枯草芽孢杆菌PS-8对桔梗连作障碍土壤的修复及其促生作用

为探明用枯草芽孢杆菌PS-8研制一种新型连作障碍土壤改良剂的潜力,采用盆栽试验方法,向桔梗连作障碍土壤中施入不同比例(1%,2%,3%,4%)的枯草芽孢杆菌PS-8菌剂,于不同时期(施入菌剂后14,28,42,56 d)测定其对土壤微生物区系、酶活性、桔梗叶片MDA含量及对桔梗生长的影响。结果表明,施入不同量的枯草芽孢杆菌PS-8菌剂后,与同期对照相比,土壤中尖孢镰刀菌数量显著下降,细菌和放线菌数量显著上升,而总真菌数量显著下降,土壤中S-CAT活性显著低于同期对照,S-UE、蔗糖酶、磷酸酶活性显著高于同期对照,桔梗叶片MDA含量均明显低于同期对照。农艺性状测定也表明,枯草芽孢杆菌PS-8明显促进桔梗幼苗的株高和鲜重的增长。在不同比例菌剂的处理中,2%菌剂处理对上述各项指标的影响,不仅与对照相比具有显著差异,而且与其它三个处理之间也具有显著差异。综合分析可以得出,枯草芽孢杆菌PS-8能够改善桔梗连作障碍土壤的微生态环境,促进桔梗生长,对连作障碍土壤具有修复作用,可以进一步用来研制成桔梗大田生产中连作障碍土壤的改良剂。

大豆根腐病拮抗菌枯草芽孢杆菌8-32抗菌物质性质的初步研究

对致病菌—尖孢镰刀菌（Fusrium oxysporum）具有较强拮抗作用的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）8-32产生的理化性质进行了初步研究。结果表明,该抗菌物质80℃处理30 min,拮抗活性仍保持在90.00%,100℃以上会完全丧失活性;在p H 7.0~11.0范围内抑菌活性较稳定,最适p H为8.0;高浓度（25mmol/L）EDTA使其拮抗活性降低62%;该抗菌物质对Cu2＋、Fe3＋敏感,对蛋白酶K不敏感。枯草芽孢杆菌8-32产生的抗菌物质具有一定的耐热、耐碱（p H 11.0）、对蛋白酶不敏感等特性。

枯草芽孢杆菌8-32产抗真菌物质发酵条件优化

为提高枯草芽孢杆菌菌株8-32抗真菌物质的产量,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计法找出影响菌株Bacillus subtilis 8-32产抗真菌物质的主要因素为培养时间、装液量和可溶性淀粉含量。采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,运用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对3个显著影响因子的最佳配比进行优化,得到最佳发酵工艺参数为培养时间72.28h,装液量59.80mL/250mL三角瓶,可溶性淀粉含量1.51%。优化后抑菌圈直径从试验设计初期的14.21mm提高至24.51mm。

枯草芽孢杆菌HAB-8菌株分离筛选鉴定及抑菌机理初步研究

对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株HAB-8的生物学特性及抑菌机理进行了初步研究。经形态学、生理生化特征及16SrDNA技术鉴定HAB-8菌株,应用对峙法测定了抑菌效果,对其在不同营养条件的适应性、耐盐性等进行了测定,运用光学显微镜和扫描电镜对其抑菌机理进行探究。结果表明:经形态学、生理生化特征及16srDNA技术鉴定HAB-8为B.subtilis;HAB-8菌株在6种培养基上形成的菌落,在形态上存在明显差别,直径从16.25～22.50 mm;HAB-8可在0～20%NaCl浓度的条件下生长;PDA平板对峙培养,发现HAB-8菌株,对芒果炭疽病菌等18株植物病原真菌的抑菌活性有较大差异,平均抑制率为58.52%;光学显微镜观察,抑菌带边缘的菌丝,均出现了不同程度的形态变化,菌丝扭曲变形,中部或顶端膨大变粗;孢子变形等;扫描电镜下,观察到细菌与菌丝直接接触,引起菌丝及孢子的畸形。说明拮抗细菌可能除了通过分泌活性物质来进行拮抗之外,还可能通过直接作用来抑制植物病原真菌的生长。

沼泽红假单胞菌与枯草芽孢杆菌对鲫鱼IL-8和IL-10基因表达的影响

为探究沼泽红假单胞菌与枯草芽孢杆菌对鲫鱼的IL-8和IL-10基因表达的影响。将鲫鱼随机平分为对照组(A)、沼泽红假单胞菌组(B)和复合菌组(C)。采用Trizol法提取RNA,反转录为cDNA,利用RT-PCR分析IL-8和IL-10基因在鲫鱼脾脏和肾脏组织表达量变化。结果显示,鲫鱼IL-8基因在第10天时,肾脏中B组表达量比A组高;第20天时,脾脏中C组表达量最高;在第30天时,脾脏、肾脏中均有较高表达。鲫鱼IL-8基因在各组脾脏中的表达量随时间的延长而增加,而肾脏中第30天的表达量最高,第20天最低。鲫鱼IL-10基因在第10天时,肾脏中C组表达量远高于A、B二组,第20天三组均无明显表达,第30天C组表达量最高。鲫鱼IL-10基因在各组肾脏中的表达量第30d最高,而在各组脾脏中的表达量随时间的延长无明显变化。这为益生菌在水产饲料中应用提供科学资料。

两步固态发酵法酿造功能性豆豉

运用分离自云南传统发酵豆豉的Bacillus subtilis SP-8-5与Lactobacillus plantarum YM-5-2菌株对大豆进行两步固态混合发酵。首先,将菌株B.subtilis SP-8-5接种至经室温浸泡10 h(20℃,质量比为1∶3),110℃(20min)蒸煮处理并冷却至30℃的大豆中,于26℃进行初步发酵42 h;随后再接种L.plantarum YM-5-2,并于30℃发酵2 d,最后置于4℃进行后发酵。经两步固态混合发酵处理后,得到一种纤溶活性较强,生产周期短,保质期相对较长,风味独特且易于被大众接受的新型功能性发酵豆豉。当后发酵时间为21 d时,样品豆豉中B.subtilisSP-8-5活菌数为(5.88±0.53)×108 CFU/g,而L.plantarum YM-5-2活菌数则高达(3.50±0.35)×1011 CFU/g,此时检测豆豉纤溶酶的纤溶圈直径高达(2.99±0.06)cm(37℃,静置培养48 h)。

组合生防菌与解盐促生菌复配对棉花的促生效应

【目的】研究多功能菌剂BCL-Rs对盐胁迫和立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)危害下棉花生长的影响。【方法】组合生防菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BCL-8与解盐促生菌产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)Rs-5复配获得BCL-Rs,通过盆栽、小区和大田试验对BCL-Rs促进棉花生长的功能进行验证。【结果】BCL-Rs对立枯丝核菌有很好的抑菌活性,并且能够有效提高棉花的耐盐性。盆栽试验和小区试验结果表明,BCL-Rs对棉花立枯病的防治效果分别达到了55.37%和51.06%,在盐胁迫条件下使棉苗干重分别提高了40.85%和25.81%,具有显著的防病促生和缓解盐胁迫的效能。棉花大田试验结果表明,BCL-Rs包衣处理及滴灌处理对棉花苗期生长有明显的促进作用,可显著提高棉花植株的鲜重、干重和株高,增大植株的叶面积,较常规处理增产10.51%。【结论】在BCL-8的防病性能与Rs-5的解盐促生功能的协同效应下,BCL-Rs能够更有效地防治盐胁迫条件下的棉花立枯丝核菌造成的危害。

常压室温等离子体诱变选育高产核黄素枯草芽孢杆菌

该研究以BS120作为出发菌株,通过常压室温等离子体诱变(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)技术进行诱变处理,第一轮以40 mg/L 8-氮鸟嘌呤为筛选拮抗物进行筛选,得到核黄素产量和得率分别提升61.60%和58.12%的菌株BSG1。第二轮诱变以300 mg/L寡霉素为筛选拮抗物进行筛选,筛选获得菌株BSG3,核黄素产量和得率较BS120分别提升83.59%和78.76%。将核黄素操纵子表达质粒pMX45转入BSG3中,得到菌株BSG5,核黄素产量达到(4467.08±99.47)mg/L,得率为(42.56±1.25)mg/g葡萄糖,较BS120分别提高140.94%和120.52%,展现了良好的核黄素发酵性能和遗传稳定性。