鲨鱼软骨提取物对C_(57)BL/6J小鼠B_(16)黑色素瘤肺转移的影响

目的：评价鲨鱼软骨提取物（SCAE）对C57BL／6J小鼠B16黑色素瘤肺转移的影响。方法：小鼠经尾静脉接种B16黑色素瘤细胞悬液（5×104／每鼠）后d21，观察SCAE低、中、高剂量及环磷酰胺、生理盐水对照组小鼠肺部转移瘤生长情况。结果：SCAE及环磷酰胺对C57BL／6J小鼠经血道B16黑色素瘤肺转移均有明显的抑制作用，其肺校重及肺转移灶数均低于对照组，但后者主要免疫器官胸腺呈现明显萎缩，而SCAE各剂量组无此毒副作用。

三氧化二砷诱导恶性黑色素瘤A_(375)和B_(16)细胞凋亡的研究

目的 :研究不同浓度的三氧化二砷 (As2 O3 )对恶性黑色素瘤人A3 75细胞和小鼠B16细胞的凋亡诱导作用 ,为As2 O3 治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法 :用流式细胞术 (FCM )检测A3 75细胞和B16细胞的凋亡诱导及杀伤作用 :用不同剂量的As2 O3 (0 .1mmol·L-1、0 .2 5mmol·L-1和 0 .5mmol/L-1) ,对小鼠进行腹腔注射 (10ml·kg-1,连续注射 10d后 ,检测小鼠血清与心、肝、肾有关的生化指标。结果 :As2 O3 浓度分别为 5 μmol·L-1、10 μmol·L-1和 2 0 μmol·L-1时 ,A3 75和B16细胞的凋亡率分别为 11.85 %、5 5 .5 1%、5 4 .90 %和 9.81%、2 6 .4 5 %、9.93% :As2 O3 诱导A3 75和B16细胞总的凋亡和坏死率分别为11.90 %、5 5 .71%、5 7.4 0 %和 12 .96 %、2 6 .99%、87.13% ;不同剂量的As2 O3 (0 .1mmol·L-1～ 0 .5mmol·L-1)对小鼠肝、肾和心肌等功能无明显影响 ,与对照组各项指标无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :不同浓度的As2 O3 能明显诱导恶性黑色素瘤A3 75及B16细胞凋亡和坏死 ,对A3 75细胞的凋亡诱导作用强于B16细胞。As2 O3 (0 .1mmol·L-1～ 0 .5mmol·L-1)对小鼠肝。

三氧化二砷对黑色素瘤B_(16)细胞端粒酶活性影响

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3 )对黑色素瘤B1 6细胞端粒酶活性的作用 ,探讨砷及其化合物治疗黑色素瘤的作用机制 ,为其治疗黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法 :用TRAP ELISA和TRAP PAGE银染法检测黑色素瘤B1 6细胞 (简称B1 6)端粒酶活性。结果 :As2 O3 对黑色素瘤B1 6细胞端粒酶活性的抑制有明显的浓度和时间依赖关系。结论 :As2 O3 对黑色素瘤B1

20(R)-人参皂苷Rh_2抗B_(16)-BL6黑色素瘤转移的作用

目的:探讨20(R)人参皂苷Rh2抗B16-BL6黑色素瘤转移的作用及其机制。方法:采用B16黑色素自发转移模型观察Rh2对B16黑色素瘤转移的作用,观察Rh2对B16黑色素瘤细胞自身侵袭能力的影响。结果:在B16黑色素瘤自发肺转移的实验中,Rh2组C57BL/6N小鼠肺部转移结节数明显减少,Rh2作用后的B16黑色素瘤细胞侵袭人工基底膜能力明显下降。结论:Rh2可明显抑制B16黑色素瘤的肺转移,该作用可能与降低B16黑色素瘤细胞的侵袭能力有关。

苯乙酸钠对小鼠B_(16)黑色素瘤细胞的分化诱导作用

目的 评价苯乙酸钠对黑色素瘤 B1 6 的抑瘤作用。方法 以 MTT法测定细胞增殖的抑制率。B1 6 胞形态 ,黑色素含量 ,细胞周期变化及体内致瘤能力的测定作为观察指标。结果 用 7.5 m M～ 17.5 m M的苯乙酸钠作用于肿瘤细胞 ,见有不同程度的抑瘤作用 P<0 .0 1。 MTT法测得IC5 0 为 2 .6 7～ 3.6 3m M。在 7.5～ 17.5 m M浓度下 ,对 B1 6 细胞都有较强的分化诱导作用 ,表现为黑色素颗粒生成能力明显增多 ,生长缓慢。细胞动力学研究表明 ,苯乙酸钠可使 B1 6 细胞阻断在 G1 期因而 S期明显减少 ,体内致瘤表明成瘤能力明显降低。结论 苯乙酸钠对 B1 6 细胞有强力分化诱导作用 ,而对体内外黑色素瘤增殖有明显抑制。

同种异品系输血对小鼠B_（16）黑色素瘤肺转移的促进作用

首先相隔７天，经球后静脉两次给Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠注射生理盐水，同种同品系或同种异品系小鼠全血。于第２次输注后第７天，经球后静脉注射Ｂ（１６）黑色素瘤单细胞悬液，并在体外检测自然杀伤细胞活性和淋巴细胞转化率。结果表明，同种异品系间的输血，可明显降低受者的自然杀伤细胞活性和淋巴细胞转化，并促进肿瘤的肺转移。而同种同品系间的输血则无此不良影响。本文提示，Ｈ－２不相容性输血可促进肿瘤转移，免疫功能下降是输血促进肿瘤转移的重要因素之一。

三氧化二砷抑制恶性黑色素瘤B_(16)细胞核酸合成的研究

目的:研究不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成抑制及诱导B16细胞凋亡的作用,探讨砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤的作用机制,为其治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法:采用3HTdR和3HUdR掺入肿瘤细胞DNA和RNA的方法,观察不同浓度的As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞核酸生物合成的抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测As2O3诱导B16细胞的凋亡及细胞毒作用。结果:As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成抑制和诱导凋亡及细胞毒作用有显著的浓度和时间依赖关系(P<0.01)。结论:As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞核酸合成的抑制作用和诱导凋亡及细胞毒作用随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。

三羟异黄酮抑制黑色素瘤B_(16)细胞增殖作用的机制研究

目的：研究三羟异黄酮抑制黑色素瘤B16细胞增殖作用的分子机制。方法：以4’，5，7三羟异黄酮处理黑色素瘤B16细胞1-4天后，以生长曲线反映其增殖活力，以B16细胞形态、黑色素含量及以流式细胞仪检测细胞周期变化等观察三羟异黄酮对黑色素瘤B16细胞的抑制增殖作用。结果：用10、30、90μmol／L的三羟异黄酮作用肿瘤细胞均有不同程度的抑瘤作用（P〈0.05。P〈0.01）。表现为黑色素生成能力增加，细胞生长缓慢，可使B16细胞阻断在S期。结论：三羟异黄酮不同剂量对体外黑色素瘤B16细胞增殖有明显的抑制作用。

三羟异黄酮对黑色素瘤B_(16)细胞的诱导分化作用

背景与目的：评价三羟异黄酮对黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用。材料与方法：以4’，5，7三羟异黄酮处理黑色素瘤B16细胞1～4d后，以生长曲线反映其增殖活力，以B16细胞形态、黑色素含量、及流式细胞仪检测细胞周期变化等观察三羟异黄酮对黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用。结果：用10、30、90μmol／L的三羟异黄酮作用肿瘤细胞，有不同程度的抑瘤作用。表现为黑色素生成能力增加，细胞生长缓慢。可使B16细胞阻断在S期。结论：三羟异黄酮不同剂量（10、30、90μmol/L）对B16细胞均有明显的分化诱导作用，对体外黑色素瘤增殖有明显的抑制作用。

髓清丸对裸小鼠黑色素瘤B_(16)自发性肺转移影响的研究

目的研究中药活血化瘀复方瘀毒清对肿瘤生长和转移的影响。方法采用BALB/C无胸腺裸小鼠右侧腋窝皮下接种造成黑色素瘤B16自发转移模型,观察小鼠实体瘤瘤重抑瘤率、肿瘤平均直径倍增时间、肺部转移率、淋巴结转移等指标的变化。结果瘀毒清高、低剂量组的瘤重均较对照组小,尤以低剂量组明显,抑瘤率达到41.95％;瘀毒清高、低剂量组的肿瘤平均直径倍增时间均较对照组延长,瘀毒清高、低剂量组的肺部转移结节均较对照组少,转移率也较对照组低;同侧和对侧腋窝淋巴结重量瘀毒清高、低剂量组均较对照组小。结论瘀毒清对黑色素瘤B16有一定的抑瘤作用和一定的抗转移的作用。

三氧化二砷抑制恶性黑色素瘤B_(16)细胞生长及对端粒酶活性的影响

背景与目的:研究三氧化二砷(As2O3)对恶性黑色素瘤B16细胞生长抑制作用及对端粒酶活性表达的影响,探讨砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤的作用机制,为临床治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。材料与方法:四甲基噻唑氮蓝(Methylthiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测As2O3对B16细胞的生长抑制作用:端粒重序列扩增酶联免吸附实验(Telomericrepeatamplificationprotocolenzyme_linkedimmunosorbantassay,TRAR_ELISA)和聚内烯酰胺凝胶电泳银染(Telomericrepeatamplificationprotocol,polyacrylamidegelelectrophoresissilver_staining,TRAP_PAGE)法检测B16细胞的端粒酶活性。结果:As2O3可显著抑制B16细胞的生长并可下调端粒酶活性,其抑制作用有显著的时间和剂量依赖关系。结论:As2O3对恶性黑色素瘤B16细胞生长抑制作用及对端粒酶活性表达的抑制作用随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。

蛋白激酶C抑制剂CJ9111对小鼠B_(16)黑色素瘤细胞肺转移的影响

肿瘤转移是个多步骤的连续过程。瘤细胞从原发部位扩散，浸润细胞外基质，穿透血管壁，在血管内聚积，附着于血管内皮等一系列过程形成转移灶。所有这些过程都与肿瘤细胞的粘附特性有关。自从发现佛波酯有促进肿瘤转移的作用后，表明了蛋白激酶C(PKC)在调控肿瘤转移的过程中发挥重要作用．PKC的活性与肿瘤转移呈正相关，且某些PKC抑制剂能抑制肿瘤的转移。

鞘氨醇-1-磷酸受体激动剂芬戈莫德对黑色素瘤B16-F10增殖和迁移的影响及机制

目的观察芬戈莫德对黑色素瘤B16-F10细胞的增殖和自噬相关蛋白的影响。方法将含有不同浓度芬戈莫德(0、5、10、15μM)的DMEM培养基培养B16-F10细胞24 h,利用CCK-8细胞活力检测试剂盒检测各组细胞活力;划痕实验检测用药后B16-F10细胞的迁移能力;台盼蓝染色检测细胞的死活;利用免疫荧光实验和免疫印迹实验检测用药后细胞内自噬相关通路蛋白的表达情况。结果芬戈莫德可显著抑制B16-F10细胞的活力和增殖能力,并呈现剂量依赖性;芬戈莫德减弱B16-F10细胞的迁移能力并引起细胞死亡;免疫荧光和免疫印迹实验显示,与Control组相比,FTY-720组的细胞自噬通路相关蛋白LC3、Beclin1和P62的表达均出现改变(P<0.05)。结论芬戈莫德可抑制黑色素瘤B16-F10细胞的增殖并引起细胞损伤,其机制可能与芬戈莫德引起黑色素瘤B16-F10细胞的自噬有关。

三七总皂苷通过JAK2/STAT3通路调控巨噬细胞极化抑制小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的活力

目的:探究三七总皂苷(PNS)通过JAK2/STAT3通路调控巨噬细胞极化对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的活力的影响。方法:常规培养B16-F10细胞和巨噬细胞RAW264.7,MTT法检测不同浓度PNS对RAW264.7或B16-F10细胞存活率的影响。实验分为空白组(仅B16-F10细胞)、对照组(B16-F10细胞与RAW264.7细胞共培养)、不同浓度(50、100、200μg/mL)PNS组(B16-F10细胞与RAW 264.7细胞共培养)及200μg/mL PNS+colivelin[(B16-F10细胞与RAW264.7细胞共培养,0.5μmol/L colivelin JAK2/STAT3通路激活剂)]组,MTT法、流式细胞术检测各组共培养细胞的存活率和凋亡率,显微镜观察巨噬细胞形态变化;ELISA实验检测上清液中相关细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的水平,qPCR法检测巨噬细胞极化相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-12、CD206、精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA表达,WB法检测细胞中JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平。结果:不同浓度PNS对单独培养的RAW264.7、B16-F10细胞的存活率均无明显影响(均P>0.05)。与对照组相比,PNS呈浓度依赖性地促进共培养细胞凋亡、IL-6、TNF-α、IL-1β蛋白和IL-12、iNOS mRNA表达水平均显著增加(均P<0.05),降低共培养细胞的存活率、JAK2与STAT3蛋白磷酸化水平(均P<0.05),PNS对共培养细胞的作用部分被colivenlin抑制。结论:PNS通过抑制JAK2/STAT3通路促进M1巨噬细胞极化进而抑制小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的活力。

PGI_2/TxA_2、tPA/PAI动态平衡与黑色素瘤B_(16)侵袭率的关系

目的了解肿瘤侵袭率与ＰＧＩ２／ＴｘＡ２和ｔＰＡ／ＰＡＩ平衡的关系。方法参照Ｎｉｃｏｌｓｏｎ报道的方法建立体外黑色素瘤Ｂ１６侵袭血管内皮细胞单层模型，利用放射免疫酶联技术检测肿瘤侵袭过程中，ＰＧＩ２、ＴｘＡ２、ｔＰＡ、ＰＡＩ时相性分泌变化，以探究ＰＧＩ２／ＴｘＡ２、ｔＰＡ／ＰＡＩ比值变化，在肿瘤侵袭和转移过程中的作用。结果在肿瘤侵袭过程中，总ＰＧＩ２、ＰＡＩ分泌量呈下降趋势，ＴｘＡ２和ＰＡＩ分泌呈上升趋势；黑色素瘤Ｂ１６细胞能够通过分泌ｔＰＡ、ＰＡＩ、ＰＧＩ２和ＴｘＡ２来破坏血液循环系统中ＰＧＩ２／ＴｘＡ２和ｔＰＡ／ＰＡＩ平衡；ＰＧＩ２／ＴｘＡ２、ｔＰＡ／ＰＡＩ比值变化，肿瘤侵袭率呈对应性变动。结论ＰＧＩ２／ＴｘＡ２和ｔＰＡ／ＰＡＩ分泌的平衡失调可能是肿瘤侵袭和转移形成的重要原因之一。

三株B_(16)黑色素瘤细胞对NK细胞敏感性及细胞核DNA的测定

利用125I－UdR标记具有不同转移能力的B16黑色素瘤三个克隆株，并分别观察其对自然杀伤细胞（NK细胞）的敏感性;同时用流式细胞仪测定每株细胞的DNA含量。结果表明：高转移株细胞对NK细胞敏感性低，细胞DNA指数（DI）大，多为非整倍体细胞，增殖指数（PI）较小。此外，作者探讨了三株细胞对NK细胞的敏感性及细胞核DNA含量与体内生物学行为的可能关系。

黑色素瘤B_(16)细胞株的C_(57)BL/6鼠的动物模型建立及rhIL-2/LAK抗肿瘤作用的实验结果

以 C_(57)BL/6鼠荷其自发产生的黑色素瘤 B_(16)细胞,建立了较理想的荷瘤动物模型。以此动物模型采取低剂量给药观察 rhIL-2/LAK 抗黑色素瘤 B_(15)的效果,荷瘤鼠生存期显著延长(P<0.01);还对荷瘤鼠进行了持续给予 rhIL-2/LAK 的观察,生存期延长更为显著(P<0.01)。

蛇葡萄素体内外对小鼠B16黑色素瘤侵袭和转移的抑制作用

目的 :研究蛇葡萄素对B16小鼠黑色素瘤体内外抗侵袭和转移的作用。方法 :B16细胞由尾静脉注入C5 7BL/ 6小鼠体内建立实验性肺转移模型 ,蛇葡萄素以 3个剂量从接种瘤细胞前一天腹腔给药 ,连续 18d ,于停药后第 2天观察肺转移瘤灶数。B16细胞经蛇葡萄素处理 3d ,用具有聚碳酸酯和重建基底膜 (Matrigel)的Tran swell小室侵袭模型 ,研究药物处理后细胞侵袭、趋化运动、粘附能力的改变。结果 :剂量为 15 0 ,2 0 0 ,2 5 0mg·kg-1的蛇葡萄素可抑制小鼠肺转移瘤灶形成 ,与溶剂对照组比 ,抑制率分别为 30 .97% ,4 0 .5 8% ,6 1.16 % (P <0 .0 5 )。经 2 0 ,4 0 ,80 μmol·L-1各浓度蛇葡萄素处理后 ,对B16细胞侵袭人工基底膜的抑制率分别为 36 .0 6 % ,5 9.5 8% ,79.0 9% (P <0 .0 1) ;对细胞的趋化运动抑制率分别为 5 1.5 9% ,5 6 .5 1% ,6 6 .75 % (P <0 .0 1) ;显著降低B16细胞与基质成分层粘连蛋白、纤维粘连蛋白及Matrigel的粘附作用。 结论 :蛇葡萄素具有抑制黑色素瘤的侵袭和转移的作用。

甘草黄酮对B16黑色素瘤细胞代谢的影响

目的 研究甘草黄酮对B16黑色素瘤细胞的作用,并与一些美白药物进行比较,探讨其美白的作用及安全性。方法 测定药物对体外培养的B16黑色素瘤细胞系的细胞活力、细胞酪氨酸酶活性及细胞内黑素含量的影响,并与氢醌、熊果苷及维生素C磷酸酯的结果比较。结果 几种化合物对B16细胞酪氨酸酶活性均有抑制作用,且呈浓度依赖性;药物作用后细胞黑素生成量显著减少。甘草黄酮和维生素C磷酸酯的细胞毒性较低,而氢醌和熊果苷具有明显的细胞毒性。结论 甘草黄酮有较强的抑制酪氨酸酶活性和黑素生成的作用,同时对黑素细胞的细胞毒性较低,是较为安全有效的美白药物。

茶叶提取物对B16小鼠黑色素瘤细胞的生物学效应及机理研究

研究了茶叶提取物对体外培养的B16小鼠黑色素瘤细胞的生物学效应,并对其机理进行初步探讨。分别用茶黄素单体(TF1)、EGCG、纯度为40%的茶黄素(TF40)处理细胞,然后观察细胞形态,并以溴化二苯四偶氮法(MTT法)测定受试物对黑色素细胞活力的影响,以左旋多巴为底物测定细胞内酪氨酸酶活性,采用比色法测定细胞中的黑色素含量。实验结果表明,各化合物对B16黑色素瘤细胞形态有不同程度的影响,对细胞活性、酪氨酸酶浓度和黑色素合成量有浓度依赖性抑制作用。这3种茶提取物能通过多种途径抑制黑色素合成,从而达到美白的效果,且茶叶提取物的效果优于Vc。