Bacillus DE-8降解油脂下脚料中残油特性研究

以Bacillus DE-8为试验菌株,选用不同的油脂下脚料为发酵基质,对其降解条件进行正交优化研究.结果表明:BacillusDE-8发酵的最佳培养条件是起始pH值为8,接种量4%、摇床转速为160r/min、温度为32℃、添加1%氯化钙及1%表面活性剂十二苯磺酸钠,发酵72h,在该条件下,验证试验残油降解率达81.6%.

常见重金属和农药对Bacillus pumilus WP8促生能力的影响

采用平板发芽生长方法,研究Cu、Pb、Zn、农用硫酸链霉素和乙草胺在各自建议浓度(Recommendedconcentration,RC)和2×RC下,Bacillus pumilus WP8对辣椒发芽生长的影响。结果表明,Cu和乙草胺在试验浓度下,辣椒均不发芽,WP8的存在未能缓解胁迫作用;Pb、Zn和农用硫酸链霉素在RC下,对WP8的促生能力,特别是根的伸长影响很小;2×RC下,Pb处理对WP8促生能力的影响依然较小,但Zn和农用硫酸链霉素处理对WP8促生能力的影响较大,但根的指标仍能达CK水平;WP8的生长状况和促生表现之间没有明显的相关性。

抗IL-18单克隆抗体对小鼠免疫性肝损伤的作用研究

目的 探求抗IL- 18单克隆抗体对小鼠免疫性肝损伤的作用。方法 建造昆明小鼠免疫性肝损伤模型 ,腹腔注射抗IL -18单克隆抗体 ,ELISA法测定血清中IL - 18、IL - 1、TNF- α含量 ,肝组织HE、VanGieson染色观察病理组织形态。结果 抗IL -18单克隆抗体组明显抑制了IL - 18、IL -1、TNF- α的升高 (P <0 . 0 5 ) ;抗IL - 18单克隆抗体组肝脏病理损害均不同程度减轻。结论 抗IL 18单克隆抗体能明显减轻免疫性肝损伤小鼠肝脏病理损害 ,对免疫性肝损伤起到了保护作用。

加味交泰丸联合地衣芽孢杆菌活菌治疗腹泻型肠易激综合征临床疗效及对血清IL-6、IL-8、TNF-α水平影响

目的探讨加味交泰丸联合地衣芽孢杆菌活菌治疗腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证的疗效及对血清IL-6、IL-8、TNF-α水平影响。方法选取医院门诊收治的腹泻型肠易激综合征患者60例,随机分为两组各30例。对照组患者给予地衣芽孢杆菌活菌,实验组在对照组基础上给予加味交泰丸,两组患者均持续治疗28 d。对比两组患者的临床疗效、腹痛消失时间、大便性状、大便次数恢复正常时间及中医证候积分、IBS-SSS评分、IBS-QOL评分、血清IL-6、IL-8、TNF-α水平及不良反应情况。结果治疗后,实验组总有效率较高(P<0.05);实验组腹痛消失时间、大便性状、大便次数恢复正常时间明显低于对照组(P<0.05);两组患者治疗后腹痛、大便性状、大便次数等证候评分显著降低(P<0.05);实验组降低较明显(P<0.05);两组治疗前血清IL-6、IL-8、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著降低(P<0.05);实验组降低较明显(P<0.05);两组治疗前IBS-SSS评分差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后IBS-SSS评分显著降低(P<0.05);并且实验组降低较明显(P<0.05);两组患者治疗前IBS-QOL评分无差异(P>0.05);两组患者治疗后IBS-QOL量表各条目评分显著降低(P<0.05);并且实验组降低较多(P<0.05)。结论采用加味交泰丸联合地衣芽孢杆菌活菌治疗腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证具有较好的治疗效果,能够降低血清IL-6、IL-8、TNF-α水平,安全性较高,值得在临床上推广应用。

吡喃阿霉素联合卡介苗灌注预防膀胱肿瘤复发的效果观察及尿中IL-8变化的研究

目的：比较吡喃阿霉素（tetrahydropyranyl-doxorubicin，THP）加卡介苗（bacillus calmette-guerin，BCG）与单用BCG膀胱灌注预防膀胱肿瘤复发的效果及灌注引起的副作用，测定灌注前后白细胞介素8（interleukin-8，IL-8）的变化，并探讨IL-8变化与药物灌注预防肿瘤复发效果之间的关系。方法：将62例原发膀胱肿瘤患者随机分为2组，于膀胱部分切除术后分剐给予THP联合BCG（联合用药组）及单用BCG膀胱灌注（单用BCG组），于术前、术后2周、1～6次BCG灌注后2h留取尿液标本，采用酶联免疫（EusA）法测定IL广8的含量。术后定期行B超、膀胱镜及尿细胞学检查，监测膀胱肿瘤复发情况。并对联合用药与单一用药预防肿瘤复发的效果，灌注引起的副作用及IL-8的变化情况进行观察及统计学分析。结果：联合用药组复发率明显低于单用BcG组，两组灌注后副作用发生率及严重程度差异无统计学意义（P〉0．05）。两组灌注后尿中IL-8的含量均有明显的变化，但两组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。无复发患者灌注后尿中IL-8含量明显高于复发者。结论：THP联合BCG膀胱灌注可有效降低膀胱肿瘤复发率，且不增加灌注引起的副作用。这一效果是作用机制不同的药物的叠加作用，而不是化疗药物对免疫药物疗效的放大作用。BCG灌注后尿中n8有明显的升高，且变化程度与肿瘤复发相关。

大豆根腐病拮抗菌枯草芽孢杆菌8-32抗菌物质性质的初步研究

对致病菌—尖孢镰刀菌（Fusrium oxysporum）具有较强拮抗作用的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）8-32产生的理化性质进行了初步研究。结果表明,该抗菌物质80℃处理30 min,拮抗活性仍保持在90.00%,100℃以上会完全丧失活性;在p H 7.0~11.0范围内抑菌活性较稳定,最适p H为8.0;高浓度（25mmol/L）EDTA使其拮抗活性降低62%;该抗菌物质对Cu2＋、Fe3＋敏感,对蛋白酶K不敏感。枯草芽孢杆菌8-32产生的抗菌物质具有一定的耐热、耐碱（p H 11.0）、对蛋白酶不敏感等特性。

IL-8预测浅表性膀胱癌术后卡介苗灌注疗效

目的观察尿液白细胞介素-8(IL-8)测定评估浅表性膀胱癌术后卡介苗(BCG)灌注疗效。方法72例膀胱癌术后应用BCG膀胱灌注前后,应用免疫化学发光法测定尿液IL-8水平。结果并发症发生率为44.4%(32/72)。2例退出治疗,余70例中13例分别于6～18个月(平均13.6个月)复发,复发率18.6%。复发组BCG灌注后尿IL-8水平变化无显著差异(P>0.05);未复发组BCG灌注后尿IL-8显著高于灌注前(P<0.01)。结论尿液IL-8检测对BCG膀胱灌注预防浅表性膀胱癌复发的疗效预测有重要意义。

芽孢杆菌HSY-8-1对植物病原真菌的抑制及其抑菌产物特性

为挖掘用于生物防治的微生物资源,自海南蚕豆枯萎病区土壤分离1株芽孢杆菌HSY-8-1,经抗菌试验分析表明,其代谢产生的拮抗物质对引发植物立枯病和根腐病的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和镰刀菌(Fusariumspp.)抑菌作用较强,具有使病菌菌丝扭曲、缢缩等致畸效应,并抑制立枯丝核菌的菌核形成。研究表明,在NB液体培养基中发酵时,进入稳定生长期后开始产生抑菌物质,72 h时累积达到最大值。这种抑菌物质的特性为外泌型、水溶性,可透过0.22μm的微孔滤膜,对热、酸、碱、蛋白酶水解、紫外线照射等影响有较强的稳定性。

枯草芽孢杆菌8-32产抗真菌物质发酵条件优化

为提高枯草芽孢杆菌菌株8-32抗真菌物质的产量,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计法找出影响菌株Bacillus subtilis 8-32产抗真菌物质的主要因素为培养时间、装液量和可溶性淀粉含量。采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,运用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对3个显著影响因子的最佳配比进行优化,得到最佳发酵工艺参数为培养时间72.28h,装液量59.80mL/250mL三角瓶,可溶性淀粉含量1.51%。优化后抑菌圈直径从试验设计初期的14.21mm提高至24.51mm。

水稻稻瘟病生防细菌5-8的鉴定及其生防机制研究

【目的】获得对水稻稻瘟病有较好生防效果的拮抗细菌并探索其作用机理。【方法】采用苗期防病试验,从保存的10种拮抗细菌中筛选出对水稻稻瘟病有较好防治效果的菌株5-8。通过对峙培养测定其抑菌谱。结合生理生化指标和16S rDNA基因序列同源性分析,鉴定该细菌分类地位,并通过PCR扩增、MALDI-TOF MS检测鉴定菌株5-8产生的抗菌物质种类。【结果】菌株5-8对水稻稻瘟病的防病效果最好,防效可达90%以上;该细菌抑菌谱广,对油菜菌核病菌、桃褐腐病菌等均有较强的抑菌活性。16S rDNA基因序列同源性分析和生理生化指标测定结果表明,菌株5-8为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);PCR可扩增到丰原素、伊枯草菌素,并结合MALDI-TOF MS的结果初步判定菌株5-8可产生伊枯草菌素。【结论】菌株5-8被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),主要通过产生脂肽类抗生素伊枯草菌素防治水稻稻瘟病。

枯草芽孢杆菌HAB-8菌株分离筛选鉴定及抑菌机理初步研究

对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株HAB-8的生物学特性及抑菌机理进行了初步研究。经形态学、生理生化特征及16SrDNA技术鉴定HAB-8菌株,应用对峙法测定了抑菌效果,对其在不同营养条件的适应性、耐盐性等进行了测定,运用光学显微镜和扫描电镜对其抑菌机理进行探究。结果表明:经形态学、生理生化特征及16srDNA技术鉴定HAB-8为B.subtilis;HAB-8菌株在6种培养基上形成的菌落,在形态上存在明显差别,直径从16.25～22.50 mm;HAB-8可在0～20%NaCl浓度的条件下生长;PDA平板对峙培养,发现HAB-8菌株,对芒果炭疽病菌等18株植物病原真菌的抑菌活性有较大差异,平均抑制率为58.52%;光学显微镜观察,抑菌带边缘的菌丝,均出现了不同程度的形态变化,菌丝扭曲变形,中部或顶端膨大变粗;孢子变形等;扫描电镜下,观察到细菌与菌丝直接接触,引起菌丝及孢子的畸形。说明拮抗细菌可能除了通过分泌活性物质来进行拮抗之外,还可能通过直接作用来抑制植物病原真菌的生长。

沼泽红假单胞菌与枯草芽孢杆菌对鲫鱼IL-8和IL-10基因表达的影响

为探究沼泽红假单胞菌与枯草芽孢杆菌对鲫鱼的IL-8和IL-10基因表达的影响。将鲫鱼随机平分为对照组(A)、沼泽红假单胞菌组(B)和复合菌组(C)。采用Trizol法提取RNA,反转录为cDNA,利用RT-PCR分析IL-8和IL-10基因在鲫鱼脾脏和肾脏组织表达量变化。结果显示,鲫鱼IL-8基因在第10天时,肾脏中B组表达量比A组高;第20天时,脾脏中C组表达量最高;在第30天时,脾脏、肾脏中均有较高表达。鲫鱼IL-8基因在各组脾脏中的表达量随时间的延长而增加,而肾脏中第30天的表达量最高,第20天最低。鲫鱼IL-10基因在第10天时,肾脏中C组表达量远高于A、B二组,第20天三组均无明显表达,第30天C组表达量最高。鲫鱼IL-10基因在各组肾脏中的表达量第30d最高,而在各组脾脏中的表达量随时间的延长无明显变化。这为益生菌在水产饲料中应用提供科学资料。

枯草芽孢杆菌PS-8对桔梗连作障碍土壤的修复及其促生作用

为探明用枯草芽孢杆菌PS-8研制一种新型连作障碍土壤改良剂的潜力,采用盆栽试验方法,向桔梗连作障碍土壤中施入不同比例(1%,2%,3%,4%)的枯草芽孢杆菌PS-8菌剂,于不同时期(施入菌剂后14,28,42,56 d)测定其对土壤微生物区系、酶活性、桔梗叶片MDA含量及对桔梗生长的影响。结果表明,施入不同量的枯草芽孢杆菌PS-8菌剂后,与同期对照相比,土壤中尖孢镰刀菌数量显著下降,细菌和放线菌数量显著上升,而总真菌数量显著下降,土壤中S-CAT活性显著低于同期对照,S-UE、蔗糖酶、磷酸酶活性显著高于同期对照,桔梗叶片MDA含量均明显低于同期对照。农艺性状测定也表明,枯草芽孢杆菌PS-8明显促进桔梗幼苗的株高和鲜重的增长。在不同比例菌剂的处理中,2%菌剂处理对上述各项指标的影响,不仅与对照相比具有显著差异,而且与其它三个处理之间也具有显著差异。综合分析可以得出,枯草芽孢杆菌PS-8能够改善桔梗连作障碍土壤的微生态环境,促进桔梗生长,对连作障碍土壤具有修复作用,可以进一步用来研制成桔梗大田生产中连作障碍土壤的改良剂。

贝莱斯芽孢杆菌HN-Q-8对马铃薯根际土壤微生物群落结构及理化性质的影响

【背景】贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)对作物生长有较好的促进效果,并且能抑制多种病原菌生长,但该菌对作物根际微生态影响的研究较少。【目的】明确贝莱斯芽孢杆菌HN-Q-8对马铃薯根际土壤微生物群落结构和理化性质的影响,旨在为芽孢杆菌在马铃薯生产中的应用提供理论依据。【方法】使用菌株HN-Q-8发酵液(fermentation liquid with bacterial cells,FLBS)、菌悬液(bacterial cell suspension,BCS)和上清液(fermentation liquid without bacterial cells,FL)灌根后的马铃薯根际土壤为研究对象,采用高通量测序技术测定了不同处理条件下马铃薯根际土壤微生物多样性和群落结构的变化,并且进一步测定了马铃薯根际土壤理化性质的变化。【结果】菌株HN-Q-8对马铃薯根际土壤微生物多样性无显著影响,但是影响了微生物群落结构的组成。在属水平上,相较于对照组,各处理马铃薯根际土壤中溶杆菌属(Lysobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)和被孢霉属(Mortierella)等多种有益菌属的相对丰度均有显著升高,改善了马铃薯根际土壤的群落结构;菌株HN-Q-8增强了脲酶、磷酸酶和过氧化氢酶的活性,并且显著提高了土壤中的速效氮、速效磷和速效钾的含量。【结论】贝莱斯芽孢杆菌HN-Q-8可以影响马铃薯根际土壤的微生物群落结构,提高土壤中有益微生物的相对丰度,并进一步增强了土壤酶活性及土壤肥力,为促进马铃薯生长发育及抵御病原菌侵染提供有利的土壤环境。

地衣芽孢杆菌产Levan果聚糖发酵条件的优化

通过单因素试验(培养基用水、碳源、氮源、培养温度和培养基初始pH值)和正交试验对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)8-37-0-1发酵产生Levan果聚糖的培养基组成及培养条件进行优化,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果表明:以蔗糖100g/L、牛肉膏1.0g/L、酵母粉0.6g/L、K2HPO4 3.0g/L、KH2PO4 3.0g/L、NaCl1.0g/L、MgSO4.7H2O 0.2g/L、FeSO4.7H2O 0.001g/L,自来水配制,培养基初始pH5.0,30℃培养8-37-0-1菌株24h,Levan果聚糖产量达到最高值41.7g/L,约是未优化时的5.0倍。

两步固态发酵法酿造功能性豆豉

运用分离自云南传统发酵豆豉的Bacillus subtilis SP-8-5与Lactobacillus plantarum YM-5-2菌株对大豆进行两步固态混合发酵。首先,将菌株B.subtilis SP-8-5接种至经室温浸泡10 h(20℃,质量比为1∶3),110℃(20min)蒸煮处理并冷却至30℃的大豆中,于26℃进行初步发酵42 h;随后再接种L.plantarum YM-5-2,并于30℃发酵2 d,最后置于4℃进行后发酵。经两步固态混合发酵处理后,得到一种纤溶活性较强,生产周期短,保质期相对较长,风味独特且易于被大众接受的新型功能性发酵豆豉。当后发酵时间为21 d时,样品豆豉中B.subtilisSP-8-5活菌数为(5.88±0.53)×108 CFU/g,而L.plantarum YM-5-2活菌数则高达(3.50±0.35)×1011 CFU/g,此时检测豆豉纤溶酶的纤溶圈直径高达(2.99±0.06)cm(37℃,静置培养48 h)。

组合生防菌与解盐促生菌复配对棉花的促生效应

【目的】研究多功能菌剂BCL-Rs对盐胁迫和立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)危害下棉花生长的影响。【方法】组合生防菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BCL-8与解盐促生菌产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)Rs-5复配获得BCL-Rs,通过盆栽、小区和大田试验对BCL-Rs促进棉花生长的功能进行验证。【结果】BCL-Rs对立枯丝核菌有很好的抑菌活性,并且能够有效提高棉花的耐盐性。盆栽试验和小区试验结果表明,BCL-Rs对棉花立枯病的防治效果分别达到了55.37%和51.06%,在盐胁迫条件下使棉苗干重分别提高了40.85%和25.81%,具有显著的防病促生和缓解盐胁迫的效能。棉花大田试验结果表明,BCL-Rs包衣处理及滴灌处理对棉花苗期生长有明显的促进作用,可显著提高棉花植株的鲜重、干重和株高,增大植株的叶面积,较常规处理增产10.51%。【结论】在BCL-8的防病性能与Rs-5的解盐促生功能的协同效应下,BCL-Rs能够更有效地防治盐胁迫条件下的棉花立枯丝核菌造成的危害。

基于芽孢杆菌固态发酵技术提高广西河池C4F烟叶品质的研究

采用芽孢杆菌ZZ-8(Bacillus sp.ZZ-8)固态发酵技术处理广西河池地区C4F烟叶,通过单因素试验和响应面试验确定最佳发酵条件,分析发酵后烟叶常规化学成分和致香成分含量变化,结合感官评吸评价发酵后烟叶的吸食品质。结果表明:接种量为3 mL、发酵温度为28℃、发酵时间为36 h、相对湿度为60%时烟叶石油醚提取物质量分数最高,为9.01%;在该条件下发酵烟叶,烟叶总糖质量分数由23.10%降低至22.20%,还原糖质量分数由22.19%提高至22.40%,糖碱比由10.23降低至9.45;烟叶经菌株发酵后产生了苯甲醛和β-环柠檬醛2种新物质,致香成分总含量由170.444μg/g提高到186.267μg/g,其中大马酮、茄酮、巨豆三烯酮、二氢大马酮、香叶基丙酮和二氢猕猴桃内酯等香味成分含量变化较大;发酵后烟叶香气质有所提升,刺激性和杂气均降低,烟气细腻柔和,余味舒适,吸食品质提高。

常压室温等离子体诱变选育高产核黄素枯草芽孢杆菌

该研究以BS120作为出发菌株,通过常压室温等离子体诱变(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)技术进行诱变处理,第一轮以40 mg/L 8-氮鸟嘌呤为筛选拮抗物进行筛选,得到核黄素产量和得率分别提升61.60%和58.12%的菌株BSG1。第二轮诱变以300 mg/L寡霉素为筛选拮抗物进行筛选,筛选获得菌株BSG3,核黄素产量和得率较BS120分别提升83.59%和78.76%。将核黄素操纵子表达质粒pMX45转入BSG3中,得到菌株BSG5,核黄素产量达到(4467.08±99.47)mg/L,得率为(42.56±1.25)mg/g葡萄糖,较BS120分别提高140.94%和120.52%,展现了良好的核黄素发酵性能和遗传稳定性。

一株β-甘露聚糖酶生产菌细胞培养条件的优化

地衣芽孢杆菌SY-8具有分泌β-甘露聚糖酶的能力。为提高地衣芽孢杆菌SY-8的产酶能力,必须先找到该菌培养的最佳环境条件,因此考查温度、摇床转速、传代浓度、培养pH、渗透压等因素对细胞生长状态的影响,发现当温度为30℃,摇床转速为100 rpm/min,传代浓度为1.25×106cell/mL,细胞培养pH为6.5,渗透压为360 osmol/g时,能达到SY-8细胞培养的最佳条件,有利于满足大规模培养的需要。