新的候选抑癌基因Bach2在胰腺导管腺癌中的表达

目的探讨Bach2在胰腺癌中的表达及意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺癌(37例)、癌旁正常组织(29例)、人胰腺癌细胞株(3株)和正常导管上皮细胞株中Bach2的表达,采用蛋白质免疫印迹法和免疫组织化学(IHC)方法分别检测胰腺癌冰冻组织(18例)和石蜡包埋组织(15例)中Bach2的表达。结果 Bach2在胰腺癌表达明显下降(6.264±2.148)(P<0.05),在人胰腺癌细胞株BXPC-3、PANC-1和SWl990中表达明显下降(2.705±0.473)、(2.481±0.381)和(4.629±0.592)(P<0.01);胰腺癌组织和细胞株中Bach2蛋白质表达相对下降;胰腺癌神经侵犯者癌组织中Bach2表达更低(4.891±2.664)(P<0.05)。结论 Bach2在胰腺癌组织和细胞株中表达下降,可能与胰腺癌发生和神经侵犯相关。

转录因子Bach2的构建及表达

目的构建高效表达人Bach2基因的慢病毒重组质粒,并探索其在免疫疾病中的机制。方法取健康人外周血分离单个核细胞并提取总RNA逆转录为c DNA,扩增Bach2基因CDS序列,插入p LVX-IRES-Zs Green1慢病毒质粒。磷酸钙共转染法包装慢病毒,感染人HEK293T细胞。空白质粒感染HEK293T细胞作为对照。免疫印迹分析空白质粒和过表达质粒HEK293T细胞中Bach2基因表达。结果 PCR结果显示,Bach2成功插进p LVX-IRES-Zs Green1质粒中,real-time PCR以及Western blot证实,Bach2基因成功在HEK293T细胞中高效表达。结论成功构建高效表达Bach2基因的慢病毒穿梭质粒,并成功在HEK293T细胞表达。