枯草芽孢杆菌Zj016脱苦氨肽酶的发酵控制策略

目的:研究枯草芽孢杆菌Zj016脱苦氨肽酶发酵生产的放大条件,提高产酶水平,为其工业化生产创造条件;初步研究此菌株所产蛋白酶的酶系,也为它在大豆分离蛋白水解工艺中表现出的显著脱苦效果提供了依据。方法:以摇瓶上优化好的氨肽酶发酵条件为基础,在7L自控式发酵罐上进行放大实验,通过控制溶氧条件、补料和原料的预处理等发酵控制策略提高发酵的产酶水平。结果:当控制最低溶氧为60%和原料的预处理,氨肽酶的最大酶活值可达到3900U/mL。结论:通过发酵条件的优化和初步控制,为此脱苦氨肽酶的规模化生产创造良好的基础。

L-天冬酰胺酶的补料分批发酵

L-天冬酰胺酶(L-Asparaginase,EC 3.5.1.1,L-ASNase)广泛应用于食品和医药领域。为实现重组L-ASNase的高产,在3 L罐水平研究了搅拌转速与补料分批发酵条件对Bacillus subtilis/ASNΔ25/B2菌体生长与产酶的影响。通过优化确定补料分批发酵条件如下:发酵0~8 h搅拌转速:700 r/min;发酵8 h后搅拌转速:900 r/min;发酵16~28 h:恒速流加(18.75 mL/h)蔗糖(800 g/L),恒速流加(32 mL/h)酵母蛋白胨(200 g/L)和玉米浆(80 g/L)混合氮源。基于以上发酵条件,L-ASNase酶活在48 h可达到1413.6 U/mL,较分批发酵提高了66.2%,生产强度提高了24.6%。研究结果为重组L-ASNase工业化生产提供了基础数据。

1株耐盐枯草芽孢杆菌TGBio-1433发酵工艺优化

对1株耐盐枯草芽孢杆菌TGBio-1433培养基、培养条件进行了优化;为了获得更高的菌体浓度,还探索了枯草芽孢杆菌TGBio-1433补料分批发酵工艺。试验结果表明,最优培养基为：玉米粉10 g/L、豆粕粉20 g/L、葡萄糖15g/L、蛋白胨15 g/L、牛肉膏5 g/L、MgSO41 g/L、CaCO37 g/L。最优培养条件为：起始pH 7.0-7.5,发酵温度35℃,培养时间18-20 h,接种量5%补料分批发酵工艺为：发酵16 h后,一次性补加碳、氮源（葡萄糖∶蛋白胨∶牛肉膏=3∶3∶1）总量的15%。枯草芽孢杆菌TGBio-1433发酵液活菌数由最初的24.2×10^8cfu/m L提高到136.1×10^8cfu/mL。

暹罗芽孢杆菌高产γ-聚谷氨酸的发酵条件优化

【背景】γ-聚谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)产生菌多为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)等,而暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)相关研究较少。【目的】研究暹罗芽孢杆菌产γ-PGA的液体发酵条件。【方法】以自行分离的暹罗芽孢杆菌CAU83为出发菌株进行液体发酵,通过单因素试验和正交试验法研究了碳氮源、前体物质、发酵温度及pH对菌株生产γ-PGA的影响。【结果】经摇瓶优化,γ-PGA的最适碳源、氮源和前体物质分别为乳糖30 g/L、酵母提取物5 g/L和L-谷氨酸钠60 g/L,最适培养条件为发酵温度37℃和pH 7.0,γ-PGA产量由8.4 g/L提升至30.1 g/L,比优化前提高了260%。经分批补料发酵,60 h时γ-PGA产量最高为59.5 g/L,比摇瓶提高了98%,产率为0.99 g/(L·h)。所产γ-PGA分子量为3.8×106 Da,聚合度较高。【结论】确定了暹罗芽孢杆菌CAU83产γ-PGA的最适发酵条件,为该菌株的工业化生产和应用提供了依据。