内蒙古自治区2015-2018年B Yamagata系流感病毒全基因组序列分析

目的了解2015-2018年内蒙古自治区B Yamagata系流感病毒的全基因组序列特征。方法采集流感样病例呼吸道标本进行流感病毒分离,提取病毒RNA,采用一步法RT-PCR扩增病毒全基因组序列并测序,通过生物信息学软件分析病毒基因特征。结果本次研究的B Yamagata系流感病毒全基因与B/Phuket/3073/2013疫苗株的核苷酸同源性在97.7%～99.9%之间;B/Inner Mongolia/1200/2015和B/Inner Mongolia/1178/2015毒株发生抗原漂移,并出现HA-BY/NABV系间重配现象;所有毒株对神经氨酸酶抑制剂敏感。结论 2015-2018年内蒙古自治区B Yamagata系流感病毒抗原性和基因特征在逐渐发生变异,出现系间重配株,部分流感流行株与疫苗匹配性不佳。

包头市部分人群乙型两系流感病毒抗体的血清学检测及分析

目的:了解包头市部分人群中乙型流感病毒Ymagata和Victoria两系的感染情况,分析其易感人群的年龄和性别特征,为本地区针对性制定防控流感措施提供依据。方法:应用常规血凝抑制试验微量半加敏法检测455份血清中乙型两系抗体,并计算抗体阳性率和进行统计学分析。结果:Ymagata系B/上海/361/2002流感病毒株的抗体阳性率为43.7%,易感人群在性别上差异有统计学意义(χ2=5.076,P<0.05);Victoria系B/浙江/2/2001株的抗体阳性率为71.0%,易感人群在年龄间差异有统计学意义(χ2=10.021,P<0.05)。结论:流感病毒Ymagata型B/上海/361/2002株易感人群多见于男性,Victoria型B/浙江/2/2001株易感人群多见于儿童和少年。

乙型流感病毒Yamagata系毒株的消失及其疫苗株更换的思考及讨论

乙型流感病毒B/Yamagata系毒株作为季节性流感病毒,已流行近半个世纪。期间,B/Yamagata系毒株与其他亚型或谱系流感病毒一样,经过不断变异和进化,形成多个流行分支。2014年,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)推荐B/Yamagata系3A分支B/Phuket/3073/2013为候选疫苗株,之后,3A分支病毒一直为B/Yamagata系的优势毒株。2020年3月以来,全球再未分离到B/Yamagata系毒株,B/Yamagata系毒株可能已在人间消失。近期,关于去除掉四价流感疫苗中B/Yamagata组分的建议越来越明确。本文回顾了乙型流感及其疫苗株的发展历史,客观分析了B/Yamagata系毒株消失的可能原因,综合描述了病毒学、流行病学、免疫学以及与疫苗免疫相关的社会科学、疫苗生产企业等多学科、多部门的观点,并对防止B/Yamagata系毒株重现提出建议,同时也建议疫苗监管部门和生产企业做好工作计划,为四价疫苗更换为三价疫苗做好充分准备。

珠海市2007-2008年乙型流感病毒基因特性分析

目的了解珠海市近两年乙型流感病毒的基因变异情况。方法采集珠海市流感样病例样本进行流感病毒的分离和鉴定,并对分离到的乙型流感病毒进行核酸的提取,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增病毒基因后进行病毒血凝素HA1基因核苷酸序列测定,用Mega、DNA Star、GeneDoc软件对测序结果进行分析处理,并与WHO推荐的疫苗株基因序列进行比对。结果 2007-2008年分离的乙型流感毒株分属于Yamagata系和Victoria系两个谱系,谱系内毒株间距离很近。Yamagata系毒株与B/Brisbane/3/2007的核苷酸同源性极高,在99.4%~99.7%之间;Victoria系乙型流感病毒株与B/Malasia/2506/2004的核苷酸同源性亦很高,在98.6%~99.1%之间。与疫苗株和其它流行株相比,本次分离的两个谱系毒株均未发现核苷酸的丢失和插入,但均增加一个潜在的糖基化位点。结论珠海市人群交替流行着Yamagata系和Victoria系两个抗原性不同的进化系的乙型流感病毒,病毒的基因发生了变异。2007-2008两年WHO推荐的乙型流感疫苗株与我地区当年流行株为不同谱系毒株,预防保护效果不好。

浙江省乙型流感病毒HA_1基因分析

目的：了解浙江省近几年乙型流感病毒的基因变异情况和WHO推荐流感疫苗株对浙江省人体的保护情况。方法：采集浙江省类流感样本进行流感病毒的分离和鉴定，并对分离到的乙型流感病毒进行核酸的提取，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增病毒基因后进行病毒血凝素HA1基因核苷酸序列测定，用DNAMAN和BioEdit生物软件对测序结果进行分析处理，并与WHO推荐疫苗株基因进行比对。结果：分离到Yamagata系和Victoria系两个进化系的乙型流感病毒，两系毒株均未发现核苷酸的丢失和插入，糖基化位点没有太大改变。毒株之间核苷酸的同源性为95.25%，氨基酸的同源性为95.28%。Yamagata系毒株HA1区域核苷酸序列长度为1038 bp，推导的氨基酸序列长度为346个，氨基酸变异替换数在6-8之间；Victoria系毒株HA1区域的核苷酸序列长度为1041 bp，推导的氨基酸序列长度为347个，氨基酸变异替换数在2-8之间，相比Yamagata系毒株在163位上都多1个天冬酰胺（N）。基因进化树上可见明显的Yamagata系和Victoria系两个分支。结论：浙江省人群交替流行着Yamagata系和Victoria系两个抗原性不同的进化系的乙型流感病毒，病毒的基因发生了变异，抗原已发生漂移。2001、2006两年WHO推荐乙型流感疫苗株与我省当年流行株为不同谱系毒株，预防保护效果不够理想，其余年份为同一谱系毒株，预防保护效果较好。

甲型流感病毒H_3N_2诱导人子宫内膜腺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨甲型流感病毒H3N2对人子宫内膜腺癌细胞系(endometrialadenocarcinomacelllines,JEC)细胞的凋亡诱导作用及机制。方法取不同血凝单位的H3N2感染JEC细胞,经HE染色、琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞术等方法检测细胞凋亡情况,并用免疫细胞化学法检测H3N2对JEC细胞Fas、FasL及TGF-β表达的影响。结果感染后的JEC在形态上呈现凋亡变化;电泳出现梯状条带;流式细胞术显示细胞凋亡率随病毒感染时间的延长而降低,且有随着病毒浓度增加而增高的趋势。免疫细胞化学法示病毒感染后JEC细胞的Fas染色增强,TGF-β染色减弱,但FasL始终没有表达。结论甲型流感病毒H3N2能够诱导JEC细胞凋亡,此作用与病毒浓度及感染时间有一定关系,其机制可能与Fas和TGF-β的表达有关。

干扰素对甲型流感病毒感染的JEC细胞增殖的影响

目的探讨干扰素-α2a(IFN-α2a)对甲型流感病毒post-infected感染的JEC细胞增殖的影响。方法采用不同浓度的IFN-α2a作用于H3N2感染0、1、4h的JEC细胞,用MTT比色法在病毒感染后24h进行检测。结果IFN-α2a作用于病毒感染0h、1h后的JEC组OD值升高,而病毒感染4h后的JEC组的OD值却降低。结论IFN-α2a可促进流感病毒H3N2感染初期JEC的增殖,但却抑制感染后期JEC的生长。

菏泽市2016-2021年乙型B-Victoria系流感病毒全基因组测序分析

为了解2016-2021年菏泽市B-Victoria系流感病毒的遗传突变机制,掌握流感病毒的分子进化规律以及流感疫苗的研发提供依据。选取菏泽市2016-2021年B-Victoria系流感病毒毒株16株,利用二代Ilumina MiSeq测序得到全基因组顺序,利用生物信息学软件构建体系进化树,解析HA和NA基因组的突变规律。16株流感病毒可分成四个进化分支,2株毒株(2016年)隶属V1A进化分支,8株毒株(4株2019年,4株2020年)隶属V1A.3进化分支,4株毒株(2021年)隶属V1A.3a.1进化分枝,2株毒株(2021年)为V1A.3a.2进化分枝。以疫苗株B/Brisbane/60/2008为标准株,HA基因中共有16个位点出现突变,其中有10个位点设在抗原决定簇上。NA基因变目前已有21个位点出现了突变,在关键耐药位点上还未监测到变异。糖基化位点分析结果显示,2021年病毒株HA基因与其他病毒株相比少一个糖基化位点197NET,NA基因组糖基化位点并没有改变。结果提示2019年和2021年菏泽市BVictoria系流感病毒HA基因可能发生了抗原漂移,但所有毒株NA基因突变均未涉及到耐药位点突变,表明菏泽市B-Victoria流感的NA基因耐药性尚未发生改变。

新发肺系疫病中医诊疗概述

新型冠状病毒肺炎、传染性非典型肺炎、甲型H1N1流感都属于新发肺系疫病范畴,目前对于新发肺系疫病的病因病机认识主要有疫毒致病、疫毒兼夹六淫为病,以及六淫致病等,正气虚弱为发病的关键内因。新发肺系疫病辨证方法以分期辨证、卫气营血辨证和三焦辨证为主,并参以现代影像学与实验室微观指标,多种辨证方法联合、辨病辨证相结合已逐渐在临床中广泛应用。新发肺系疫病以扶正祛邪为基本治则,常用治法有宣肺透邪、清热解毒、清营凉血、益气扶正等,同时注重活血化瘀法以及风药的运用。

流感季来临,如何预防流感的发生

流感是怎么传播的流行性感冒简称流感,是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。流感病毒分为甲、乙、丙、丁四型,目前引起流感季节性流行的病毒是甲型病毒中的H1N1、H3N2亚型及乙型病毒中的Victoria和Yamagata系。

江苏省2019—2022年乙型流感病毒Victoria系HA基因特征分析

目的分析江苏省2019—2022年乙型流感病毒Victoria系流行特征,了解其基因变异情况,监测江苏省流感活动水平和流行趋势。方法通过"中国流感监测信息系统"收集的江苏省2019—2022年流感样病例监测数据,选取16株乙型流感病毒Victoria系毒株进行全基因组测序,利用MEGA 7软件构建进化树并进行HA基因序列特征分析。结果江苏省2019—2022年监测到的流感病毒中乙型流感病毒Victoria系占绝对优势。16株标本株中2019—2020年度的毒株在V1A.3早期分支,而2021—2022年度的毒株则聚类在3a.2亚型分支。与疫苗株相比,2019—2020及2020—2021年度的毒株发生了1个氨基酸位点的改变并增加了1个糖基化位点,而2021—2022年度的毒株则存在多个位点变异,其中H122Q、A127T、R133G、P144L、N150K、S194D及K200R位于抗原决定簇上。结论江苏省乙型流感病毒Victoria系在多处基因位点发生了变异,提示对该亚型变异的持续监测至关重要,可为疫苗的更新提供重要依据。

新疆兵团2021-2022年度B型Victoria系流感病毒基因组特征分析

目的检测和分析新疆兵团2021-2022监测年度B/Victoria系流感病毒基因组特征及进化情况,为流感的防控提供科学依据。方法随机选取8株B/Victoria系荧光PCR检测核酸阳性标本,使用MDCK进行病毒的分离培养并提取RNA,通过全基因组深度测序获得B/Victoria系流感病毒8个基因序列,与世界卫生组织推荐的疫苗株等进行同源性分析;构建进化树,分析病毒进化情况。结果新疆兵团2021-2022监测年度B/Victoria系流感流行株之间血凝素HA基因的核苷酸同源性99.4%~99.9%,氨基酸同源性99.8%~99.9%。神经氨酸酶NA基因与疫苗株的核苷酸同源性99.6%~99.9%,氨基酸同源性99.8%~99.9%。其余6个内源基因的核苷酸及氨基酸同源性分别在99.0%~99.9%和99.7%~99.9%之间;HA、PB2、PB1、NP、MP基因进化分析显示,8株B/Victoria系流行株与疫苗株B/Austria/1359417/2021亲缘关系较近;NA、NS、PA基因进化树分析显示,8株B/Victoria系流行株与疫苗株B/Washington/02/2019亲缘关系较近。结论新疆兵团2021-2022监测年度B/Victoria系流感流行株属于V1A.3分支,与2022-2023年WHO推荐疫苗株B/Austria/1359417/2021亲缘关系较近,但仍然存在关键抗原表位漂变情况,而NA的氨基酸突变并未影响毒株的耐药性。

Yamagata系乙型流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

目的制备Yamagata系乙型流感病毒血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)的特异性单克隆抗体,建立检测Yamagata系乙型流感病毒的双抗体夹心ELISA方法。方法用Yamagata系乙型流感病毒(B/Phuket/3073/2013)抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合,通过4次有限稀释获得阳性杂交瘤细胞并建株。将单克隆抗体1F7和2H6分别作为捕获抗体和检测抗体,建立一种检测Yamagata系乙型流感病毒的双抗体夹心ELISA法。结果该方法中捕获抗体1F7在96孔板的包被量为40 ng/孔,检测抗体2H6工作浓度为100 ng/孔;该方法仅能与Yamagata系乙型流感病毒发生反应,具有较强特异性。灵敏度分析显示,该方法对病毒尿囊液和病毒纯化HA蛋白最低检测值分别为2-1 HAU/100μL和1.22 ng/mL,具有较高灵敏度。重复性试验表明,该方法批内和批间重复性变异系数均小于5%。结论本研究建立的ELISA方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为Yamagata系乙型流感病毒快速诊断及定量检测提供技术支持。

一起学校聚集性感染乙型Victoria系流感病毒的全基因组测序分析

目的 对枣庄市1起学校乙型Victoria系(BV系)流感聚集性疫情的病原学和遗传特征进行分析,为BV系流感的防控提供参考依据。方法 收集13例患者的咽拭子标本进行核酸检测和病毒分离,对毒株进行全基因组测序,利用生物信息学软件构建进化树并分析分子进化特征。结果 引起本次学校聚集性感染的病原体为BV系流感病毒,核酸阳性率为76.92%(10/13),分离毒株5株。与疫苗株B/Washington/02/2019相比,核苷酸同源性为98.4%~99.6%。血凝素(HA)进化树中5株BV系毒株与疫苗株B/Washington/02/2019共同归属于1A分支。HA蛋白9个氨基酸位点发生置换,其中6个位点发生在抗原决定簇,未发现神经氨酸酶(NA)抑制剂耐药位点和酸性聚合酶(PA)抑制剂耐药位点发生变异。HA均发生N197D置换,M1均发生T15I置换,多个蛋白的磷酸化位点发生改变。结论 引起枣庄市学校聚集性疫情的病原体是BV系流感病毒,应加强学校疫情监测并督促防控措施落实。

2021年—2022年宁夏Victoria系乙型流感病毒基因特性分析

目的了解2021年—2022年宁夏Victoria系乙型流感病毒基因变异情况,为宁夏流感防控提供参考依据。方法采集流感样病例标本进行核酸检测和病毒分离,对30株Victoria系乙型流感毒株的HA和NA片段进行基因测序,利用生物信息学软件分析进化变异特征。结果30株宁夏Victoria系乙型流感毒株HA和NA基因在进化上与疫苗株B/Washington/02/2019(2020—2022)亲缘关系较近,属于V1A.3分支。HA基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.5%~99.0%和98.0%~98.6%;NA基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.0%~99.4%和98.9%~99.6%。与疫苗株B/Washington/02/2019相比,多数毒株在HA区有H122Q、A127T、R133G、G141R、P144L、N150K、G184E、N197D、K203R和R279K突变,涉及3个抗原表位,并在受体结合位点140-loop、190-helix及240-loop处存在突变位点。所有毒株均未发生耐药位点变异。结论2021年—2022年宁夏Victoria系乙型流感病毒与本年度疫苗株亲缘关系较近,但其HA蛋白的重要氨基酸位点发生多处变异,可能导致流感病毒发生抗原性漂移,减弱疫苗的保护作用。

2021-2022监测年度枣庄市乙型流感病毒Victoria系全基因组测序分析

为了解山东省枣庄市2021-2022监测年度乙型流感病毒Victoria系的流行情况,分析病毒全基因组遗传特征,了解病毒进化变异特点,分析与疫苗株的相似程度,为流感的防控提供参考依据。从枣庄市流感监测网络实验室分离的流感毒株中随机选取10株B/Victoria系毒株,以WHO推荐的B/Victoria流感疫苗株B/Washington/02/2019(2020-2022北半球疫苗代表株)为参考进行全基因序列测定,利用生物信息学软件构建进化树,并分析分子进化特征。2021年4月-2022年3月,枣庄市流感病毒监测阳性率为17.03%(202/1186),均为B/Victoria系流感。将枣庄市分离的10株B/Victoria系毒株序列与北半球疫苗代表株B/Washington/02/2019相比血凝素(Hemagglutinin,HA)基因核苷酸同源性为99.5%~100%,HA基因氨基酸同源性为99.7%~100%;HA进化树分析中,该10株B/Victoria系毒株与疫苗代表株B/Washington/02/2019同属于1A分支;但发现已有5处抗原表位突变,均发生在120-loop区122位、133位,150-loop区144位、150位,190-loop区197位;神经氨酸酶(NA)未发现关键氨基酸位点变异。NA抑制剂耐药位点均未发生变异,奥司他韦等药物治疗流感敏感。枣庄市2021-2022监测年度流行的流感病毒均为乙型Victoria系,与疫苗推荐株相比HA发生了抗原漂移,提示B/Victoria系疫苗株与本地区流行株的匹配度有所降低。枣庄地区流行的乙型流感病毒对药物奥司他韦和扎那米韦依然敏感。今后继续开展流感病毒分子进化特征监测是重要的,有利于了解乙型流感流行风险,以及对流感疫苗和治疗药物效果的影响。

新冠疫情下话流感

流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。全国流感监测结果显示,每年10月我国各地陆续进入流感流行季节。流感病毒分为甲、乙、丙、丁四型。目前感染人的主要是甲型流感病毒中的H1N1、H3N2亚型及乙型流感病毒中的Victoria和Yamagata系。

2021-2022年浙江省衢州市B/Victoria系流行性感冒病毒抗原性及基因特性分析

目的了解浙江省衢州市2021—2022年B/Victoria系流行性感冒(流感)病毒抗原性及基因进化特征,为流感防控提供科学依据。方法选取衢州市2021—2022年分离到的14株B/Victoria系流感毒株进行全基因组测序,利用生物信息学软件对其血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因进行分子进化特征分析。采用红细胞凝集抑制实验进行抗原性分析。结果10株分离株为同期疫苗株B/Washington/02/2019的类似株,后期分离的4株毒株为疫苗株B/Washington/02/2019的低反应株。同源性分析显示,分离株与下一年度(2022—2023年)疫苗株B/Austria/1359417/2021的匹配性总体高于同期疫苗株B/Washington/02/2019。基因进化分析发现,14株分离株从V1A.3a.1逐渐进化为V1A.3a.2分支,与同期疫苗株B/Washington/02/2019的遗传距离随时间逐渐加大,而与下一年度疫苗株B/Austria/1359417/2021关系渐近且最终聚集在V1A.3a.2分支上。相较于同期疫苗株B/Washington/02/2019,HA氨基酸序列共有14个变异位点,涉及3个抗原表位和1个糖基化位点(197NET);NA蛋白发生了多个氨基酸位点改变,但未发现相关耐药位点变异。结论2021—2022年衢州市B/Victoria系流感病毒处在持续进化之中,与同期疫苗株B/Washington/02/2019的匹配性降低,应继续加强对B/Victoria系流感病毒的监测研究,及时为流感疫苗株的筛选提供科学依据。

病毒传染病

9903947 新兴和再燃传染病的临床(1)病毒感染[日]/仓田毅∥日医师会志.-1997,117(11).-1869～1874 冀医情 9903948

打了疫苗,就一定不得流感了吗

每年,世界卫生组织(WHO)都会根据前一年的全球流感疫情,来分析预测当年将会有哪些流感毒株流行。然后各国会根据WHO的建议,制作相应的疫苗。大家会发现,今年的流感疫苗从三价升级为四价。这就是国家根据去年流感病毒流行的情况,在原有的三种型别病毒成分基础上,新添加了乙型Yamagata系的流感病毒成分。新的四价疫苗所覆盖的四种亚型是最常见的流感病毒,90%以上的流感都是由这四种病毒引起的。可以说,接种四价流感疫苗后可预防90%的流感。