29insG新突变导致B_(el)亚型的血清学和分子生物学分析1例

目的探讨1例B_(el)亚型的血清学特征和分子机制。方法通过血型血清学方法分析患者ABO血型,吸收放散试验检测患者红细胞上的弱抗原,使用分子生物学方法对ABO血型基因序列分析。结果患者正定型为O型,反定型为B型,正反不相符,吸收放散法确认有弱B抗原。该突变点经查ISBT及相关文献均未发现同种情况,该突变为首次发现。结合3-7外显子序列情况患者血型是B_(el)(29insertG)/O.01.01。结论在临床日常工作中遇到ABO血型正反不相符的情况,结合血清学和分子生物学检测技术可以提高ABO血型鉴定的准确性和可靠性。

罕见B_(el)01亚型的血清学和基因分析

目的:探讨B_(el)01亚型的血清学特征和分子机制。方法:采用血型血清学方法分析该献血者ABO表型,磷酸盐耦联法检测糖基转移酶活性,PCR-SSP法进行ABO亚型基因分型,对第1~7外显子进行测序。结果:血清学试验检测疑为Bel,血清和红细胞上均无D-半乳糖基转移酶活性,ABO血型基因分型结果为BO2,基因测序结果确认为Bel01/O02,外显子1~7测序结果为该样本在B101/O02的基础上发生了16C>T以及18insTTGCA突变,该突变为首次发现。结论:ABO亚型鉴定需采用血清学方法联合基因分型和基因测序。

一例罕见A^(el)08的血清学鉴定及基因测序

目的通过对本实验室1例正反定型不符的骨科患者标本进行血型鉴定,探讨ABO亚型鉴定的重要意义。方法应用常规试验以及吸收放散试验等血清学方法和ABO基因直接测序进行鉴定。结果患者红细胞上含有弱A抗原,血清中检出了不规则抗-A_1,ABO血型为A^(el)亚型,其基因型为Ael08/O02。结论 A亚型最主要的血清学特征是红细胞抗原数量的减少,红细胞与试剂血清表现为弱凝集或者不凝集,易误定为O型,给患者输血带来风险。在日常工作中重视ABO亚型的存在,能够减少临床输血反应,保证临床输血安全。

药物难治性癫痫相关局灶性脑皮质发育不良临床分析(附21例报告)

目的探讨顽固性癫痫相关局灶性脑皮质发育不良(focal cortical dysplasia,FCD)的临床特点及手术效果。方法回顾分析经手术证实的21例顽固性癫痫相关FCD,总结其临床特点、术前筛查过程、手术、病理以及治疗结果等。FCD的定义和分型参照Palmini和Luders等癫痫病学家和神经病理学家在2004年确立的标准。手术后发作评价参考2001年国际抗癫痫联盟推荐的标准。结果 MRI发现异常12例,CT有1例轻微钙化。发生部位颞叶10例,额叶4例,顶枕叶7例。其中双重病理7例,均位于颞叶,6例联合颞叶内侧海马的硬化,1例患者同时合并海马硬化和额叶胶质疤痕。ⅠA有2例,ⅠB有11例,ⅡA有5例,ⅡB有3例。所有病例随访12-27个月。术后1级10例;2级7例;3级+4级3例;5级1例;无6级病例。并发症包括1例硬膜外血肿再次手术,2例颅内感染,2例皮下积液,无永久严重并发症。结论 以FCD为病理基础的顽固性癫痫,影像学检查多可发现异常,病理以ⅠB型最多见,可见于所有脑叶,手术切除效果好且安全。

新等位基因c.175_(1)76insGA致B_(el)亚型的家系分析

目的对1例Bel亚型新等位基因c.175_(1)76insGA的家系进行血清学和基因型分析,并初步探讨糖基转移酶B弱表达的分子机制。方法描述性研究,选取1例23岁的男性无偿献血者及其家系成员为研究对象。采用试管法鉴定先证者及其家系成员的ABO和Le血型,应用凝集抑制试验检测唾液中B和H抗原,并对研究对象进行Sanger测序和PacBio(Pacific Bioscience)三代技术单倍型测序,鉴定基因型。最后应用Expasy软件对DNA序列进行氨基酸翻译并预测基因改变后的蛋白长度,应用ORF finder预测替代起始密码子以及mRNA开放阅读框,并进行蛋白表达机制分析。结果先证者及其姐姐血清学为Bel亚型,其母亲为ABel亚型,其父亲为正常O型,家系成员均为Le(a+b+)表型。Sanger测序结果表明,在先证者及其母亲和姐姐第4外显子均发现c.175_(1)76insGA新等位基因。三代单倍型测序检测家系成员的单倍型发现,先证者ABO*O.01.02/ABO*BEL.NEW(c.175_(1)76insGA),父亲ABO*O.01.02/ABO*O.01.02,母亲ABO*A1.02/ABO*BEL.NEW(c.175_(1)76insGA),姐姐ABO*O.01.02/ABO*BEL.NEW(c.175_(1)76insGA)。蛋白表达机制分析表明,虽然据推测ABO*BEL.NEW新等位基因发生了移码突变,在第5外显子提前出现了终止密码子p.Asp59Glu*fs20,编码无活性的糖基转移酶。但可利用替代起始密码子启动功能性Bel亚型糖基转移酶的翻译。结论Bel亚型新等位基因的表达与替代起始密码子启动Bel亚型糖基转移酶的翻译有关。