泥东风螺(Babylonia lutosa)幼螺对不同饵料、盐度和酸碱度的适应性研究

本文以泥东风螺（Babylonia lutosa）幼螺为实验材料,设置几种不同饵料、盐度和酸碱度,对泥东风螺幼螺生长适应性进行探讨和研究,采用单因素方差分析方法进行数据分析。实验结果表明,最适宜泥东风螺幼螺生长的饵料为太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）,适宜幼螺生长的盐度范围在26-31之间,幼螺培育环境的酸碱度不应低于pH6.5或高于pH8.5。研究发现,在适宜生长的条件下进行培育,泥东风螺摄饵率相对较高,生长速度具有显著性差异（P〈0.01）。本文的研究结果可以应用于泥东风螺规模化生态健康养殖,为泥东风螺养殖产业发展和创新提供理论依据。

不同底播密度对泥东风螺(Babylonia lutosa)幼螺生长和存活的影响

以泥东风螺幼螺为试验材料,研究了其在海区底播的生长、存活以及不同底播密度对其生长、存活的影响。采用单因素方差分析进行数据的显著性分析。2013—2014年第一次试验结果显示,泥东风螺幼螺底播475 d,壳高、体重分别达到（28.4 177±3.7 837）mm、（4.9 438±2.0 669）g,成活率为71.43%;除了68 d数据显示底播密度对其存活率有显著影响（P〈0.05）外,其它均显示对其壳高、体重、存活率没有显著影响（P〉0.05）。2013—2014年第二次试验结果表明,泥东风螺幼螺底播385 d,壳高、体重分别达到（20.9904±2.8 276）mm、（2.5 936±0.9 482）g,成活率为38.65%;放养密度对其壳高、体重、存活率均没有显著影响（P〉0.05）。综上所述,5-20粒/m2为泥东风螺幼螺适宜的海区底播密度。

低盐度对泥东风螺(Babylonia lutosa)稚螺生长与存活的影响

采用盐度渐变和突变2种方法试验低盐度对平均体重3.7 mg、平均壳高(2.24±0.24)mm的泥东风螺稚螺生长与存活的影响。结果表明:盐度28时,稚螺的生长速度最快,盐度降到24时,对稚螺的影响并不明显,摄食基本正常,但活力略有降低;变态7 d的泥东风螺稚螺能够适应高于21的低盐环境,存活基本正常,有比较高的成活率,但对其摄食和生长有一定的影响;当盐度突变至18时,泥东风螺稚螺仍能存活,突变至15时,则不能存活;而盐度渐变至15时,稚螺仍可存活;盐度逐渐降低只可扩大泥东风螺稚螺的存活盐度范围,但其对最适生长盐度范围影响有限。

泥东风螺(Babylonia lutosa)规模化人工育苗技术和早期发育观察

2012年06月—2014年09月期间,收集野生泥东风螺（Babylonia lutosa）5 775粒,经培育成活5 246粒,存活率90.8%。亲螺的繁殖期为6—9月,水温在26℃-30℃时为产卵高峰;卵囊呈梯形、马鞍状、透明,单个卵囊卵粒数量309-472粒,平均381粒。在日常饵料中补充金藻、角毛藻等高不饱和脂肪酸（High unsaturated fatty acid,HUFA）含量较高的单胞藻,可提高存活率。3年来浮游幼体的变态率逐年提高,并培育出壳高3.08-15.91 mm的泥东风螺苗1 733.85×104粒,同时对泥东风螺从受精卵到变态为稚螺的整个发育过程进行显微观察,共分16期。

台湾东风螺人工繁殖及苗种生物学的初步研究

摘要：对台湾东风螺（Babylonia lutosa）进行人工繁育试验。试验结果表明，台湾东风螺亲螺在繁殖初期日摄食量为1．5％以上，最高可达3．0％，但繁殖盛期摄食量减少。在人工饲养条件下，利用水泥方砖采卵效果良好。在水温22，5—25．6℃和充气条件下，台湾东风螺受精卵在卵囊内完成胚胎发育破囊孵出的时间为7d，孵化率为95％以上。在水温为24．0～27．5℃、培育密度为0．10个／mL左右时，幼虫壳长生长速度可达18．1μm／d，其生长曲线显示中后期生长加速，成活率为60％以上；幼虫发育至附着变态的平均时间为22d，在铺砂与不铺砂条件下均可附着变态。在水温为25．1—26，5℃、培育密度为2000—2100个/m^2时采用无铺砂培育台湾东风螺稚贝，其壳高由1．3mm长至5．5mm，生长速度为0，22mm／d，成活率为29．5％。

两种东风螺的染色体核型

方斑东风螺(Babylonia areolata)和泥东风螺(Babylonia lutosa)隶属于东风螺属,是中国重要的水产经济品种.以这两种东风螺的担轮幼体为实验材料,经秋水仙素处理,空气干燥法制片,Giemsa染色,观察分析获得的两种东风螺染色体核型.结果表明,方斑东风螺核型为2n=66=32m+20sm+8st+6t,染色体总臂数NF=118.泥东风螺核型为2n=66=30m+22sm+8st+6t,总臂数NF=118.两种东风螺的全套染色体中均未发现次缢痕、随体及性染色体.另外,本研究还分析了这两种螺与蛾螺科其他种类之间的染色体数目差异,为探讨它们之间的亲源关系提供科学依据.

泥东风螺4个群体遗传多样性的AFLP分析

利用AFLP分子标记方法对4个群体（福建连江野生、连江养殖、长乐养殖、广西野生）的泥东风螺进行遗传多样性分析。结果：用11对引物共扩增出908条有效片段，其中684条（75．33％）为多态性片段，224条片段（24．67％）为4个群体所共有；遗传多样性指数分析显示，4个群体的有效等位基因数、平均等位基因数、Shannon’s多样性指数和平均杂合度依次为1．5006、1．9740、0．4647、0．3034，Nei’s遗传距离为0．1284～0．1806，遗传相似系数为0．8348～0．8795，表明4个泥东风螺群体具有较为丰富的遗传多样性，且群体间具有较高的遗传相似性；分子方差分析（AMOVA）结果显示，4个群体中83．49％的变异来源于群体内，14．65％的变异来源于地区间，而群体间的遗传变异仅为1．86％，且4个群体间的遗传分化（GST）为0．1954，基因流（NM）为2．0586，说明群体间的基因交流水平较低；UPGMA聚类分析和主坐标（PCA）分析结果表明，长乐养殖群体和广西野生群体遗传距离最近，而连江野生群体与其他3个群体的遗传距离最远。

泥东风螺EST-SSR开发及其群体遗传多样性分析

本研究采用MISA软件分析泥东风螺(Babylonia lutosa)转录组中微卫星信息。结果显示,从转录组中共获得16324个SSR,共有181种重复基元;泥东风螺转录组中不同类型微卫星的重复基元具有不同的分布特征,其中,二核苷酸重复基元中AC/GT(70.58%)重复基元以重复6次出现频率占优;长度为12~20 bp的SSR占63.95%,长度为21~25 bp的SSR占9.14%,总体的平均长度为18.4 bp。随机选取其中50条序列设计引物,通过对福建野生泥东风螺群体(WP)DNA样本进行PCR扩增和分型,结果获得23个多态性位点,等位基因数目为2~7个不等,期望杂合度(Ne)为0.190~0.937,观察杂合度(No)为0.065~0.936,多态性信息含量(PIC)为0.061~0.777,有4个位点显著偏离哈迪温伯格平衡(Hardy-Weinberg equilibrium,HWE)(P<0.05)。对野生群体和养殖群体(BP)遗传多样性分析显示,野生群体和养殖群体的平均Ne分别为0.491和0.544,平均No分别为0.477和0.564,平均PIC分别为0.541和0.407。Fis结果显示,野生群体和养殖群体分别有13个和9个位点杂合子过剩。群体间遗传分化指数(Fst)为0.001~0.655,平均值为0.053(0.05<Fst<0.15),属于中等程度分化。群体间的基因流值(Nm)为0.132~543.787,平均为4.450。两群体间的遗传距离为0.892,表明群体间的遗传分化小。本研究结果表明,泥东风螺野生群体和养殖群体均具有较高的遗传多样性,具有很大的选育潜力,开发的泥东风螺SSR标记对泥东风螺的群体遗传结构、图谱构建、增殖放流效果评估和分子辅助育种等研究方面具有重要意义。

泥东风螺线粒体基因组及其遗传多样性分析

为研究泥东风螺线粒体基因组遗传进化和遗传多样性,采用PCR扩增和直接测序技术,对泥东风螺线粒体基因组全序列及3个野生群体线粒体基因测序,并用生物软件进行分析。研究结果表明,泥东风螺线粒体基因组上的tRNA-Met、tRNA-Tyr、tRNA-Cys、tRNA-Trp、tRNA-GLn、tRNA-Gly、tRNA-Glu和tRNA-Thr位于环形线粒体L链上;18种腹足纲动物线粒体全长基因相似性为70.1%～92.9%,种间的12SRNA和16SRNA相似性与线粒体基因组全长相似性相当;12SRNA的391～491bp区域和16SRNA的1～106bp和361～481bp区域为高度变异区,而16SRNA的1191～1317bp区域为高度保守区;以F5引物扩增测序3个野生群体,共检测到由40个多态位点组成的26个单倍型,野生群体单倍型多样性为(0.406±0.112)～(0.532±0.113),野生群体核苷酸多样性为(0.00094±0.00124)～(0.00111±0.00123);北海野生群体与连江和长乐野生群体之间的遗距离分别为0.00094和0.00099。其结果可以为泥东风螺遗传进化、人工增殖和种质资源保护评估提供参考。

几种天然饵料对泥东风螺稚螺生长、存活的影响

本文报道了用单因素实验方法进行泥东风螺(Babylonia lutosa)稚螺适宜饵料的研究。以太平洋牡蛎、远海梭子蟹、竹筴鱼、南美白对虾和卤虫幼体为饵料,以及上述饵料每日一种轮流投喂的方式,组成6个实验组;实验水温28～28.5℃,经30 d的投喂实验,结果表明:体长、体重、日均增长量和日均增长率以及存活率等综合指标,单种饵料投喂以太平洋牡蛎组效果最好,远海梭子蟹组次之;竹筴鱼组的存活率高于南美白对虾组,其他指标接近;卤虫最低,而混合投喂组,综合指标在全部实验组中位列第二。方差分析表明,投喂不同天然饵料泥东风螺稚螺的生长速度差异极显著(P<0.01)

两种培育方法对泥东风螺稚螺生长与存活的影响

本文报道了有底沙与无底沙培育方法对泥东风螺(Babylonia Lutosa)稚螺生长与存活影响的实验结果。以牡蛎为饵料,实验设计3×1042、5×104和7×104ind/m2三个密度梯度,采用有底沙与无底沙两种方法培育刚变态的泥东风螺稚螺。经35 d培育,有底沙组稚螺壳高、体重的生长速度和存活率都高于无底沙组,壳高生长速度差异显著(P<0.05)。而两种培育方法不同的密度培育结果,密度7×104ind/m2与3×104ind/m2和5×104ind/m2实验组稚螺壳高生长速度差异显著(P<0.05),而3×104ind/m2与5×104ind/m2实验组壳高生长速度差异不显著(P>0.05)。随着稚螺的生长其潜沙行为越明显,说明有沙培育更符合其具有的潜埋栖息习性,有利其生长和存活。

泥东风螺增殖放流跟踪调查及效果分析

2012—2014年,采用笼壶作业渔船定点调查和生产性调查相结合方法对福建省连江县黄岐湾海域泥东风螺增殖放流效果进行了初步评估。结果表明:2014年6月定点调查捕获的泥东风螺重量较2012年(放流前)增加25.1倍;2014年生产性调查捕获的泥东风螺重量(107.84 kg)较2012年增加2.8倍;单日螺重量(2.51 kg/d)增加2.7倍;单笼螺重量(120.50 g/笼)增加2.4倍。2013年和2014年捕获的泥东风螺平均体重分别比2012年(放流前)下降了73.98%和67.45%,这说明了放流海区新的泥东风螺补充群体已形成并初显成效,已有部分小螺加入了捕捞群体。通过两年增殖放流,泥东风螺资源恢复已取得较为明显效果。

泥东风螺半循环式工厂化养殖技术

试验采用泥东风螺Babylonia lutosa(Lamarck)常规养殖和半循环水养殖两种养殖方法,通过生长速度和养殖池中细菌含量测定比对,确定了半循环水养殖方法生长速度和常规养殖无明显差别,但细菌含量明显降低,发病率下降。

4种重金属盐对泥东风螺幼螺的急性毒性试验

在水温16～23℃、盐度30、pH8.0的环境条件下,采用静水试验法测定硫酸铜(CuSO4.5H2O)、硫酸锌(ZnSO4.7H2O)、氯化镉(CdCl2)和硝酸铅[Pb(NO3)2]4种重金属盐对泥东风螺Babylonia lutosa幼螺的急性毒性。结果显示,对泥东风螺幼螺24、48、72和96h的半数致死质量浓度(LC50),CuSO4.5H2O分别为2.596、1.037、0.690和0.400 mg.L-1;ZnSO4.7H2O分别为16.384、4.738、3.225和2.721mg.L-1;CdCl2分别为17.286、7.340、3.799和2.361 mg.L-1;Pb(NO3)2分别为650.640、410.595、262.342和141.525mg.L-1。CuSO4.5H2O、ZnSO4.7H2O、CdCl2和Pb(NO3)24种重金属盐对泥东风螺幼螺的安全浓度(SC)分别为0.040、0.272、0.236和14.153mg.L-1;Cu2+、Zn2+、Cd2+和Pb2+、4种重金属离子对泥东风螺幼螺的安全浓度分别为0.010、0.062、0.148和8.501mg.L-1,其毒性大小为Cu2+>Zn2+>Cd2+>Pb2+。

不同饵料添加剂对泥东风螺幼螺生长及消化酶活性的影响

采用饲养试验方法,探讨在饵料中添加中药制剂、微生态制剂及多维制剂对泥东风螺生长及胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等消化酶活性的影响。以平均体重(3.99±0.94)g、平均壳高(25.58±4.56)mm的泥东风螺幼螺为研究对象,分为S0空白对照组、S1中药制剂组、S2微生态制剂组、S3多维制剂组以及S4混合投喂组(每日选择中药制剂、微生态制剂及多维制剂其中一种轮换投喂)。结果显示,S4在试验40 d结束时,平均体重为(11.79±0.32)g,是S0的1.32倍,差异显著。三种消化酶活性均随投喂时间的增加而呈先升高后降低趋势,胃蛋白酶、脂肪酶及淀粉酶之间存在协同作用。对泥东风螺生长、消化酶的影响以S4组最显著,S1、S2组幼螺各指标波动幅度较大,S3组较为稳定。四个处理组均显著影响消化酶活性,但效果逐渐减弱,所以低频率地添加并配合使用多维制剂、中药制剂及微生态制剂能够有效地促进泥东风螺幼螺的生长和消化功能。