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球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白的分离纯化 被引量:3
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作者 于自然 尚克进 +3 位作者 马明 王健 牛瑞芳 任改新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期254-258,共5页
球形芽孢杆菌 Ts-1对蚊虫幼虫有高效杀灭能力,其有毒成份为一种蛋白质。纯芽孢-晶体复合物经超声波处理后,以0.05mol/L 的 NaOH 抽提毒素,经 Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析纯化,用 SDS-PAGE 检验柱层析得到的杀虫活性部分,Ts-1的芽孢... 球形芽孢杆菌 Ts-1对蚊虫幼虫有高效杀灭能力,其有毒成份为一种蛋白质。纯芽孢-晶体复合物经超声波处理后,以0.05mol/L 的 NaOH 抽提毒素,经 Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析纯化,用 SDS-PAGE 检验柱层析得到的杀虫活性部分,Ts-1的芽孢-晶体复合物中主要为42kD 和43kD 的两种蛋白质。经聚丙烯酰胺凝胶制备电泳分离纯化,生物活性测定表明这两种蛋白质都有杀蚊毒效,经 DEAE 纤维素柱层析进一步纯化,获得了分子量为42kD的毒蛋白。 展开更多
关键词 球形芽孢杆菌 ts-1毒蛋白
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球形芽孢杆菌 TS-1灭蚊毒蛋白的酶联免疫吸附测定 被引量:1
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作者 王健 任改新 尚克进 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期369-374,共6页
通过Sephadex G-200柱层析纯化得到球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白,其中主要是42kDa和43kDa两种毒蛋白。用此毒蛋白免疫家兔获得抗血清。利用 ELISA 双抗体夹心法比较测定了三种灭蚊球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)高毒株和两种无毒株,证... 通过Sephadex G-200柱层析纯化得到球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白,其中主要是42kDa和43kDa两种毒蛋白。用此毒蛋白免疫家兔获得抗血清。利用 ELISA 双抗体夹心法比较测定了三种灭蚊球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)高毒株和两种无毒株,证明 ELISA 具有很强的特异性。ELISA 测定球形芽孢杆菌 Ts-1纯化毒蛋白,最低可检值为1.56×10-5mg/ml。球形芽孢杆菌 Ts-1发酵液的最低可检度为1:16000倍稀释。ELISA 测定12和24小时发酵培养的 Ts-1样品处理液中毒蛋白的含量,分别为0.049mg/ml 和o.22mg/ml,毒蛋白含量相差4.59倍。而相应的生物测定 LC50值分别为0.71 ppm 和0.154 ppm,毒力相差4.61倍。ELISA 与生物测定方法结果吻合。 展开更多
关键词 球形芽孢杆菌 毒蛋白 ELISA
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球形芽孢杆菌Ts-1品系的形态发生和灭蚊毒蛋白形成的研究
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作者 张柏莉 任改新 王健 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期210-213,共4页
用酶联免疫吸附测定、荧光抗体定位和SDS-PAGE等方法,结合球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus)Ts-1品系在芽孢形成过程中的形态变化和不同发育阶段菌样毒力的生物测定,对毒蛋白的形成发生进行了比较研究。Ts-1毒蛋白形成、毒力大小和芽孢... 用酶联免疫吸附测定、荧光抗体定位和SDS-PAGE等方法,结合球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus)Ts-1品系在芽孢形成过程中的形态变化和不同发育阶段菌样毒力的生物测定,对毒蛋白的形成发生进行了比较研究。Ts-1毒蛋白形成、毒力大小和芽孢形成过程中形态变化密切相关。首次用荧光抗体定位方法不仅证明带有伴孢晶体的芽孢荧光度强,毒蛋白含量高;而且生长8小时营养体的细胞壁上也有毒蛋白的同源成分。 展开更多
关键词 ELISA 球形芽孢杆菌 毒蛋白
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LOCATION OF 43 kD MOSQUITO-LARVICIDAL TOXIN GENE OF HIGHLY TOXIC Bacillus sphaericus 10
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作者 刘阳 范云六 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1991年第5期593-598,共6页
The direct evidence of the location of the mosquito-larvicidal gene of Bacillus sphaericus10 (isolated from Jiangsu Province of China) on megaplasmid pFW1 was given by molecularcloning. The clone (pFL109) containing t... The direct evidence of the location of the mosquito-larvicidal gene of Bacillus sphaericus10 (isolated from Jiangsu Province of China) on megaplasmid pFW1 was given by molecularcloning. The clone (pFL109) containing the 1.4 kb HindⅢ DNA fragment from pFW1expressed the mosquito-larvicidal toxin protein (43 kD). The location of the gene codingfor the 43 kD toxin protein within the Xhol B fragment on the restriction map of pFW1 wasconfirmed by Southern blotting using the 1.4 kb HindⅢ DNA fragment as a probe. The non-toxic strains of Bacillus sphaericus were revealed to be 43 kD toxin gene dele-tion mutants by Southern and Western analyses. The 1.4 kb HindⅢ fragment of pFL109 can be used as a probe for differentiating thenon-toxic strains of Bacillus sphaericus from the toxic ones. 展开更多
关键词 bacillus sphaericus BS megaplasmid pFW1 LARVICIDAL toxin GENE GENE LOCATION
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球形芽孢杆菌Mtx1杀蚊毒素在苏云金芽孢杆菌以色列亚种中的表达 被引量:7
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作者 张蓓华 刘海洲 +2 位作者 刘铭 闫建平 袁志明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期49-52,共4页
将来源于球形芽孢杆菌SSII 1的mtx1毒素基因克隆至穿梭载体 pBU4上 ,得到mtx1插入方向相反的重组质粒 pMT9和pMT4。含有 pMT9和 pMT4的大肠杆菌转化子能表达产生Mtx1毒素 ,发酵液对敏感和抗性致倦库蚊幼虫具有中度毒杀作用 ;含有pMT9和p... 将来源于球形芽孢杆菌SSII 1的mtx1毒素基因克隆至穿梭载体 pBU4上 ,得到mtx1插入方向相反的重组质粒 pMT9和pMT4。含有 pMT9和 pMT4的大肠杆菌转化子能表达产生Mtx1毒素 ,发酵液对敏感和抗性致倦库蚊幼虫具有中度毒杀作用 ;含有pMT9和pMT4的苏云金芽孢杆菌转化子B pMT9和B pMT4在营养体生长阶段对敏感蚊幼和抗性幼虫也具有毒性 ,毒力与野生型SSII 1相当 ,而不同转化子在芽孢形成期的毒力因插入的mtx1基因转录方向不同而表现出差异 ,其中B pMT4对目标蚊幼毒力极低 (LC50 >1 0 0mg/mL) ,而B pMT9对蚊幼虫具有毒性 (LC50 =2 4 9mg/mL)。 展开更多
关键词 球形芽孢杆菌SSII-I Mtx1毒素 苏云金芽孢杆菌以色列亚种 杀蚊毒素
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苏云金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌杀蚊作用以及工程菌改造研究进展 被引量:1
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作者 唐建霞 朱荫昌 管晓虹 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2009年第4期221-226,共6页
苏云金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌是应用最广泛的杀蚊幼虫的细菌,但还存在很多不足。苏云金芽孢杆菌产生两类杀蚊幼虫晶体蛋白,即内毒素晶体蛋白和溶细胞毒素,球形芽孢杆菌产生二元毒素和杀蚊毒素。研究不同毒素的不同杀蚊作用,以及通... 苏云金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌是应用最广泛的杀蚊幼虫的细菌,但还存在很多不足。苏云金芽孢杆菌产生两类杀蚊幼虫晶体蛋白,即内毒素晶体蛋白和溶细胞毒素,球形芽孢杆菌产生二元毒素和杀蚊毒素。研究不同毒素的不同杀蚊作用,以及通过DNA重组技术改造原有的菌种,扩大其杀蚊幼虫的活性和范围,有助于更有效地杀灭媒介蚊虫和防治疟疾。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 球形芽孢杆菌 溶细胞毒素 晶体蛋白 球形芽孢杆菌二元毒素 杀蚊毒素 重组杀蚊工程菌
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