枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis (Cohen))B-903菌株抗菌物质对植物病原真菌的抑制作用

作者从郑州苹果园中分离到枯草芽孢杆菌的一株强拮抗菌株。研究认为该菌株产生的抗菌物质对镰刀菌等12种病原真菌具有抑制作用,抑菌谱广。其抑菌机理主要是融解细胞壁,造成原生质泄漏,同时也使孢子和菌丝畸形。田间小区试验证明,以B-903培养滤液浸种可有效防治棉炭疽病等棉苗病害,并促进棉苗生长发育;果园喷雾防治苹果轮纹病和叶斑病的效果相当或优于化学药剂。

枯草芽孢菌株TL2对茶轮斑病的防病机制

枯草芽孢菌株(Bacillus subtilis)TL2能产生多种外分泌抗菌蛋白,抑制茶轮斑病菌(Pestallozzia theae)的菌丝生长及其分生孢子的形成和萌发。另外,菌株TL2通过改变茶树体内活性氧代谢相关酶系如SOD等的活性,以调节茶树受轮斑病菌侵染后活性氧的代谢平衡,同时诱导茶树产生抗性酶系如PAL和β-1,3-葡聚糖酶,以限制茶树轮斑病菌的扩展。

小麦赤霉病的生物防治研究 Ⅲ .拮抗芽孢杆菌B4、B6菌株的防病机制

枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)B4和B6菌株对小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)的作用机制主要是通过产生抗生代谢产物抑制病菌的孢子萌发和菌丝生长。抗菌物质无挥发性,主要为脂溶性和水溶物质。通过硫酸铵盐析和SDS-PGE分析,抗菌蛋白是重要的抗菌物质,蛋白组分的分子量范围在20～63kD之间。最适于两菌株产生抗菌物质的条件是:YSP培养基、pH7 0、28℃和充足的氧。产生抗菌活性物质的高峰期,分别是在培养72h(B6菌株)和96h(B4菌株)。抗菌物质在酸性和中性条件下对热稳定,在碱性条件下则不稳定。

小麦内生枯草芽孢杆菌E1R-j胞外抗菌蛋白的分离纯化和性质

通过（NH4）2SO4分级沉淀、疏水层析、PAGE切胶电洗脱、阴离子交换层析从E1R-j发酵滤液中分离纯化得到抗菌蛋白j1。经测定,j1分子量为51.9 kDa,等电点为8.7。j1不能催化昆布多糖、壳聚糖、羧甲基纤维素的水解;但能催化酪蛋白水解,其相对蛋白酶活性为384.67 U/mL。j1对蛋白酶K不敏感,具有很好的热稳定性（121℃）,在pH 5-9范围内表现稳定。对供试的5种病原真菌,j1仅对小麦全蚀病菌和苹果轮纹病菌有抑制作用。其中,对小麦全蚀菌的抑制中浓度IC50为0.14μg/mL。

三七连作田根腐病复合症综合治理措施与效果

以土壤熏蒸剂、枯草芽孢杆菌、选择性杀菌剂复配剂处理种苗和根围土壤为主要方法，对连作田三七根腐病复合症进行了综合治理试验。结果表明：（1）大扫灭（98％含量，30～40g/m^2剂量）、钾-威百（35％含量，40-60g／m^2剂量）和氰氨化钙（60-90g／m^2剂量）对三七连茬病土进行熏蒸处理后，真菌、杂草、细菌和线虫灭生效果达90％-99％，1年生与2年生三七成苗率显著提高，生长季前期3个月内根腐病复合症发病率明显降低，其中大扫灭灭生效果突出。（2）土壤熏蒸后，用G3菌剂（枯草芽孢杆菌）与单杀菌剂农利灵、噻菌灵和扑海因组合播前拌种和移苗前沾根处理，其中以菌剂与农利灵组合最好，噻菌灵和扑海因组合次之。枯草芽孢杆菌G3菌剂（2×10^10／cfu／g用量3kg／100m^2）单独施用，在田间温度低于15℃条件下无明显防效。（3）熏蒸＋G3＋化学杀菌剂复配剂1或2播种前拌种和移栽前沾根处理组合试验防效最好。

枯草芽孢杆菌G_3防治植病盆栽试验

产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌剂在盆栽试验中对菜豆苗期炭疽病和茄子苗期菌核病有一定的防治作用 ,其防治效果分别为 35 .4 %和 6 4.1% ;对番茄叶霉有良好的防治作用 ,药后3d和 7d的防效分别为 78.8%和 89.7%。另外 。

枯草芽孢杆菌B-903菌株的研究 Ⅰ.对植物病原菌的抑制作用和防治试验

本文报道枯草芽孢杆菌Ｂ－９０３菌株对棉枯萎等多种土传镰刀菌和苹果轮纹病等的抑菌活性。电镜和光学镜观察证实，该菌抗菌物质可造成病菌细胞畸形，胞内物质外泄和细胞壁崩溃。盆栽和田间试验，证明以Ｂ－９０３ 菌液浸种可显著降低棉炭疽病等棉苗病害和菠菜枯萎病的苗期发病率，防治效果分别为５１．６７％ ～６９．４４％ 和６８．１％ ～７６．２％ 。果园喷雾可使苹果轮纹病和叶斑病的防效相当于化学药剂处理，以Ｂ－９０３菌液３０～６０ 倍稀释液浸果可使贮藏期１５天和３０天的烂果率比清水对照降低５０％ 以上。

马铃薯疮痂病菌拮抗菌ZWQ-1的鉴定及防效测定

为探明马铃薯疮痂病菌拮抗菌ZWQ-1的生物学分类地位和防病效果,结合其生物学特性和16SrDNA序列特征对菌株ZWQ-1进行了鉴定,利用纸碟法和温室盆栽接种试验测定了该菌的抑菌活性及其对马铃薯疮痂病的防效。结果表明,该菌的形态和生理生化特征与枯草芽孢杆菌一致,其16SrDNA序列与枯草芽孢杆菌菌株JQ398853、JN399219的同源性高达99%,因此,将其鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。盆栽接种防病测试结果表明,拮抗菌ZWQ-1可显著降低马铃薯疮痂病的发病程度,对病原菌CPS-1、SHXHZ-3、CPS-3、CPS-2和NM-10的防治效果较为明显,防效分别为79.09%、78.85%、77.44%、54.68%和49.68%,说明拮抗菌株ZWQ-1对马铃薯疮痂病具有较好的防治作用。此外,该菌对其他18种植物病原菌也有一定的抑菌作用,说明菌株ZWQ-1是一株较具开发潜力的生防菌株。

枯草芽孢杆菌对植物病害生物防治的作用机理

枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌中具有应用潜力的菌种之一。近年来国内外对于芽孢杆菌应用方面的研究日益增多,枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。综述了枯草芽孢杆菌对植物病害生物防治的作用机理研究进展,阐述了枯草芽孢杆菌防控植物病害的作用机制,包括竞争作用、抗菌物质的产生及种类、拮抗作用、促进植物生长及诱导植物产生抗性等的研究进展。

GFP标记的植物促生菌B96-Ⅱ-gfp的定殖能力研究

采用绿色荧光蛋白基因标记技术研究了植物促生菌B96-Ⅱ的标记菌B96-Ⅱ-gfp在盆栽黄瓜土壤中的时间、空间定殖动态以及在黄瓜植株上的分布。研究表明:B96-Ⅱ-gfp在土壤中具有持久的定殖能力,接种180d时在自然土和黄瓜枯萎菌病土中的定殖数量分别为2.7×104cfu·g-1和6.6×104cfu·g-1,360d时在土壤中仍可检测到B96-Ⅱ-gfp的存在。B96-Ⅱ-gfp可在盆栽植株生长土壤的表层(0～4cm)、中层(4～8cm)和底层(8～12cm)定殖,定殖数量随土壤深度的增加而增加。此外,B96-Ⅱ-gfp还可在黄瓜的根、茎和叶上定殖,根部定殖的数量(7.2×104cfu·g-1)显著高于茎部和叶部定殖的数量;黄瓜植株体内定殖的数量多于体表定殖的数量。对土壤中可培养的3大微生物类群影响的研究表明:B96-Ⅱ-gfp对土壤中真菌数量具有显著抑制作用,而对细菌和放线菌数量则没有明显影响。防病促生试验表明:B96-Ⅱ-gfp可增加黄瓜株高、鲜重和干重,对黄瓜枯萎病有一定的防治效果,且与未标记菌株B96-Ⅱ的防病促生作用无显著差异。

枯草芽孢杆菌A014菌株防治小麦赤霉病的初步研究

室内平皿抑菌作用测定、盆栽和田间小区试验初步结果表明:枯草芽孢杆菌菌株A014对小麦赤霉菌有较强的抑菌作用,并有一定的防病效果,使病菌侵染率降低50.6％,能较好地保护麦穗不受病菌侵染或限制穗部病菌的扩展。

芽孢杆菌JPC-2的营养竞争测定及其对小麦根部病害的防治效果

对营养竞争拮抗测定方法进行了改进,对接法将芽孢杆菌JPC-2与小麦纹枯病菌接种于大豆麦麸(SWB)培养基上,JPC-2可在SWB培养基上迅速扩展并完全抑制小麦纹枯病菌的菌丝生长。田间试验表明,芽孢杆菌JPC-2液体菌剂(107cfu/mL,1∶100)处理种子对小麦纹枯病的冬前期防效高于扬花期防效,防治效果为61.9%,高于3%苯醚甲环唑包衣处理(用量为种子质量的0.3%);对小麦根腐病的防治效果可达46.8%,与空白对照差异显著(p<0.05);并使小麦增产73.5%,高于3%苯醚甲环唑种衣剂。芽孢杆菌JPC-2固体菌剂(106cfu/mL,225kg/hm2)沟施于土壤,再播种液体菌剂包衣(107cfu/mL,药种比1∶30)的小麦种子,对小麦纹枯病菌的冬前期防效为68.9%,扬花期防效为59.7%,小麦增产38.9%,与0.2%戊唑醇种衣剂(1∶50)增产效果相当。

小麦纹枯病生防菌株的筛选及小区试验

从小麦根系获得1株对小麦纹枯病菌和另外6种病原真菌和3种病原细菌有显著抑制活性的菌株B_3(Bacillus sp.)。在NA平板上,不同方法测得B_3对小麦纹枯病菌的生长抑制率为73.3～99.5％。PDA培养基中加入12.5％B_3无细胞培养滤液时,纹枯病菌的菌丝生长减少80％以上。种子处理后B_3能在小麦根系及地面以下茎杆和叶鞘组织中定殖。B_3培养液在1:10～1:10000浓度下可提高小麦发芽率5.7～21.7％,并增加根和芽的生长,提高根/芽比。在盆钵及小区试验中,B_3粉剂种子处理后小麦出苗快而齐,幼苗生长茁壮。在人工接种病菌的灭菌土和自然土盆钵中,防病效果分别为30.1％和49.4％。小区试验以B_3粉剂拌种拔节期平均防效62％。处理比对照增加有效穗6.6％,千粒重增加0.92克,增加小麦产量13.7％。

农作物重要病原菌颉颃菌的筛选

从全国6省12个地区的26种植物根围采集到土壤样本50份。经室内分离、纯化后得到以芽孢杆菌为主的细菌菌株226个。以水稻、小麦和棉花等6种农作物上主要病原菌(8种真菌,4种细菌)为指示菌对这226个菌株进行平板双培养法抑菌测定,分别筛选到至少对1种病原真菌或细菌有颉颃活性的菌株95个和78个。对进一步研制防治不同作物病害的生物制剂建立了一个颉颃菌资源库。

枯草芽孢杆菌TG26防病增产效应的研究

枯草芽孢杆菌TG26分离自丝瓜根部土壤,对多种植物病原菌有强烈抑菌活性。在小麦感病品种盆栽试验中,对小麦赤霉病的防效为82.25～89.80％;浸根处理对西瓜枯萎病和烟草青枯病的苗期防效可达100％。田间小区试验结果,该菌剂对小麦赤霉病、西瓜枯萎病和烟草青枯病的防效分别为76.4％、73.1％和79.6％,并有明显的增产效应。其分泌的抗菌蛋白对植物病原菌有很强的抑菌作用。

小麦全蚀病菌拮抗菌株FY1的筛选和鉴定

为了获得针对小麦全蚀病的优质生防资源,从河南省不同地区的土壤中分离到150株细菌菌株,经过平板对峙法测定,筛选出3株对小麦全蚀病菌具有较强拮抗作用的菌株,其中菌株FY1的拮抗活性最强,相对抑菌率达59.0%。盆栽接种防病测试结果表明,该菌株可显著降低小麦全蚀病的发病程度,防治效果为72.45%,与目前常用的化学药剂全蚀净的防治效果(79.04%)相当。显微镜下观察发现,被抑制的全蚀病菌菌丝呈现畸形,顶端膨大,并有原生质外渗现象。经过形态观察、生理生化试验和16SrDNA序列分析,初步鉴定FY1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

丙硫菌唑纳米水性化制剂对小麦赤霉病的防治效果

基于纳米分散技术,研制出丙硫菌唑纳米水性化制剂并开展了小麦赤霉病田间药效试验。结果表明,8%丙硫菌唑ME的防效达89.79%,显著优于对照药剂80%多菌灵WP的73.44%和70%甲基硫菌灵WP的74.29%;12%丙硫·戊唑醇ME防效达89.23%,优于对照药剂20%氰烯·戊唑醇SC的83.01%和40%丙硫·戊唑醇SC的81.94%,显著优于对照药剂30%吡唑·戊唑醇SC的76.91%和40%咪鲜胺·戊唑醇的66.99%;均为纳米水性化制剂时,12%丙硫·戊唑醇ME防效达94.54%,仍显著优于12%肟菌酯·戊唑醇ME的85.63%和12%咪鲜胺·戊唑醇ME的82.80%。由此可知,丙硫菌唑纳米水性化制剂对小麦赤霉病的防效均相对最佳,可作为植保无人机药剂在小麦赤霉病防治上推广应用。

枯草芽孢杆菌OLR3-9对拟石莲属多肉植物黑腐病的生防效果

由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的黑腐病是拟石莲属(Echeveria)多肉植物生产和家庭种植中的重要病害.为控制该病害,研究从长雄野生稻(Oryza longistaminata)根部分离并鉴定出一株内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)OLR3-9菌株.通过体外抑菌活性、温室防效和定殖情况的测定,结果表明,OLR3-9菌株对2种拟石莲属多肉植物品种‘血色罗密欧’(E.agavoides)和‘静夜’(E.derenbergii)的黑腐病具有较好的生物防治效果.该菌株对‘血色罗密欧’和‘静夜’黑腐病的病菌菌丝抑制率分别为63.45%和66.60%,菌体抑制率分别达到78.74%和76.45%,在盆栽条件下的防治效果分别为65.55%和73.13%.与该生防菌拮抗互作后,2种拟石莲属多肉植物黑腐病菌菌丝畸形,产孢量减少,并能在2种拟石莲属多肉植物的根、茎和叶部组织稳定定殖,阻止黑腐病病菌的侵入与蔓延.因此,枯草芽孢杆菌OLR3-9菌株对拟石莲属多肉植物黑腐病具有良好防效,是一株具有良好开发潜力的生防菌.