苏云金素测定方法的研究

用黄色八叠球菌、金色微球菌、根癌农杆菌和萤光假单胞杆菌作指示菌，同时用家蝇幼虫作指示昆虫，对产苏云金素的４株苏云金杆菌发酵物的毒力进行了测定。结果表明，两种测定方法所获得的抑菌圈大小与校正死亡率成正相关，但微生物测定法要快速、省材。尤其是用黄色八叠球菌为指示菌的微生物测定法比用其它几种指示菌时所出现的抑菌圈要清晰、透明，容易测定。选用这一指示菌来测定苏云金杆菌所产的苏云金素是可行的。

应用高压液相色谱测定苏云金杆菌发酵液中的苏云金素

通过正交试验将测定苏云金素所用的HPLC流动相确定为:0.075M磷酸二氢钾水溶液,加1％甲醇并用磷酸调pH至2.5。所选定的色谱条件可保证苏云金素的分离度为100％。苏云金素浓度从0.6μg/ml至900μg/ml,其峰面积与素的含量之间呈很好的直线关系。苏云金素的最低检出量为2.25×10^(-3)ng。用发酵样品进行测定,不同浓度素的峰面积对数与生测的试虫死亡机率值之间的相关系数为0.998。以HPLC法和昆虫生测法同时测定结果各重复间的变异系数(C.V.)为0.2～1.5％,测出浓度与实际浓度的平均不符合率为2.4％;昆虫生测法的测定结果各重复间的变异系数为14.6～16.2％,测出浓度与实际浓度的平均不符合率为17.0％。用这两种方法同时测定了3个苏云金素发酵样品中素的浓度,两种方法所得结果的平均符合率为86.84％。