Bacillus sp.SCSIO 15029中一种耐高温Mn-超氧化物歧化酶的克隆、表达及鉴定

本研究从南海沉积物中分离到一株耐高温菌Bacillus sp.SCSIO 15029,从其基因组中克隆了一个编码超氧化物歧化酶的基因BaSOD,并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了可溶性异源表达。随后,对重组BaSOD进行了酶学性质鉴定,BaSOD的最适p H为7.5,最适反应温度为40℃,酶活为5511.46U·mg–1。经鉴定,BaSOD是一种锰离子特异的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),该酶具有良好的热稳定性,在60℃处理30min酶活基本没有变化,在70℃下处理30min剩余酶活为71%,具有较好的工业应用前景。

高产超氧化物歧化酶菌株发酵条件的研究

从 1 348株芽孢杆菌 (Bacilluscereus)中分离和选育出高产超氧化物歧化酶 (Superoxidedismutase)菌株C32 8,并进行了产酶条件的研究。结果表明 ,该菌株最佳产酶的最适温度为 30～35℃ ,培养基最适起始 pH为 8.0～ 8.5。金属离子Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + ,表面活性剂吐温 80、司班80、琥珀酸钠和无机盐CaCl2 、CaCO3 对产酶有抑制作用。适宜浓度的K2 HPO4、EDTA、金属离子Fe3 + 和表面活性剂NaAC对产酶有明显的促进作用。发酵培养用 2 5 0mL三角瓶以 30mL装液量酶活力最高。适宜种龄为 8～ 1 2h ,适宜接种量为 0 .9%～ 3% ,最佳接种量为 1 %～ 2 %。