寄主转换对南亚果实蝇不同虫态主要酶活性的影响

【目的】探索取食罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffery]的南亚果实蝇[Bactrocera tau(Walker)]在寄主转换后不同虫态体内主要酶活性的变化,以期从生理生化角度解析南亚果实蝇的寄主适应机制,为南亚果实蝇的有效防控提供理论依据。【方法】以采集自罗汉果果园并在室内连续用罗汉果饲养2年的南亚果实蝇种群为试验材料,分别用南瓜、丝瓜、黄瓜和罗汉果4种寄主转接室内饲养的南亚果实蝇,对取食不同寄主后的南亚果实蝇5日龄幼虫、2日龄蛹和7日龄成虫体内抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)]、解毒酶[谷胱甘肽转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)]、消化酶[胃蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶(LPS)]和水解酶[海藻糖酶(THL)]活性进行测定。【结果】取食不同寄主的南亚果实蝇体内SOD活性均在成虫期显著高于其他虫态(P<0.05,下同);取食罗汉果的幼虫期和成虫期南亚果实蝇CAT活性显著高于取食其他寄主处理,且取食不同寄主的南亚果实蝇CAT活性在成虫期低于(除取食南瓜的成虫期南亚果实蝇CAT活性稍高于蛹期外)或显著低于其他虫态。各虫态取食罗汉果的南亚果实蝇GST活性均高于或显著高于同龄期取食其他寄主处理,取食不同寄主的南亚果实蝇GST活性均在成虫期显著低于其他虫态;取食罗汉果的幼虫期和蛹期南亚果实蝇CarE活性高于或显著高于取食其他寄主处理。同一虫态,取食罗汉果的南亚果实蝇α-淀粉酶活性均高于或显著高于取食其他寄主处理;取食南瓜的幼虫期南亚果实蝇LPS活性高于其他寄主和虫态;成虫期取食不同寄主的南亚果实蝇THL活性差异显著,其中取食南瓜的南亚果实蝇THL活性显著高于取食其他寄主处理,取食罗汉果的南亚果实蝇THL活性则显著低于取食其他寄主处理。【结论】南亚果实蝇对罗汉果的适应性更高,与南瓜、丝瓜和黄瓜相比,罗汉果更适合南亚果实蝇生长发育。

寄主植物对南亚果实蝇过冷却点和体液冰点的影响

南亚果实蝇Zeugodacus tau(Walker)是一种世界性的重要检疫害虫,严重危害多种水果和瓜菜。为明确寄主植物对南亚果实蝇耐寒性的影响,本文利用过冷却点仪,对取食苦瓜Momordica charantia L.、黄瓜Cucumis sativus L.、丝瓜Luffa aegyptiaca Miller和杧果Mangifera indica L.的南亚果实蝇5个发育阶段的过冷却点和体液冰点进行了测定。结果显示:每一组寄主植物上的5个发育阶段中,南亚果实蝇5日龄蛹的过冷却点和体液冰点均为最低,显著低于1日龄蛹、幼虫和成虫;不同寄主南亚果实蝇同一发育阶段的过冷却点和体液冰点存在显著差异,均值分别为-23.97~-8.06℃和-14.02~-0.59℃,其中取食苦瓜的南亚果实蝇5日龄蛹过冷却点和体液冰点最低,均值分别为-23.97℃和-14.02℃,但与黄瓜无显著差异;4种寄主中老熟幼虫、1日龄蛹、1日龄雌成虫和5日龄雌成虫过冷却点均为取食黄瓜最低;杧果种群1日龄雌成虫过冷却点最高,均值为-7.47℃,苦瓜种群老熟幼虫体液冰点最高,均值为-0.59℃。本研究有助于了解寄主对南亚果实蝇耐寒力的影响,这对其越冬种群动态监测及防控具有重要指导意义。

瓜实蝇与南亚实蝇产卵选择性及种间竞争研究

【目的】为探明瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)与南亚实蝇Bactrocera.tau(Walker)对不同寄主的产卵选择性及2种实蝇的种间竞争。【方法】2015年在实验室条件下选择黄瓜、佛手瓜、丝瓜、番茄、南瓜、西葫芦、苦瓜7种寄主果实,进行2种实蝇的产卵选择性研究;选择黄瓜、西葫芦、南瓜3种寄主果实,进行2种实蝇种间竞争研究。【结果】在不同寄主果实上2种实蝇的产卵选择性有所差异,瓜实蝇在完好寄主上的产卵量为黄瓜>苦瓜>丝瓜>西葫芦>佛手瓜>番茄和南瓜,在去果皮寄主上的产卵量为南瓜>黄瓜>苦瓜>西葫芦>丝瓜>佛手瓜>番茄;南亚实蝇在完好寄主上的产卵量为西葫芦>丝瓜>黄瓜>苦瓜>佛手>番茄和南瓜,在去果皮上的产卵量为西葫芦>南瓜>丝瓜>苦瓜>黄瓜>佛手瓜>番茄。瓜实蝇和南亚实蝇在不同寄主、不同密度条件下,其竞争性存在差异,低密度时,2种实蝇子代羽化虫量差异均不显著(P>0.05);当瓜实蝇与南亚实蝇的密度为8∶8时,取食黄瓜的瓜实蝇子代羽化数量显著高于南亚实蝇(P<0.05),取食西葫芦和南瓜的南亚实蝇子代羽化数量均显著高于瓜实蝇(P<0.05)。【结论】在实验条件下,不同寄主果实和寄主果皮完好与否,瓜实蝇与南亚实蝇的产卵选择性均存在差异;南亚实蝇的竞争能力较强于瓜实蝇。

3种实蝇对甲基丁香酚和诱蝇酮的触角电位反应

采用电生理方法,在测定不同时段和不同日龄的橘小实蝇对甲基丁香酚(ME)触角电位(EAG)反应的基础上,对橘小实蝇、瓜实蝇和南亚实蝇对ME和诱蝇酮(CUE)的EAG反应进行了测定。结果显示,橘小实蝇雌雄虫对ME的EAG反应存在时段差异,且在12:00-17:00时段差异较小;橘小实蝇雌雄虫从1日龄开始就对ME产生较强的EAG反应,但交配后迅速减弱。橘小实蝇、瓜实蝇、南亚实蝇对ME的EAG反应都强于CUE,且瓜实蝇和南亚实蝇雌虫对CUE的EAG反应高于雄虫。

诱剂监测南亚果实蝇在重庆的分布与发生动态

2005年5-10月份利用甲基丁香酚(M ethyleugenol)、诱蝇酮(Cuelure)和水解蛋白(Hydrolytic prote in)3种诱剂监测了重庆市26个区县共计130个点南亚果实蝇Bactrocera tau(W alker)的分布与发生动态。监测结果表明,在重庆市26个区县共诱集到南亚果实蝇68 525头,在各个诱集区县均有分布,其中合川、江津、涪陵、长寿区平均每个诱集点诱集的南亚果实蝇数量大,均在800头以上,是该虫发生严重的区县,城口、渝北、南川、黔江、武隆、永川区平均每个诱集点诱集南亚果实蝇数量小,均不足30头,是该虫发生较轻的区县。除涪陵区外,其他区县在7-9月份出现1个虫口高峰期,涪陵区出现2个虫口高峰期,分别在7月份和9月份。对3种诱剂诱集数量统计分析发现,不同诱剂每个监测点诱集的南亚果实蝇平均数量无显著性差异,从诱集南亚果实蝇的雌雄比例来看,诱蝇醚、诱蝇酮诱剂对南亚果实蝇雄成虫诱集效果好,对雌性个体诱集效果差,而水解蛋白诱剂对南亚果实蝇雌雄成虫均有较好的诱集效果。对6个南亚果实蝇发生数量较大区县的寄主作物分析发现,在其中5个区县中,丝瓜上的诱集数量明显大于其他寄主作物上的诱集数量,说明丝瓜比其他瓜类寄主作物更适合南亚果实蝇的取食选择。

南亚寡鬃实蝇的风险分析

本文根据国际粮农组织(FAO)风险分析的准则(IPPC),通过地理评估和管理标准、定殖及定殖后扩散的可能性、传入的可能性,危害性和防治的难度对对南瓜实蝇传入我国的风险进行,为制定我国针对性检疫措施提供资料依据。

首次发现沃尔巴克氏体Wolbachia对我国南亚果实蝇的感染现象

沃尔巴克氏体Wolbachia是广泛分布于节肢动物体生殖组织内的一类共生细菌,泰国等已发现Wolbachia感染南亚果实蝇Bactrocera(Zeugodacus)tau(Walker)的现象。利用沃尔巴克氏体wsp基因的1对通用引物(81F,691R)从我国南亚果实蝇的总DNA中扩增到1段500 bp左右的wsp基因片段,并克隆得到了Wolbachia相关序列,首次发现了沃尔巴克氏体对我国南亚果实蝇的感染现象。

不同食料对南亚实蝇生长发育及繁殖的影响

以丝瓜、黄瓜、南瓜、苦瓜、蜜橘和人工饲料为食料,在室内28℃恒温条件下,研究了6种食料对南亚实蝇幼虫和蛹的发育历期、体重、存活率及成虫繁殖力的影响。结果表明,取食不同食料对幼虫发育历期、存活率和每雌产卵量影响显著,对蛹存活率无显著影响。6种食料中,黄瓜为南亚实蝇最适食料,丝瓜、南瓜次之,人工饲料最不适宜。

南瓜实蝇防治药剂的筛选与田间防治效果

为南瓜实蝇[Bactrocera(Zeugodacus)tau(Walker)]提供应急药剂储备,测定了10种农药单剂对南瓜实蝇幼虫、蛹和成虫的活性,在此基础上筛选、评价了5种混配制剂对南瓜实蝇的活性,测定4种混剂对南瓜实蝇的田间防治效果。结果表明,新烟碱类药剂和Bt对南瓜实蝇的活性较低,有机磷类和微生物源杀虫剂活性较高;小区模拟试验15%阿维·毒死蜱EC和32%甲维盐·辛硫磷EC喷雾处理对甜瓜的保护效果略优于0.02%多杀霉素饵剂点喷投饵;大田试验32%甲维盐·辛硫磷EC 20 mg/L喷雾处理对西瓜田实蝇类昆虫有一定的防治作用,对西瓜的总体保护率达到50%。可见,甲维盐和辛硫磷混剂可进行进一步筛选优化研究以作为南瓜实蝇防治应急用药。

^(60)Co-γ射线辐照对南瓜实蝇的不育效果及对南瓜品质的影响

为研究^(60)Co-γ辐照处理对南瓜实蝇的影响及其对南瓜品质的影响,分别用不同剂量的^(60)Co-γ射线(150、250、300、350、400 Gy)处理不同龄期的南瓜实蝇(包括卵、1龄、3龄幼虫和蛹),观察在不同辐照剂量处理下,南瓜实蝇F1代的致死作用和不育作用;并用最高剂量400 Gy处理南瓜果实,探究对南瓜品质和生理的影响。采用250-350 Gy的^(60)Co-γ处理处于卵、1龄和3龄幼虫和蛹期的南瓜实蝇后,均可实现F1完全不育;以400 Gy处理处于各龄期的南瓜实蝇,均可实现F1完全致死。以400 Gy剂量辐照南瓜,其蛋白质、总糖、还原糖、维生素、淀粉以及可溶性固形物等主要营养成分与对照无明显差异,南瓜主要保护酶SOD和POD处理10 d内有上升,但10 d后会恢复至与对照无明显差异。结果表明^(60)Co-γ射线可在不影响南瓜品质的基础上,有效控制南瓜实蝇的存活率,作为南瓜实蝇的检疫处理措施值得进一步深入研究。

南亚实蝇转录组及嗅觉相关基因的初步分析

南亚实蝇Bactrocera tau(Walker),是葫芦科、茄科蔬菜和多种热带、亚热带果树上的主要害虫,抗逆性强,繁殖速度快,防治难度大。为挖掘可用于生物防治的分子靶标和探讨副信息素类引诱剂对其作用的分子基础,本研究采用Illumina HiSeq2500 PE125 bp测序技术对其混合样进行转录组测序和生物信息学分析。经序列拼接获得36109条Unigenes,进一步与七大公共数据库进行同源比对,注释了21127条Unigenes,其中在Nr数据库中注释成功的Unigenes数目最多,20948条。Nr数据库注释的南亚实蝇B.tau Unigenes与地中海实蝇Ceratitis capitata同源性最高,达59.80%;与模式昆虫黑腹果蝇Drosophila melanogaster的同源性次之,达14.86%。将Unigenes与GO数据库比对发现,14029条Unigenes根据功能分为了3个大类57个亚类;而与KOG数据库比对结果为,13479个Unigenes基因其功能属于25个类别;进一步KEGG数据库代谢分析表明,6442条Unigenes参与了5大类共152个代谢通路。基因注释进一步筛选鉴定获得了嗅觉相关基因528个,对其中气味结合蛋白基因氨基酸序列的分析表明,其大多为具有6个保守的半胱氨酸位点的典型气味结合蛋白,且与黑腹果蝇D.melanogaster、地中海实蝇C.Capicata、瓜实蝇B.cucuribitae、橘小实蝇B.dorsalis的气味结合蛋白基因具有很高的同源性。这为南亚实蝇对副信息素类引诱剂反应的相关功能基因的挖掘及从嗅觉上寻求科学的防治措施提供了基础数据。

南亚果实蝇各虫态发育历期及有效积温研究

【背景】南亚果实蝇是世界性的检疫性害虫,在我国多个省市发生为害,对瓜果作物造成了严重的经济损失。【方法】采用人工恒温饲养方法,分别设置10、14、18、22、26、30、34℃7个恒温条件,测定不同温度条件下南亚果实蝇卵、幼虫和蛹的生长发育历期,并推算出相应的发育起点温度和有效积温。【结果】南亚果实蝇卵、幼虫和蛹的发育起点温度分别为7.36、2.43、7.64℃,卵期、幼虫期和蛹期的有效积温分别为20.21、187.69和156.65日度。完成整个世代的发育起点温度是7.64℃,有效积温为364.55日度。当温度达到34℃时,卵的发育历期相对延长,而蛹则不能正常发育,无法羽化为成虫。【结论与意义】在10～30℃,南亚果实蝇的卵、幼虫和蛹的发育历期随温度升高而缩短,各虫态的发育速率和温度呈显著正相关;在26和30℃下,卵、幼虫和蛹的发育历期均显著短于其他各处理温度的发育历期。该试验结果为了解南亚果实蝇的发育温度极限和进一步开展该害虫的适生性分析提供了基础信息,进而为制定该虫的检疫措施提供依据。

南亚实蝇气味结合蛋白家族基因的筛选及克隆验证

为初步了解南亚实蝇对引诱剂的感受机制,笔者基于南亚实蝇转录组数据进行了气味结合蛋白(odorant-binding protein,简称OBP)家族基因的筛选和克隆验证.共筛选出OBP s基因32条,成功克隆出26条,对其编码蛋白的结构分析表明,典型OBPs 21条,“Dimer”OBPs 1条,Minus-OBPs、“Plus-C”OBPs各2条.碱基序列分析和蛋白进化分析表明,这26条基因与瓜实蝇OBP s高度相似,其编码的蛋白质与瓜实蝇亲缘关系最近,有16条与瓜实蝇聚类数值达90以上.这为下一步南亚实蝇OBPs高级结构和功能的研究提供了基础数据,也为实蝇引诱机制的探讨提供了理论依据.

利用物种特异性PCR技术快速鉴定南瓜实蝇

【目的】快速鉴定我国进境植物检疫性害虫南瓜实蝇Bactrocera tau(Walker),防止该虫传入扩散。【方法】基于物种特异性PCR(SS-PCR)技术,选取20种形态近似的常见实蝇,将南瓜实蝇作为阳性对照,提取基因组DNA模板,选用mt DNA COⅠ序列,检查同源系列,设计筛选1对可快速准确鉴定南瓜实蝇的种特异性引物NF404和NR610,并进行PCR检测和验证,建立一种利用种特异性引物的快速鉴定方法。【结果】南瓜实蝇在207 bp的位置扩增出一条清晰且单一的目标条带,其余果实蝇未见条带。将截获的南瓜实蝇与其同亚属的近缘种具条实蝇、瓜实蝇的不同虫态和成虫部分虫体组织的虫样,采用本实验室建立的SS-PCR鉴定方法进行验证,结果一致。【结论】建立的南瓜实蝇的SS-PCR鉴定方法种特异性和稳定性强,能快速鉴定目标种类,解决口岸进境果蔬中截获实蝇幼虫、蛹等不同虫态和残体难于快速鉴定问题。

湖北武汉果实蝇害虫种群动态调查

为了解华中区域果实蝇害虫的发生规律和气候因子影响,以武汉市南湖地区的华中农业大学校内果园和湖北省农业科学院经济作物研究所内蔬菜基地为调查地点,于2016年4月-2017年4月使用诱蝇醚和诱蝇酮为性引诱剂开展了诱捕调查,并结合华中农业大学当年的气象记录开展了气象因子分析。结果发现,果园和蔬菜基地内诱捕的果实蝇种类为南亚果实蝇和橘小实蝇,不同调查点的种群动态模式基本一致。南亚果实蝇于5-6月初开始出现,7-8月初达到第1个高峰期,随后呈现锐减趋势,并于9月下旬-10月出现第2个小高峰(梨园和蔬菜基地除外);而橘小实蝇主要于6月下旬之后开始出现,8月下旬-9月上旬达到高峰期,且未出现第2个小高峰(橘园除外);表明这2种果实蝇的发生呈现明显的错峰现象。通过相关性和主成分统计分析,推测气温条件(包括平均气温、平均最低温、平均最高温)和平均日照时数为影响果实蝇种群动态的关键气候因子。

南亚实蝇幼虫人工饲料研究

以组成为麦麸800g、蔗糖300g、啤酒废酵母150g、饲料添加剂6.5g和水1.5L的人工饲料连续饲养南亚实蝇3代,与丝瓜饲养对照,研究人工饲料对南亚实蝇生长发育的影响。结果表明,F1蛹重与对照差异极显著,F2、F3则无显著差异,卵孵化率、幼虫存活率、羽化率和飞出率与对照相比无显著差异,说明该人工饲料能充分满足南亚实蝇生长发育所需。

空气和土壤湿度对南瓜实蝇存活的影响

采用室内湿度配比的方法研究了空气和土壤湿度对南瓜实蝇存活的影响,结果表明土壤相对含水量和空气湿度等有关湿度方面的条件对南瓜实蝇蛹的羽化和成虫的存活有显著影响.相对含水量在20﹪-60﹪之间蛹的羽化率较高,当土壤相对含水量达到100﹪时,南瓜实蝇蛹不能羽化.1日龄蛹经干燥处理8d后羽化率降低至28.89﹪.空气湿度对成虫存活也有显著影响,随着干旱和高湿胁迫时间的延长,成虫的死亡速率逐渐加快,但是干旱条件下的抑制效果更显著.

武汉南湖地区南亚果实蝇种群动态

[目的]了解湖北省武汉南湖地区南亚果实蝇的种群动态和发生情况。[方法]以武汉市南湖地区的华中农业大学校内蔬菜基地和果树林为调查地点,于2016年4月—2017年4月使用诱蝇酮为性引诱剂的果实蝇诱捕器开展诱捕调查,并结合武汉市气象因子对实蝇种群动态的影响进行评估。[结果]华中农业大学内蔬菜基地和果树林的南亚果实蝇种群动态模式基本一致。南亚果实蝇于4月下旬之后出现,6—8月中旬为发生盛期,且主要呈单高峰特点,于11月后不再诱捕获得。相关性和主成分统计分析结果表明,气温条件(平均气温、平均最高温、平均最低温)和平均水气压为影响果实蝇种群动态的关键气候因子。[结论]该研究首次报道了武汉南湖地区南亚果实蝇的周年发生动态,有助于了解武汉乃至湖北的南亚果实蝇发生规律,为该害虫的防治提供理论依据。

南亚果实蝇国内研究进展

南亚果实蝇是一种世界性检疫害虫,可危害80多种蔬菜和水果。作者综述了南亚果实蝇的研究概况,包括为害与分布、形态特征、生物学、生态学、分子生物学和防治等内容,并对南亚果实蝇的综合防治进行了展望。

河南内乡重要经济作物实蝇种群动态分析

为了解河南省南阳市内乡县重要经济作物实蝇的种群动态和发生规律,于2016—2018年5月初至11月中旬使用诱蝇醚和诱蝇酮为性引诱剂对橘小实蝇(Bactrocera dorsalis Hendel)、南亚果实蝇(Zeugodacus tau Walker)和具条实蝇(Z.scutellata Hendel)的发生进行监测。结果发现,具条实蝇的诱集数量3年均为最高,但有逐年降低的趋势,南亚果实蝇数目也呈降低趋势,而橘小实蝇的数目则呈逐年升高的趋势。具条实蝇的高峰期出现在7月中下旬至9月底,其他2种实蝇的高峰期出现较晚,在8月中下旬至10月底。12月至翌年5月,3种实蝇均没有诱集到。通过相关性和主成分分析,推测平均气温、平均最低气温、平均最高气温和5 cm地温为影响河南内乡重要经济作物实蝇种群动态的关键因子。