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Bacillus subtilis B2产1-脱氧野尻霉素(DNJ)发酵条件优化 被引量:7
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作者 朱运平 李秀婷 李里特 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第17期290-293,共4页
为探索制备含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ的菌株Bacillus subtilisB2为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ的发酵液。结果表明:接... 为探索制备含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ的菌株Bacillus subtilisB2为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ的发酵液。结果表明:接种量对α-葡萄糖苷酶抑制活性影响不明显,当接种量大于104个/mL时,发酵液的α-葡萄糖苷酶抑制活性均在20以上。而豆渣浓度、发酵温度、培养基初始pH值及发酵时间对发酵液α-葡萄糖苷酶抑制活性影响较大,在豆渣质量浓度30mg/mL,初始pH值6~8,发酵温度40℃的条件下发酵48h,发酵液表现出较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性。以Bacillus subtilisB2发酵豆渣的发酵液为原料开发含DNJ的降糖功能食品,可以大大提高豆渣的利用价值,为降糖功能食品的开发利用开辟新途径。 展开更多
关键词 1-脱氧野尻霉素 bacillus subtilis B2 豆渣 降血糖 功能性食品
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产蛋白酶菌株Bacillus subtilis GS-1发酵条件优化及蛋白酶水解应用初步研究 被引量:3
2
作者 王方华 刘亮 +1 位作者 王永华 杨博 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期79-86,91,共9页
利用Plackett-Burman(PB)试验和相应面优化方法对枯草杆菌GS-1菌株发酵产蛋白酶的条件进行优化,以期获得高活性的蛋白酶发酵液。同时,将发酵所产蛋白酶用于蛋白水解实验,以进一步考察蛋白酶的水解特性。首先,通过PB试验,筛选出3个影响... 利用Plackett-Burman(PB)试验和相应面优化方法对枯草杆菌GS-1菌株发酵产蛋白酶的条件进行优化,以期获得高活性的蛋白酶发酵液。同时,将发酵所产蛋白酶用于蛋白水解实验,以进一步考察蛋白酶的水解特性。首先,通过PB试验,筛选出3个影响菌株发酵过程中蛋白酶活力的主要因子(氯化铵、初始pH值及培养温度)。其次,通过响应面优化法,进一步探讨各参数之间的相互关系并最终拟合得出发酵产酶活的方程。结果表明,在氯化铵(3.768 g/L),初始pH(5.6)以及培养温度22.4℃的条件下,发酵液中蛋白酶的最高酶活力能达到372.814 U/mL。水解试验结果表明:相对于植物来源的蛋白,该蛋白酶粗提物对于动物来源的蛋白具有较大的水解偏好型。该蛋白酶粗提物对于由谷氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或精氨酸所组成的化学键有较强的水解偏好性。以上结果表明:该菌株发酵所产的蛋白酶在蛋白水解加工行业中具有潜在的开发应用价值。 展开更多
关键词 枯草杆菌GS-1 蛋白酶 发酵优化 响应面法 蛋白水解
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响应面法优化Bacillus subtilis XH-13_UV3-8产葡萄糖-1-磷酸的发酵条件 被引量:4
3
作者 史军花 许向华 +1 位作者 赵国罡 郑鸿雁 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期176-179,184,共5页
应用响应面法对Bacillus subtilis XH-13_UV3-8生产葡萄糖-1-磷酸的发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计法对12个相关影响因素的效应进行评价,筛选出了有显著正效应的酵母浸粉浓度和K2HPO4·3H2O浓度和有显著负效应的p... 应用响应面法对Bacillus subtilis XH-13_UV3-8生产葡萄糖-1-磷酸的发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计法对12个相关影响因素的效应进行评价,筛选出了有显著正效应的酵母浸粉浓度和K2HPO4·3H2O浓度和有显著负效应的pH等3个因素;接着用最陡爬坡路径逼近最大响应区域;最后通过Box-Behnken设计法,利用Design-Expert软件进行二次回归分析,得到主要因素的最佳条件为:酵母浸粉0.8%、K2HPO4·3H2O0.7%和pH6.6,在此优化培养条件下,发酵液中葡萄糖-1-磷酸浓度从6.85mg/mL提高到8.56mg/mL。 展开更多
关键词 响应面分析法 枯草芽孢杆菌 Plackett-Burman法 葡萄糖-1-磷酸 优化
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外源氧载体和前体L-谷氨酸添加策略提高Bacillus subtilis HB-1发酵产γ-聚谷氨酸 被引量:2
4
作者 任东雪 陈鹏程 +2 位作者 郑璞 徐志南 卢松 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期84-92,共9页
为了提高外源L-谷氨酸依赖性菌株枯草芽孢杆菌HB-1产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的能力,采用添加氧载体和前体L-谷氨酸的策略,研究其对菌体生长和γ-PGA产量的影响。摇瓶单因素结果表明,最佳氧载体为聚二甲氧基硅烷(PDMS),在原始培养基中添加... 为了提高外源L-谷氨酸依赖性菌株枯草芽孢杆菌HB-1产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的能力,采用添加氧载体和前体L-谷氨酸的策略,研究其对菌体生长和γ-PGA产量的影响。摇瓶单因素结果表明,最佳氧载体为聚二甲氧基硅烷(PDMS),在原始培养基中添加体积分数为10%的PDMS,菌体OD600提高了3~5倍;前体L-谷氨酸的最适添加时间为18 h,最适添加质量浓度为10 g/L。在3 L发酵罐扩大培养后,γ-PGA产量提高到45 g/L;在发酵30 h流加碳源和前体L-谷氨酸,γ-PGA质量浓度达到52 g/L。发酵产物经红外,氨基酸分析仪等证实其为多肽类化合物,相对分子质量高达1000万。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌HB-1 Γ-聚谷氨酸 氧载体 前体L-谷氨酸
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Biocontrol of Rhizoctonia solani K1 by Iturin A Producer Bacillus subtilis RB14 Seed Treatment in Tomato Plants 被引量:6
5
作者 Umme Salma Zohora Takashi Ano Mohammad Shahedur Rahman 《Advances in Microbiology》 2016年第6期424-431,共8页
Bacillus subtilis RB14 was used as an antagonist against fungal pathogen Rhizoctonia solani K1 to control damping-off diseases in tomato plants. Tomato seeds were treated with B. subtilis RB14 culture. The concentrati... Bacillus subtilis RB14 was used as an antagonist against fungal pathogen Rhizoctonia solani K1 to control damping-off diseases in tomato plants. Tomato seeds were treated with B. subtilis RB14 culture. The concentration of bacterial cells for the treatment was about 10<sup>8</sup> cfu/ml. Treated tomato seeds showed 99% germination index similar to the untreated seeds. Scanning Electron Microscopic observations showed a clear evidence of the presence of B. subtilis RB14 on tomato seed surface. Clear inhibition zone was observed using treated seed in dual plate assay against R. solani K1. B. subtilis RB14 treated seed showed 80% reduction in disease incidence during in vivo plant experiments. B. subtilis RB14 produces lipopeptide antifungal antibiotic iturin A which could suppress R. solani K1. The phenomenon was supported by our observation where we found significant amount of iturin A from the root zone soil of the seed treated plants. 展开更多
关键词 bacillus subtilis RB14 Rhizoctonia solani K1 Seed Treatment Iturin A
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Fungistatic Activity of Crude Protein Extracted from Bacillus subtilis HJX1
6
作者 Zhao Gengfeng Qiu Yimin +1 位作者 Zhang Yunxia Xiong Guoru 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2015年第4期22-24,共3页
Bacillus subtilis HJX1, a biocontrol strain of Fusarium oxysporum f. sp. cubense, could inhibit growth of several plant pathogenic fungi in vitro. To un- derstand its mechanism of fungistasis, we extracted crude prote... Bacillus subtilis HJX1, a biocontrol strain of Fusarium oxysporum f. sp. cubense, could inhibit growth of several plant pathogenic fungi in vitro. To un- derstand its mechanism of fungistasis, we extracted crude protein from fermentation broth of the strain HJX1 through ammonium sulfate precipitation, and prelimina- rily studied fungistatic activities at different conditions. The results showed that the crude protein was insensitive to protease K, trypsin or ultraviolet radiation. The fungistatic activity was unchanged when treated in water batch at 40 ℃, 60 ℃, 80 ℃ or 100 ℃ for 30 min, and the fungistatic activity maintained 60% when trea- ted at 121℃ for 30 min. 展开更多
关键词 bacillus subtilis HJX1 Fungistatic protein ACTIVITY Fusarium oxysporum f. sp. cubense
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枯草芽孢杆菌CH-1降解羽毛产物对Cr(Ⅵ)的还原作用
7
作者 李茹桥 刘颖 +2 位作者 陈清旺 吴嘉沛 陈金军 《中国农学通报》 2024年第15期117-123,共7页
本研究旨在探索一种对环境友好的方法以减少重金属六价铬Cr(Ⅵ)的毒性。采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CH-1发酵羽毛,制备出富含半胱氨酸的羽毛发酵液(Feather Fermentation Broth,FFB)。实验结果显示FFB能够有效地将有毒的六价... 本研究旨在探索一种对环境友好的方法以减少重金属六价铬Cr(Ⅵ)的毒性。采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CH-1发酵羽毛,制备出富含半胱氨酸的羽毛发酵液(Feather Fermentation Broth,FFB)。实验结果显示FFB能够有效地将有毒的六价铬还原为相对无害的三价铬。通过对FFB的β-角蛋白酶酶活性、半胱氨酸浓度以及对六价铬Cr(Ⅵ)的还原率的测定。我们发现FFB中β-角蛋白酶酶活性在21 h左右达到最大值,而半胱氨酸含量在36 h达到最高值,Cr(Ⅵ)的还原效果最佳时间也是36 h。值得注意的是,即使经过高压高温处理,FFB对Cr(Ⅵ)的还原力并未受到影响,表明还原过程不依赖于生物酶的作用。进一步实验,将FFB上清原液浓缩5倍后处理重铬酸钾溶液,发现浓缩液的还原效果是原始上清液效果的1.5倍。研究表明枯草芽孢杆菌CH-1能较好地降解羽毛废弃物,水解产物中含大量半胱氨酸,对Cr(Ⅵ)具有显著的还原能力。综上所述,本研究提供了一种使用枯草芽孢杆菌CH-1无公害处理羽毛废弃物的新策略,并为其在循环农业生态系统中的应用提供了理论依据和精确计算方法。这一发现对于实现农业废弃物资源化利用,以及环境中有毒六价铬的安全处理具有重要意义。 展开更多
关键词 Cr(Ⅵ)还原 羽毛水解产物 枯草芽孢杆菌CH-1 角蛋白酶活性 半胱氨酸 环境治理
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枯草芽胞杆菌XF-1粗蛋白抑菌活性初步研究 被引量:25
8
作者 熊国如 张翠英 +2 位作者 刘庆丰 李顺德 何月秋 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期92-95,共4页
枯草芽胞杆菌XF-1是一株对大白菜根肿病有良好防治效果及对多种植物病原真菌有抑菌效果的生防菌株。为了研究其可能的作用机制,本文用硫酸铵沉淀法提取了发酵液中粗蛋白,并在不同处理条件下对其抑菌活性进行了初步研究。该粗蛋白对蛋白... 枯草芽胞杆菌XF-1是一株对大白菜根肿病有良好防治效果及对多种植物病原真菌有抑菌效果的生防菌株。为了研究其可能的作用机制,本文用硫酸铵沉淀法提取了发酵液中粗蛋白,并在不同处理条件下对其抑菌活性进行了初步研究。该粗蛋白对蛋白酶K和胰蛋白酶及紫外照射均不敏感,对热稳定。经40、60、80℃和100℃处理20 min后,其抑菌作用基本上无变化;经121℃处理20 min后,抑菌活性保持60%。这些结果,为进一步研究XF-1菌株对根肿病的防治机制和进一步应用提供了试验依据。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌xf-1 抑菌蛋白 活性 大白菜根肿病
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生防菌株XF-1的鉴定和抑菌谱的测定 被引量:19
9
作者 熊国如 赵更峰 +1 位作者 范成明 何月秋 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期190-194,共5页
依据传统形态学、生理生化特征及16S rRNA基因序列,将一株对十字花科根肿病有很好防治效果的菌株XF-1鉴定为枯草芽孢杆菌。采用细菌的通用引物P0,P6扩增16S rRNA基因片段,得到1513 bp的DNA片段,其序列与枯草芽孢杆菌的序列的同源性高达... 依据传统形态学、生理生化特征及16S rRNA基因序列,将一株对十字花科根肿病有很好防治效果的菌株XF-1鉴定为枯草芽孢杆菌。采用细菌的通用引物P0,P6扩增16S rRNA基因片段,得到1513 bp的DNA片段,其序列与枯草芽孢杆菌的序列的同源性高达99%。与病原真菌对峙培养的结果表明,该菌株能对供试的卵菌、子囊菌、担子菌和半知菌的21个植物病原真菌均有很好的抑制作用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌xf-1 鉴定 十字花科根肿病 生物防治
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枯草芽孢杆菌XF-1中脱乙酰几丁质酶在大肠杆菌中的表达及其抑菌活性 被引量:6
10
作者 赵静 熊国如 +3 位作者 王志远 毛自朝 吴毅歆 何月秋 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期504-509,共6页
根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱... 根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱乙酰几丁质酶基因的相似性达到99%,氨基酸序列相似性为98%,在第19、47、60、256和257位的氨基酸发生了变化,分别由异亮氨酸代替了菌株B168脱乙酰几丁质酶中的甲硫氨酸、缬氨酸代替了谷氨酸、苏氨酸代替了异亮氨酸、天冬氨酸代替了谷氨酸、赖氨酸代替了天冬酰胺。菌株XF-1对稻瘟病菌Magnaporthe oryzae和芸薹根肿菌Plasmodiophora brassicae有抑制作用,而菌株B168没有。菌株XF-1和B168的csn基因在大肠杆菌Escherichia coli中的表达产物均具有脱乙酰几丁质酶活性,但前者的表达产物对稻瘟病菌及芸薹根肿菌具有抑制作用,而后者没有。表明脱乙酰几丁质酶是XF-1抑制根肿病作用机制之一,且上述5个氨基酸替代可能与抑菌机制有关。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌xf-1 脱乙酰几丁质酶 根肿菌 抑菌作用
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枯草芽孢杆菌XF-1提取物对11种植物病原菌的抑制作用 被引量:9
11
作者 贾媛 孙睿揆 +3 位作者 吴毅歆 毛自朝 孙海霞 何月秋 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期753-756,共4页
采用盐酸和甲醇抽提法,提取了枯草芽孢杆菌XF-1(Bacillus subtilis XF-1)的抑菌物质。以该提取物处理根肿菌孢子2 d,有50%孢子活性被抑制;处理9 d后,孢子萌发相对抑制率始终保持在90%以上。提取物对三七根腐病菌、水稻纹枯病菌、禾谷镰... 采用盐酸和甲醇抽提法,提取了枯草芽孢杆菌XF-1(Bacillus subtilis XF-1)的抑菌物质。以该提取物处理根肿菌孢子2 d,有50%孢子活性被抑制;处理9 d后,孢子萌发相对抑制率始终保持在90%以上。提取物对三七根腐病菌、水稻纹枯病菌、禾谷镰刀菌、魔芋基腐菌、烟草赤星菌生长抑制率分别为71.97%、62.23%、60.96%、60.70%和57.92%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌xf-1 根肿菌 拮抗物质 抑菌作用
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叶面喷施枯草芽胞杆菌XF-1防治大白菜根肿病 被引量:6
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作者 何朋杰 崔文艳 +4 位作者 何鹏飞 袁海 李兴玉 吴毅歆 何月秋 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期104-108,共5页
为了建立简易、有效的根肿病生防体系,本研究采用浇灌和喷施枯草芽胞杆菌XF-1的绿色荧光蛋白标记菌株XF-1-gfp,测定其在大白菜植株内的定殖能力,并用野生型菌株XF-1发酵液研究其防治根肿病和挽回产量效果。结果表明,叶面喷施XF-1-gfp发... 为了建立简易、有效的根肿病生防体系,本研究采用浇灌和喷施枯草芽胞杆菌XF-1的绿色荧光蛋白标记菌株XF-1-gfp,测定其在大白菜植株内的定殖能力,并用野生型菌株XF-1发酵液研究其防治根肿病和挽回产量效果。结果表明,叶面喷施XF-1-gfp发酵液后,标记菌在大白菜根、茎、叶等组织内的密度呈现出"先上升后下降最后趋于平稳"的趋势,最终稳定在约10~3 cfu/g组织;盆栽试验结果表明,与空白对照相比,所有处理发病率和病情指数均显著下降,喷施XF-1发酵液后最佳防治效果为56.4%,浇灌化学杀菌剂10%氰霜唑悬浮剂2 000倍液及1×10~7 cfu/mL的XF-1发酵液防效分别为78.6%与70.7%。大田试验结果表明,喷施XF-1发酵液后防治效果达52.6%,与浇灌化学杀菌剂10%氰霜唑悬浮剂(64.6%)及XF-1发酵液(74.0%)相比无显著差异。此外,与空白对照、浇灌10%氰霜唑悬浮剂及XF-1发酵液相比,喷施XF-1发酵液后大白菜单株产量分别增加了74.0%、35.1%及23.6%。试验结果表明叶面喷施XF-1发酵液是一种有效的防控大白菜根肿病及增产增收的方法。 展开更多
关键词 根肿病 枯草芽胞杆菌xf-1 氰霜唑 病害管理 土传病害 生物防治
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枯草芽孢杆菌XF-1的碳水化合物活性酶类(CAZymes)蛋白预测与遗传关系分析 被引量:7
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作者 韩长志 祝友朋 许僖 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第3期95-100,共6页
枯草芽孢杆菌XF-1对多种植物病原菌具有较好的抑制作用,是农业生产上非常重要的生防菌之一.碳水化合物活性酶类蛋白(CAZymes)作为植物病原真菌、细菌中重要的蛋白,在其生长和发育过程中发挥着重要作用.基于前期获得的枯草芽孢杆菌XF-1中... 枯草芽孢杆菌XF-1对多种植物病原菌具有较好的抑制作用,是农业生产上非常重要的生防菌之一.碳水化合物活性酶类蛋白(CAZymes)作为植物病原真菌、细菌中重要的蛋白,在其生长和发育过程中发挥着重要作用.基于前期获得的枯草芽孢杆菌XF-1中104个分泌蛋白基本序列信息,利用CAT预测程序对该菌中的CAZymes蛋白进行预测分析,明确其含有CAZymes蛋白的数量是58个,上述蛋白可以分为主要类别和复合类别两大类,前者包括26个GHs、21个CBMs以及2个CEs、3个PLs、2个GTs;后者则包括4个复合蛋白类型GH/CBM.该研究有效地实现了枯草芽孢杆菌XF-1中CAZymes的预测,为进一步开展其功能研究打下坚实的理论基础. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌xf-1 碳水化合物活性酶蛋白 预测程序 遗传关系
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枯草芽孢杆菌肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)表达的影响 被引量:1
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作者 齐盟 辛雅明 +2 位作者 白绥明 胡亮 杨银凤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期52-58,共7页
为了探究来源于枯草芽孢杆菌细胞壁的肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间(2、4、6、8、10和12 h),采用荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检... 为了探究来源于枯草芽孢杆菌细胞壁的肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间(2、4、6、8、10和12 h),采用荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激时间;再使用不同浓度的肽聚糖(0、10、20、30、40和50μg/mL)刺激ORECs 2 h,采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激浓度。结果显示:(1)使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间时,SBD-1的mRNA和蛋白表达量随着时间的增加呈先下降后升高的趋势,2 h时表达量最多并极显著高于对照组(P<0.001)。(2)使用不同浓度肽聚糖刺激ORECs 2 h时,SBD-1的mRNA和蛋白表达量随着肽聚糖浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在20μg/mL时表达量最多并极显著高于对照组(P<0.001)。(3)不同时间刺激试验和不同浓度刺激试验均不会对ORECs产生细胞毒性作用。结果表明,来源于枯草芽孢杆菌的肽聚糖能够诱导ORECs表达SBD-1,最佳刺激条件为20μg/mL枯草芽孢杆菌肽聚糖刺激ORECs 2 h。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌肽聚糖 绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs) β-防御素-1(SBD-1) 荧光定量PCR(qPCR) 酶联免疫吸附试验(ELISA) CCK8
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枯草芽孢杆菌WTX1胞外酶降解AFB_(1)酶学特性及降解位点分析 被引量:3
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作者 杨冬 唐璎 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期93-102,共10页
为丰富生物降解黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))资源,研究已筛选到的枯草芽孢杆菌WTX1降解AFB_(1)的胞外酶特性及其降解位点。通过降解与AFB_(1)毒性位点结构相似的3种化合物,采用液相色谱串联三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)检测降解液。经层析分... 为丰富生物降解黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))资源,研究已筛选到的枯草芽孢杆菌WTX1降解AFB_(1)的胞外酶特性及其降解位点。通过降解与AFB_(1)毒性位点结构相似的3种化合物,采用液相色谱串联三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)检测降解液。经层析分离,降解AFB_(1)胞外酶主要有Ea、Eb两种。最适降解条件:降解酶Ea降解温度为50℃,pH 5,降解率高达88.4%;降解酶Eb降解温度为37℃,pH 5,降解率为73.4%;Ea酶的作用位点为AFB_(1)的呋喃环双键、香兰素内脂环、戊烯酮环结构,Eb酶的作用位点为AFB_(1)的香兰素内脂环、戊烯酮环结构。酶组降解途径为通过水解作用,加氢及连续脱去-CO基团。菌株WTX1胞外酶通过水解作用破坏AFB_(1)毒性位点,起到降解作用,该酶具有很好的抗逆性,温度和pH适应性适合工业化加工的苛刻条件。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 枯草芽孢杆菌 降解AFB_(1)酶组 降解位点 产物分析
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枯草芽孢杆菌细胞壁通过TLR-2-MyD88-NF-κB/MAPK信号通路调控绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1的表达
16
作者 辛雅明 白绥明 +9 位作者 白刚 高景鹏 樊翀宇 韩彩霞 周伟 张文彦 永荣 齐盟 肖红 杨银凤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期1-8,共8页
为了探索枯草芽孢杆菌细胞壁诱导绵羊β-防御素-1(SBD-1)表达的主要信号转导途径,本试验首先使用反复冻融法与超声波破碎法相结合的方法破碎枯草芽孢杆菌并收集其细胞壁,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法分析细胞壁成分及其含量,然后利... 为了探索枯草芽孢杆菌细胞壁诱导绵羊β-防御素-1(SBD-1)表达的主要信号转导途径,本试验首先使用反复冻融法与超声波破碎法相结合的方法破碎枯草芽孢杆菌并收集其细胞壁,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法分析细胞壁成分及其含量,然后利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)方法检测枯草芽孢杆菌细胞壁刺激绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)后通路因子(TLR-2、MyD88、NF-κB、p38、JNK和ERK1/2)mRNA和蛋白的表达变化,最后使用通路抑制剂分别阻断NF-κB、p38、JNK和ERK1/2信号通路,用枯草芽孢杆菌细胞壁刺激ORECs并检测刺激后SBD-1 mRNA表达变化,从而确定诱导SBD-1表达的主要信号通路。结果显示,枯草芽孢杆菌细胞壁制备成功,细胞壁主要成分为肽聚糖和磷壁酸,含量分别为(90.85±0.91)%和(8.85±0.11)%。与对照组相比,枯草芽孢杆菌细胞壁刺激ORECs后信号通路因子(TLR-2、MyD88、NF-κB、p38、JNK和ERK1/2)的mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),使用通路抑制剂阻断各个信号通路后再刺激ORECs,SBD-1 mRNA表达水平均极显著下降(P<0.01),且添加NF-κB和JNK抑制剂组下降幅度最大。结果表明,枯草芽孢杆菌细胞壁可能通过TLR-2-MyD88-NF-κB/MAPK信号通路调控ORECs SBD-1的表达。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌细胞壁 绵羊瘤胃上皮细胞 β-防御素-1 抑制剂 信号通路
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枯草芽孢杆菌培养上清液对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响
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作者 白绥明 辛雅明 +2 位作者 齐盟 胡亮 杨银凤 《畜牧与饲料科学》 2023年第5期8-14,共7页
[目的]探究枯草芽孢杆菌培养上清液对绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial cells,ORECs)中绵羊β-防御素-1(sheepβ-defesin-1,SBD-1)表达的影响。[方法]采用Cell Counting kit-8(CCK-8)方法筛选对ORECs无明显毒性作用的枯草芽... [目的]探究枯草芽孢杆菌培养上清液对绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial cells,ORECs)中绵羊β-防御素-1(sheepβ-defesin-1,SBD-1)表达的影响。[方法]采用Cell Counting kit-8(CCK-8)方法筛选对ORECs无明显毒性作用的枯草芽孢杆菌培养上清液刺激浓度范围与刺激时间范围。用筛选出的无明显毒性作用的不同浓度枯草芽孢杆菌对应的培养上清液刺激ORECs 8 h后,采用荧光定量PCR(qPCR)技术和酶联免疫吸附(ELISA)检测方法筛选枯草芽孢杆菌培养上清液诱导SBD-1表达的最佳刺激浓度,以该浓度枯草芽孢杆菌对应的培养上清液刺激ORECs不同时间,采用qPCR技术和ELISA检测方法确定枯草芽孢杆菌培养上清液诱导SBD-1表达的最佳刺激时间。[结果]①对ORECs无明显毒性作用的枯草芽孢杆菌对应的培养上清液浓度范围为10^(7)~10^(11) CFU/mL,刺激时间范围为2~24 h。②利用qPCR技术和ELISA检测方法筛选出最佳刺激浓度为10^(11) CFU/mL枯草芽孢杆菌对应的培养上清液。③以该浓度枯草芽孢杆菌对应的培养上清液刺激ORECs不同时间,采用qPCR技术和ELISA检测方法确定枯草芽孢杆菌培养上清液诱导SBD-1表达的最佳刺激时间为24 h。[结论]枯草芽孢杆菌培养上清液可以诱导ORECs SBD-1的表达。 展开更多
关键词 绵羊瘤胃上皮细胞 枯草芽孢杆菌培养上清液 β-防御素-1 荧光定量PCR
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番茄灰霉病生防细菌BAB-1的鉴定及发酵条件的优化 被引量:19
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作者 刘宁 郭庆港 +4 位作者 安海 李社增 鹿秀云 马平 董金皋 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第2期56-62,共7页
菌株BAB-1是从土壤中分离出的对番茄灰霉病具有较好防治效果的拮抗细菌。通过对该菌株进行形态特征观察、16SrDNA序列分析和API50CHB细菌鉴定试剂盒鉴定,确定菌株BAB-1为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。采用16种培养基对菌株BAB-1进... 菌株BAB-1是从土壤中分离出的对番茄灰霉病具有较好防治效果的拮抗细菌。通过对该菌株进行形态特征观察、16SrDNA序列分析和API50CHB细菌鉴定试剂盒鉴定,确定菌株BAB-1为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。采用16种培养基对菌株BAB-1进行了发酵培养,结果表明,3号培养基最适合该菌株菌体生长和抑菌物质的产生。进一步进行了培养条件的优化,发现在培养温度30℃,转速210rpm,初始pH7.24,接种量3%,装样量为70mL/250mL时菌体生产量最高,菌量达到1.63×109cfu/mL;而在培养温度30℃,转速210rpm,初始pH7.24,接种量2%,装样量为100mL/250mL时最适合抑菌物质的产生,对番茄灰霉病菌的抑菌圈直径达到1.81cm。 展开更多
关键词 灰霉病菌 枯草芽孢杆菌 鉴定 培养基优化 生防细菌BAB-1
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利用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌的突变体文库 被引量:16
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作者 马欣 刘俊 +2 位作者 乔俊卿 伍辉军 高学文 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期77-81,共5页
为了鉴定枯草芽孢杆菌定殖和促进植物生长相关基因,用携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA转化枯草芽孢杆菌OKB105菌株。高温诱变条件下,筛选了2 000个转座子插入突变的单克隆,构建了OKB105菌株的突变体文库。对随机挑选的15个突变体采用... 为了鉴定枯草芽孢杆菌定殖和促进植物生长相关基因,用携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA转化枯草芽孢杆菌OKB105菌株。高温诱变条件下,筛选了2 000个转座子插入突变的单克隆,构建了OKB105菌株的突变体文库。对随机挑选的15个突变体采用PCR及Southern杂交验证,结果表明:转座子TnYLB-1以单拷贝、随机方式插入到OKB105菌株的染色体上。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌OKB105 TnYLB-1转座子 pMarA质粒 Himar1转座元件 随机诱变
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枯草芽孢杆菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响 被引量:18
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作者 王佩 范燕茹 +1 位作者 金鑫 杨银凤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期760-767,共8页
选用益生枯草芽孢杆菌研究其对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素表达的调节作用。首先,在体外成功培养绵羊瘤胃上皮细胞,然后用枯草芽孢杆菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞进行不同浓度、不同时间的刺激,利用荧光定量PCR技术(Real-ti... 选用益生枯草芽孢杆菌研究其对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素表达的调节作用。首先,在体外成功培养绵羊瘤胃上皮细胞,然后用枯草芽孢杆菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞进行不同浓度、不同时间的刺激,利用荧光定量PCR技术(Real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)从mRNA水平检测刺激后上皮细胞中绵羊β-防御素-1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)基因表达水平的差异。结果表明:当菌液浓度为1010 cfu·mL-1刺激上皮细胞8h后,SBD-1的表达量达到最高;不同的菌液浓度诱导下SBD-1的表达量均有显著增加,109、1010、1011 cfu·mL-1菌液浓度刺激下,SBD-1的表达量与空白相比差异极显著(P<0.01)。结果表明,枯草芽孢杆菌能够诱导绵羊瘤胃上皮细胞内SBD-1基因的表达。 展开更多
关键词 β-防御素-1 瘤胃上皮细胞 枯草芽孢杆菌 荧光定量PCR
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