1.07±0.06,P>0.05).结论:联合应用COX-2抑制剂塞来昔布和survivin反义寡核苷酸可明显诱导胰腺癌细胞的凋亡,抑制细胞增殖,并能够明显提高caspase-3活性.COX-2抑制剂塞来昔布诱导细胞凋亡可能通过survivin和Mcl-1途径,而非Bcl-2途径.

冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞Cyclin D/Rb/p16信号蛋白的影响研究

[目的]通过观察冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞形态和DNA变化的影响,研究其对Cyclin D/Rb/p16信号通路中基因表达的调节作用,分析冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞的诱导与Cyclin D/Rb/p16信号通路之间的内在联系,为冬凌草甲素抗肿瘤提供可能的途径,为临床使用提供有利数据。[方法]冬凌草甲素作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色和Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态,RT-PCR和实时荧光定量法(realtime PCR)检测Cyclin D/Rb/p16信号通路基因的表达变化;甲基化专一性PCR试剂盒检测p16基因的甲基化。[结果]冬凌草甲素(32μg·mL-1)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,冬凌草甲素(32μg·mL-1)作用BxPC-3细胞36 h时,CDK4的表达量达到最低,但p16的表达量达到最高;p16基因有甲基化。[结论]1、冬凌草甲素能诱导BxPC-3细胞形态改变。2、冬凌草甲素在一定程度下调了CDK4基因的表达,上调了p16基因的表达,不能改变p16基因的甲基化,可能通过影响Cyclin D/Rb/p16信号通路而抑制胰腺癌的生长周期。

丁酸钠对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡机制的影响

目的:探讨丁酸钠对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度丁酸钠对BxPC-3细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞仪检测丁酸钠作用于BxPC-3细胞后的凋亡情况;TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性的变化;RT-PCR技术分析人端粒酶逆转录酶(hTERT)、bcl-2 mRNA的表达水平。结果:丁酸钠作用BxPC-3细胞能明显抑制细胞增殖,其作用具有时间和剂量依赖性。丁酸钠处理72 h的BxPC-3细胞凋亡率明显提高(P<0.01),S期细胞比例显著下降(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05)。经丁酸钠处理的实验组端粒酶活性为0.96±0.12,未经丁酸钠处理的对照组端粒酶活性为4.18±0.34,二者之间差异有显著性(P<0.05)。丁酸钠处理的实验组hTERT mRNA水平为0.168±0.045,与对照组0.685±0.141比较差异有统计学意义(P<0.01),bcl-2实验组水平为0.138±0.034,与对照组0.715±0.026比较有统计学差异。结论:丁酸钠具有强烈诱导胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的作用,其发生机制与丁酸钠下调hTERT Bcl-2 mRNA表达水平直接相关。

蛋白激酶Cα反义寡核苷酸对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响

目的:观察蛋白激酶Cα(PKCα)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响。方法:将BXPC-3细胞分为7组:对照组,64mg/L随机寡核苷酸序列(RODN)转染组,4mg/L、8mg/L、16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组,RT-PCR方法检测PKCαmRNA表达情况;以有效转染浓度的ASODN转染BXPC-3细胞,并设对照和RODN组,Transwell侵袭小室方法检测BXPC-3细胞体外侵袭能力。结果:16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组PKCα/GADPHmRNA灰度值(0.6371±0.0360,0.5632±0.0080,0.2389±0.0200)均低于对照组(0.9121±0.0250)(P<0.05),RODN组(0.9147±0.0170)、4mg/LASODN组(0.9123±0.0180)和8mg/LASODN组(0.9116±0.0290)与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组穿膜细胞数(286±10)和RODN组(268±3)比较,转染16mg/LPKCαASODN(119±9)可降低胰腺癌BXPC-3细胞的体外侵袭力(P<0.05)。结论:靶向PKCα的ASODN可有效阻断其在人胰腺癌BXPC-3细胞中的表达,并降低癌细胞体外侵袭力。

辛伐他汀对胰腺癌BxPC-3细胞株Shh相关蛋白的影响

目的探讨辛伐他汀对胰腺癌Bx PC-3细胞株Shh相关蛋白的影响。方法胰腺癌Bx PC-3细胞株随机分成对照组,5-氟尿嘧啶(5-FU)组(50μmol/L),辛伐他汀高、中、低剂量组(20,10,5μmol/L)。采用台盼蓝染色法和MTT法检测胰腺癌Bx PC-3细胞株的生长曲线和增殖抑制率;采用细胞划痕法检测胰腺癌Bx PC-3细胞株运动能力;采用免疫组织化学、RT-PCR法检测胰腺癌Bx PC-3细胞株Shh、Ptch1、Smo、Gli1水平。结果与对照组比较,5-FU组,辛伐他汀高、中剂量组胰腺癌Bx PC-3细胞OD值、运动能力和Shh、Ptch1、Smo、Gli1水平明显降低(P<0.05)。结论辛伐他汀通过抑制Bx PC-3细胞株Shh、Ptch1、Smo、Gli1水平在胰腺癌治疗中发挥积极作用。

蝙蝠葛酚性碱及其单体成分对胰腺癌细胞BxPC-3细胞增殖作用的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱及其单体成分对体外胰腺癌细胞BxPC-3增殖的影响。方法:BxPC-3细胞传代培养,分别加入高中低3个剂量的PAMD、DS、Dau及比例组溶液,作用72小时,以MTT比色法检测吸光度(OD值),计算对BxPC-3细胞的增殖抑制率。结果:PAMD高中低剂量组的抑制率分别为93.27%、24.64%、15.45%,Dau高中低剂量组的抑制率分别为67.18%、24.09%、12.00%,DS高中低剂量组的抑制率分别为20.18%、15.64%、6.27%,比例组高中低剂量组的抑制率分别为30.18%、41.27%、17.36%;除Dau和DS低剂量组外,各组与空白组对照组比较,均有统计学差异(P<0.05)。结论:PAMD及其单体成分Dau和DS对BxPC-3细胞增殖均有抑制作用,但是Dau、DS及比例组药物对BxPC-3细胞的增殖抑制作用弱于PAMD组,说明PAMD对BxPC-3细胞的增殖抑制作用还可能与PAMD内其他成分有关。

维生素D_3衍生物MART-10对人胰腺癌BxPC-3细胞的生长及survivinmRNA、c-myc蛋白、P21蛋白表达的影响

目的:研究维生素D_3衍生物MART-10对人胰腺癌BxPC-3细胞的生长及survivin mRNA、c-myc蛋白、P21蛋白表达的影响,以期探讨其抑癌机制.方法:四甲基谷氮咪盐(methyl-thiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测MART-10对BxPC-3细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞周期,观察细胞的生长情况;逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测BxPC-3细胞中survivin mRNA的表达;Western blot法检测BxPC-3细胞中c-myc蛋白和P21蛋白的表达.结果:MTT结果显示,MART-10可显著抑制人胰腺癌BxPC-3细胞的生长,其抑制50%细胞生长的给药浓度(IC50)为10-7 mmol/L;流式细胞术结果显示,癌细胞在MART-10的作用下,G0/G1期的细胞比例上升而S期的细胞比例则下降;RT-PCR及Western blot结果表明,随着MART-10作用时间的延长及给药浓度的增加,胰腺癌BxPC-3细胞中survivin mRNA和c-myc蛋白的表达量逐渐减低,而P21蛋白的表达量则逐渐增强.结论:维生素D_3衍生物MART-10对人胰腺癌BxPC-3细胞的生长具有显著抑制作用,其作用的机制可能与其调节survivin、c-myc及P21的表达有关.

五种重组人源IL-18突变子表达质粒的构建及其在BxPC-3细胞中的表达

目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础。方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平。结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达。

双自杀基因CD+TK对胰腺癌BxPC-3细胞的影响

目的探讨逆转录病毒介导的双自杀基因对胰腺癌BxPC-3细胞的杀伤作用及胰腺癌的基因治疗方法。方法通过脂质体将含有双自杀基因的逆转录病毒载体MMLV-CD+TK导入包装细胞PA317,经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+TK细胞株,收集病毒上清液,浓缩后转染胰腺癌BxPC-3细胞系,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的BxPC-3/CD+TK细胞株。用RT-PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine,5-FC)和(或)无环鸟苷(Ganciciovir,GCV)后,MTT法测定转基因组及未转基因组胰腺癌BxPC-3系细胞的存活率。结果双自杀基因在胰腺癌BxPC-3系细胞中可稳定表达,联合使用5-FC和GCV对细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应效果明显。结论逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死胰腺癌Bx-PC-3系细胞,双自杀基因具有更强的抗肿瘤作用。

p73β基因对胰腺癌BxPC-3细胞的抑制作用

目的将p73β基因转染胰腺癌BxPC-3细胞,观察其对胰腺癌细胞生物活性的影响。方法将pcDNA3.1-N0和pcDNA3.1-p73β基因转染胰腺癌BxPC-3细胞,用MTT法进行细胞凋亡检测。结果该扩增片段经限制性核酸内切酶酶切鉴定,p73β基因相对表达量明显高于BxPC-3细胞和空载质粒转染细胞BxPC-3-pcDNA3.1-N0两对照组(P<0.05)。与两对照组相比,重组质粒转染细胞pcDNA3.1-p73β实验组细胞增殖明显减弱(P<0.05)。结论包含人类p73基因TAp73β转录本蛋白编码区的cDNA片段被成功扩增,其末端带有限制性核酸内切酶XbaⅠ、KpnⅠ识别序列,且对胰腺癌细胞有抑制作用。

薏苡仁油对人胰腺癌BxPC-3细胞影响IL-18表达的体外实验研究

目的:研究薏苡仁油对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖影响及相关微环境因素作用,探讨其可能的肿瘤作用机制,为胰腺癌的中西医结合治疗提供实验依据。方法:分组研究,将薏苡仁油作用于人胰腺癌BxPC-3细胞,通过四唑蓝(MTT)法观察细胞增殖状况;收集与MTT法等条件分组培养的细胞培养液上清做IL-18 ELISA。结果:体外培养的BxPC-3细胞经薏苡仁油作用后,增殖受到明显抑制,作用具有浓度依赖性,加药组中以20 mL/L薏苡仁油剂量组的作用最佳,有效作用最佳时间段在36 h左右;薏苡仁油加药组对IL-18的蛋白表达水平显著高于空白对照组(P<0.05),表达水平具有浓度依赖性,48 h达到最高峰值后随即下降。结论:薏苡仁油具有抗人胰腺癌BxPC-3细胞增殖作用,可短暂性上调BxPC-3细胞IL-18的表达。

二甲双胍对胰腺癌BxPC-3细胞恶性表型的影响

目的:探索二甲双胍对胰腺癌BxPC-3细胞恶性表型的影响。方法:以Smad4基因天然缺失型人胰腺癌BxPC-3细胞为对象,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测不同剂量二甲双胍(5、10、20 mmol/L)作用24 h后的细胞增殖和凋亡情况,并计算细胞存活率和凋亡率;采用Transwell迁移试验检测不同剂量二甲双胍(10、20 mmol/L)作用24 h后的细胞迁移情况,记录迁移细胞数;采用实时定量聚合酶链反应法和Western blotting法分别检测细胞中钙黏着蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、补体反应基因32(RGC-32)的mRNA及蛋白表达情况。结果:与对照组和5 mmol/L二甲双胍组比较,10、20 mmol/L二甲双胍组细胞的存活率均显著降低,凋亡率均显著升高,且20 mmol/L二甲双胍组细胞的凋亡率显著高于10 mmol/L二甲双胍组(P<0.05)。与对照组比较,10、20 mmol/L二甲双胍组迁移细胞数均显著减少,且20 mmol/L二甲双胍组显著少于10 mmol/L二甲双胍组(P<0.05);10、20 mmol/L二甲双胍组细胞中E-cadherin mRNA及其蛋白的相对表达量均显著升高,且20 mmol/L二甲双胍组E-cadherin mRNA的相对表达量显著高于10 mmol/L二甲双胍组;10 mmol/L二甲双胍组细胞中Vimentin mRNA,20 mmol/L二甲双胍组细胞中Vimentin mRNA及其蛋白以及10、20 mmol/L二甲双胍组细胞中RGC-32 mRNA及其蛋白的相对表达量均显著降低,且20 mmol/L二甲双胍组Vimentin mRNA及其蛋白、RGC-32 mRNA的相对表达量均显著低于10 mmol/L二甲双胍组(P<0.05或P<0.01)。结论:二甲双胍可剂量依赖性地通过Smad4非依赖性通路抑制BxPC-3细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,这可能与胰腺癌细胞上皮间质转化过程以及RGC-32表达受到抑制有关。

桂皮酸对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨桂皮提取物桂皮酸对胰腺癌细胞系BxPC-3细胞增殖和凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法以胰腺癌BxPC-3细胞为研究对象,用不同浓度(0~8mmol·L^(-1))桂皮酸分别处理24、48、72h后,CCK-8比色法检测细胞活力;桂皮酸(0、1、2、4mmol·L^(-1))处理BxPC-3细胞48h后,PI/AnnexinⅤ检测细胞凋亡率,Western blot法检测药物对细胞Bax、Bcl-2、PTEN、Akt、p-Akt蛋白表达的影响。结果桂皮酸能有效抑制BxPC-39细胞增殖,且呈浓度、时间依赖性;桂皮酸处理BxPC-3细胞48h后,细胞凋亡率增加;促凋亡蛋白Bax表达量上调,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达量下调;此外,桂皮酸可上调PTEN蛋白表达,并下调Akt蛋白磷酸化。结论桂皮酸可抑制BxPC-3细胞增殖并诱导凋亡,其作用机制可能与上调PTEN蛋白表达并抑制Akt蛋白磷酸化,继而上调Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白相关。

紫杉醇诱导人胰腺癌细胞Bxpc-3细胞凋亡的实验研究

目的观察紫杉醇(PA)对体外培养的Bxpc-3细胞凋亡的影响。方法体外培养Bxpc-3人胰腺癌细胞,采用MTT法检测不同浓度PA对Bxpc-3细胞的抑制情况,采用流式细胞术检测Bxpc-3细胞的周期及凋亡率。加入正常的培养液作为对照。结果与对照相比,不同浓度PA(100,50,25mg/ml)作用24h可使Bxpc-3细胞生长明显抑制,抑制率呈浓度依赖关系;Bxpc-3细胞在PA100,50mg/ml作用下,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例和增殖指数(PI)下降;PA100,50mg/ml作用48h后凋亡指数(AI)增高,AI/PI比例分别是对照组的6倍和2.5倍。结论PA对Bxpc-3细胞生长有抑制作用,可诱导人胰腺癌细胞Bxpc-3细胞凋亡。

生长抑素联合吉西他滨对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖抑制作用的研究

目的:初步探讨生长抑素(SST)、吉西他滨(Gem)单药或联合用药对人原位胰腺癌细胞BxPC-3细胞增殖的影响。方法:(1)体外培养人原位胰腺癌细胞BxPC-3。使用不同浓度生长抑素干预24h、48h、72h;不同浓度吉西他滨干预72h;计算出生长抑素及吉西他滨半数抑制浓度(IC50),联合用药进行干预。具体分组:A组:空白对照组,B组:生长抑素IC50浓度,C组:吉西他滨IC50浓度,D组:1/2生长抑素IC50浓度+1/2吉西他滨IC50浓度,干预72h;(2)MTT法检测各浓度药物对细胞增殖抑制的影响。结果:生长抑素及吉西他滨均可抑制人原位胰腺癌细胞BxPC-3的增殖,且与药物的浓度和时间正相关;联合用药组比单药组的抑制作用明显增强。结论:生长抑素及吉西他滨均可抑制人原位胰腺癌细胞BxPC-3的增殖,两者联合作用效应更强。

miR-203a-3p在胰腺癌组织与细胞中的表达及其对BxPC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨miR-203a-3p对胰腺癌BxPC-3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:运用癌症基因组图谱(TCGA)数据库筛选胰腺癌组织和癌旁组织中差异表达的miRNA,分析miRNA高表达与低表达时胰腺癌患者的生存率和临床分期;利用TarBase数据库分析miRNA与癌症相关的GO功能与KEGG通路,利用DIANA Tools、miRDB和TargetScan网站预测miR-203a-3p的靶基因。将miR-203a-3p mimic及NC mimic、miR-203a-3p inhibitor及NC inhibitor转染至BxPC-3细胞,用qPCR法检测胰腺癌细胞和胰腺正常上皮细胞HPNE中miR-203a-3p、miR-192-5p和miR-451a表达水平,以CCK-8法、Transwell小室法和克隆形成实验分别检测BxPC-3细胞的增殖、迁移、侵袭和集落形成能力。结果:通过TCGA数据库筛选出18个胰腺癌组织中差异表达的miRNA,其中miR-203a-3p、miR-192-5p、miR-451a具有物种保守性,且其与胰腺癌临床癌症分期、细胞周期和患者生存率相关(均P<0.05);生物信息学网站预测显示miR-203a-3p的候选靶基因是PPM1A,PPM1A与多基因存在相互作用。miR-203a-3p、miR-192-5p和miR-451a在BxPC-3和Aspc-1细胞中均高表达(均P<0.01)。miR-203a-3p mimic组BxPC-3细胞中miR-203a-3p表达水平以及细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著提高(均P<0.01);miR-203a-3p inhibitor组细胞中miR-203a-3p表达水平以及细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(均P<0.01)。结论:miR-203a-3p在胰腺癌组织及细胞中均高表达,其表达与患者生存和临床分期相关,可调控BxPC-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

敲低NEDD9基因表达对胰腺癌BxPC-3细胞体内外功能的影响

目的探讨敲低NEDD9基因表达对胰腺癌BxPC-3细胞体内外功能的影响。方法采用NEDD9 shRNA干扰质粒(Y2602)敲低NEDD9表达,将预处理的BxPC-3细胞分为BxPC-3 Y2602组[转染干扰序列(Y2602)]、BxPC-3 NC组(不做任何处理)及BxPC-3 Blank组[转染无义序列(Y007)],通过平板克隆形成实验检测3组细胞增殖情况,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,同时制备3组细胞悬液接种于裸鼠皮下成瘤建立动物模型,通过比较3组裸鼠肿瘤生长情况及瘤体大小分析敲低NEDD9后对BxPC-3细胞体内功能的影响。结果与其他2组对比,BxPC-3 Y2602组细胞增殖受到抑制、迁移至小室下室面的细胞数减少、迁移距离缩短(P<0.05)。BxPC-3 Y2602组多时点检测条件下肿瘤的体积更小,瘤体质量更小(P<0.05)。结论敲低NEDD9基因表达抑制BxPC-3细胞体内外增殖、迁移及侵袭能力,其是潜在的胰腺癌治疗靶点。

山姜素介导NF-κB信号通路对胰腺癌细胞BXPC-3增殖、侵袭和炎症反应的影响

目的探讨山姜素介导核因子-κB(NF-κB)信号通路对胰腺癌细胞BXPC-3增殖、侵袭能力和炎症反应的影响。方法将人胰腺癌细胞BXPC-3分为对照组(0μmol/L山姜素)和不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)山姜素处理组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell小室法检测细胞侵袭,蛋白免疫印迹法检测相关蛋白表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测炎症因子表达情况。结果CCK-8实验结果显示,与对照组比较,不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)山姜素处理后,胰腺癌细胞BXPC-3的细胞活力显著下降(P<0.05);且山姜素浓度越高、处理时间越长,对BXPC-3细胞活性的抑制作用越明显(P<0.05)。与对照组比较,经50、100、200μmol/L山姜素溶液处理后,细胞的克隆形成率、细胞侵袭能力、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、神经-钙黏素(N-cadherin)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、NF-κB亚基p65、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白表达水平均明显下降,转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10、上皮-钙黏素(E-cadherin)及NF-κB抑制蛋白(IκBα)蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。加入激活剂脂多糖(LPS)后,细胞活力、细胞侵袭能力、TNF-α、IL-6、p65、MMP-9、cyclin D1蛋白表达水平明显上升,TGF-β、IL-10、IκBα蛋白表达水平明显下降(P<0.05);而加入NF-κB通路抑制剂Sulfasalazine后上述指标变化相反。结论山姜素可抑制胰腺癌细胞BXPC-3的增殖、侵袭能力和炎症反应,其机制可能与介导NF-κB信号通路有关。

薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响

目的研究薏苡仁油(康莱特注射液)体外对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长和血管生长因子的影响,探讨薏苡仁油抗肿瘤作用机制。方法薏苡仁油作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色观察细胞形态,Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化。结果薏苡仁油(2 mg/mL,20μL/mL)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,琼脂糖电泳观察到明显的细胞凋亡特征性DNA梯形条带;细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞上清液中VEGF、bFGF的表达水平明显下调。结论薏苡仁油能影响BxPC-3细胞生长周期,导致细胞周期阻滞,下调VEGF和bFGF的表达水平,可能对抑制胰腺癌细胞的扩散产生一定作用。