瘤胫果实蝇线粒体全基因组分析与系统发育

【目的】明确瘤胫果实蝇[Bactrocera Bactrocera tuberculata(Bezzi)]线粒体全基因组序列特征,探究其系统发育地位,为瘤胫果实蝇分子标记、物种鉴定和进化遗传学研究提供参考依据。【方法】采用高通量测序技术对瘤胫果实蝇的线粒体全基因组进行测序、组装、拼接和注释,获得基因组全序列,并对基因组基本结构进行分析;选择NCBI公布的果实蝇属近缘种20种实蝇的线粒体全基因组序列,基于最大似然法(Maximum likelihood,ML)进行系统发育分析。【结果】瘤胫果实蝇线粒体基因组序列总长度为15854 bp;具37个基因,其中包含13个蛋白编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和1个非编码控制基因。瘤胫果实蝇线粒体基因组全序列A+T含量为73.2%;13个蛋白质编码基因共有密码子3755个,在蛋白质所有22种氨基酸密码子中,UUA(leucine)的使用频率N及相对密码子RSCU使用频率均最高,N(RSCU)为387(3.79);tRNA基因二级结构中,除苯丙氨酸(F)以及苏氨酸(T)缺少假尿嘧啶(T)环和丝氨酸(S1)缺少二氢尿嘧啶DHU环,其余19个tRNA基因均能折叠形成典型的三叶草二级结构,22个tRNA基因中,共存在178处碱基对错配,错配碱基对均为G-U。通过对其近缘种线粒体全基因组的系统发育分析,瘤胫果实蝇与桔小实蝇(Bactrocera dorsalis)和杨桃实蝇(Bactrocera carambolae)聚在一起,表明3种实蝇的亲缘关系较近,与果实蝇亚属的其他种类聚在同个分支上,结果与形态鉴定一致。【结论】首次报道了瘤胫果实蝇线粒体全基因组,GenBank登录号MW 892726,测定和分析的瘤胫果实蝇线粒体基本结构特征,核苷酸组成、系统进化分析,支持瘤胫果实蝇属于果实蝇亚属,为物种诊断、进化生物学和防治研究提供依据。

磷化氢和溴甲烷复合熏蒸红心火龙果携带番石榴实蝇技术研究

本文研究了磷化氢(PH3)和溴甲烷(MB)复合熏蒸对番石榴实蝇的毒力以及对红心火龙果采后品质的影响。结果表明,复合熏蒸方式下,各个浓度的磷化氢和溴甲烷均存在增效,当溴甲烷浓度为4 g/m^(3)时,复合熏蒸发挥最佳增效效果的磷化氢浓度为1.42 g/m^(3)。复合熏蒸番石榴实蝇仅需13.19 g/m^(3)的溴甲烷即可在95%置信区间下达到致死率99.996 8%。与对照相比,复合熏蒸对火龙果的外观和内部品质无显著影响,而与溴甲烷单独熏蒸相比,复合处理会显著降低呼吸强度并减少药害。因此,溴甲烷和磷化氢复合处理对番石榴实蝇具有协同效应,表明磷化氢和溴甲烷复合熏蒸有可能成为水果采后处理的一种新策略。

桔小实蝇和番石榴实蝇幼虫取食阶段的种内竞争

种内竞争是实蝇的重要生态学特性。本文研究比较了近缘种桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)和番石榴实蝇B.correcta(Bezzi)在幼虫人工饲料中种内竞争的密度效应。研究结果显示,桔小实蝇和番石榴实蝇都有密度过低效应,均表现出发育历期较长、蛹较轻和成活率较低;结合蛹重和成活率两个重要参数指标,明确了桔小实蝇和番石榴实蝇的最宜密度均在5-20头虫/10 g饲料;不同生长参数之间的变化均有一定的正负相关性。当种群密度超过最宜密度,桔小实蝇和番石榴实蝇均有明显的种内竞争现象,随着种群密度的升高,种内竞争越激烈。其主要表现为化蛹率和羽化率不断下降、幼虫历期逐渐缩短、蛹历期不断延长和蛹逐渐变小;当100头虫/10 g饲料时,桔小实蝇和番石榴实蝇成活率从86.00%±4.2688%和86.00%±4.1096%分别下降到60.08%±2.5166%和76.33%±2.2333%。桔小实蝇和番石榴实蝇的种内竞争的密度效应极具相似性,推测这两种实蝇有类似的种群调节机制,但番石榴实蝇的幼虫比桔小实蝇的拥有更强的抗拥挤能力。

桃园橘小实蝇种群结构与发生危害调查

【目的】橘小实蝇是一种危害严重的蛀果类害虫,近年来在我国桃园有加重发生危害的趋势。弄清我国不同桃产区橘小实蝇种群发生规律,为制定有效的预警和综合防控措施提供参考依据。【方法】从2012年至2019年,利用橘小实蝇性诱剂连续在我国主要桃产区的17个桃园开展了桃园橘小实蝇发生情况的监测和调查,并对不同产区桃园实蝇标本进行了形态学和分子生物学鉴定分析。【结果】通过形态学和分子生物学鉴定分析,明确了北京、石家庄、南京、武汉、成都的实蝇标本为橘小实蝇,且石家庄种群与其他4个种群的遗传距离差距较大;郑州的实蝇标本则为橘小实蝇和番石榴实蝇的混合种群。全国17个桃园监测结果显示,桃主产区几乎均有橘小实蝇危害。【结论】北方桃园2012年开始发现橘小实蝇危害,但发生时期和种群数量在各年份间有所差异,主要危害晚熟桃;南方桃园里橘小实蝇则是一种常发性害虫,对中晚熟桃的危害较大。

桔小实蝇与番石榴实蝇幼虫的种间竞争研究

本文研究了桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)与番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)幼虫在实验室2种环境温度,4种寄主及5个虫口数量比例条件下的种间竞争现象。结果显示,在温度26℃以桃和香蕉为寄主条件下,桔小实蝇存活率高于番石榴实蝇;以芒果为寄主情况下两者存活率差异不显著;以番石榴作为寄主,虫口数量较大的一方具有竞争优势。在温度33℃条件下,就所测试的各种寄主,番石榴实蝇均具有竞争优势。分析发现,温度是影响番石榴实蝇幼虫存活率的关键环境因素;虫口比例对于桔小实蝇的存活率有重要影响;在不同的寄主中,桔小实蝇与番石榴实蝇的存活率也表现出较大的变化,寄主种类与温度及虫量形成综合效应,决定了桔小实蝇与番石榴实蝇竞争的最终结局。

桔小实蝇和番石榴实蝇对6种寄主果实的产卵选择适应性

植食性昆虫对寄主植物的选择适应性是研究昆虫和植物协同进化关系的核心内容之一。评估寄主植物对植食性昆虫种群的适合度,需要综合分析昆虫对寄主的产卵选择性和寄主对昆虫的取食适合性。以桔小实蝇和番石榴实蝇为研究对象,分别测定了这两种实蝇对6种寄主果实:番石榴、香蕉、杨桃、木瓜、甜橙、番茄的产卵选择性以及幼虫取食后对其生长发育的影响。寄主产卵选择性实验分别采用完整寄主果实直接供试产卵和块状寄主果实气味引诱产卵两种处理方式;在生长发育适应性实验中,以幼虫和蛹的存活和生长发育等相关参数作为评价指标。实验结果表明,寄主的供试方式不同,两种实蝇的选择性均有明显差异;对寄主气味选择性强的寄主更适合于两种实蝇后代的生长发育。两种实蝇对6种寄主果实的产卵选择性和后代发育适合性两者相关性不显著,与许多文献报道单一地采用发育适合性(如发育历期、存活率或蛹重等)作为评价寄主选择性的结果不一致。两种实蝇之间对6种寄主果实的产卵选择和幼虫取食适合性既具相似性也具差异性,表明这两种实蝇在寄主生态位上既有重叠性又有分化性。

番石榴实蝇成虫对低温的耐受研究

温度是有害实蝇及其它各种昆虫进行生命活动的基本条件之一,已有研究表明温度也是影响番石榴实蝇种群变动以及发生分布的重要制约因素。番石榴实蝇成虫因其在低温条件下具有明显的"滞育"现象而被认为是适应低温不良环境的重要生活史阶段。针对番石榴实蝇这一生物学特点,本文研究了其成虫经过不同低温环境(0、3、6、9℃)处理1、3、6、12、24、48、72、96、120 h后的成活率。结果表明,在0℃条件下经过12 h后番石榴实蝇成虫存活率低于40%,24 h后成活率为0;在3℃环境条件下24 h以后成活率在60%以上,48 h后降至20%以下;6℃条件下48 h后仍有超过50%番石榴实蝇成虫存活,96 h后存活率为0;在9℃环境条件下经过72 h仍有80%成虫存活,120 h以后存活率为0。本研究对于了解番石榴实蝇生活史特点,掌握期中极端环境下的耐受能力,对全面评估其入侵扩散潜力具有重要参考价值。

番石榴实蝇成虫日活动规律及其危害寄主种类调查

利用甲基丁香酚引诱剂和采集落果等方式对番石榴实蝇[Bactrocera(Bactrocera)correcta(Bezzi)]成虫日活动规律及其危害寄主的种类进行了调查研究。结果表明,温湿度是影响番石榴实蝇日活动量的重要因素,在元江县番石榴园番石榴实蝇飞翔活动的高峰期出现在8:00时和17:00时,低谷期出现在12:00-15:00时,日间温湿度与其日活动量之间呈线性相关关系;元江县番石榴实蝇的寄主种类为10科15属17种,分别为桃金娘科、番荔枝科、漆树科、酢酱草科、芭蕉科和鼠李科各1种,葫芦科2种,蔷薇科、芸香科、茄科各3种。受害最严重的寄主种类是番石榴、杧果、阳桃,占寄主种类的17.64%。

PCR法检疫鉴定番石榴实蝇

利用mtDNA序列 ,设计出两对特异性引物 ,应用定性PCR技术检疫鉴定番石榴实蝇。本方法适用于成虫鉴定和未成熟虫态 (卵、幼虫、蛹 )的快速检疫鉴定。

桔小实蝇、木瓜实蝇和番石榴实蝇耐热性的热动力学分析

果实蝇属是重要的检疫性有害生物之一， 其中桔小实蝇Bactrocera dorsalis （Hendel）、 木瓜实蝇B. papayae Drew ＆ Hancock和番石榴实蝇B. correcta （Bezzi）近几年在口岸检出率居高。本研究利用热水浸泡处理法比较这3种实蝇的卵、 1龄幼虫和3龄幼虫在44~47℃下的耐热性， 利用热动力学模型和活化能比较每种实蝇的耐热虫态以确定耐热种。结果表明： 在测定温度范围内， 3种实蝇卵、 1龄幼虫和3龄幼虫的死亡率都与处理时间呈正相关。热动力学系数取0.5时， 最适合热动力学模型预测3种实蝇在各实验温度LT99.9968的致死时间。3种实蝇在44~47℃耐热性均为： 卵〉1龄幼虫〉3龄幼虫。番石榴实蝇在3种实蝇中最耐热。本研究结果为实蝇热处理指标的制定提供了实验依据。

不同塑膜袋的防虫效果及对番石榴果实品质的影响

以不同材质和厚度的塑料薄膜为材料,研究果实套袋对橘小实蝇、番石榴实蝇的防虫效果,以及对番石榴品质的影响。室内套袋试验结果表明,当PO、PE厚度≥20μm、PP厚度≥15μm时,橘小实蝇、番石榴实蝇雌虫产卵管不能穿透塑料薄膜而产卵在果实上;田间套袋试验结果表明,PO(20μm)和PE(20μm)套袋的果实均未检测到实蝇。套袋果实外观较未套袋果实好,30μm PP套袋的番石榴果实品质与未套袋果实无显著差异,PO(20μm)、PO(25μm)、PE(20μm)和PE(30μm)套袋的番石榴果实中可溶性固形物、可滴定酸、糖含量等较对照低。

球孢白僵菌Bb051230菌株对番石榴实蝇的毒力测定

利用球孢白僵菌Bb051230菌株不同孢子液浓度对番石榴实蝇成虫、幼虫和蛹进行毒力测定,结果表明:在4.0×108个/mL浓度下第8天成虫的累计校正死亡率为(89.66±5.34)%,致死中时间(LT50)(4.53±0.31)d,第8天的致死中浓度(LC50)为(2.687 2±0.325 8)×105个/mL;4.0×108个/mL浓度下第8天幼虫的累计校正死亡率为(91.83±4.02)%,致死中时间(LT50)(4.66±0.59)d,第8天的致死中浓度(LC50)为(2.329 7±0.418 5)×105个/mL;4.0×108个/mL浓度下第8天蛹的累计校正死亡率为(83.79±2.27)%,致死中时间(LT50)(4.89±0.44)d,第8天的致死中浓度(LC50)为(2.829 1±0.156 3)×105个/mL.

球孢白僵菌Bb070817菌株对番石榴实蝇的室内毒力

为研究球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb070817菌株对番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)的毒力效果,采用喷雾法和浸渍法以不同密度球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb070817菌株的分生孢子液处理番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)的成虫、幼虫和蛹,并分别测定对成虫、幼虫和蛹的室内毒力。结果表明,成虫的累积校正死亡率最高,为86.12%,其致死中时间(LT50)为4.66d,致死中密度(LCT50)为2.948 5×105 mL-1。幼虫的累积校正死亡率为88.42%,其LT50为4.47d,LCT50为2.769 5×105 mL-1。蛹的累积校正死亡率是83.91%,其LT50为5.16d,LCT50为3.155 7×105 mL-1,说明该菌株对番石榴实蝇具有较强的毒力。

贵州番石榴果实蝇防治技术研究初报

在调查番石榴果实蝇的发生规律、寄主的基础上进行药剂防治、诱杀剂诱杀、果实套袋试验,结果表明:喷施阿维菌素对防治番石榴果实蝇的效果较好;杀虫双1份、糖10份、酒10份、醋10份、水30份的诱杀剂诱杀番石榴果实蝇的效果较好;白色有黑色塑料薄膜内层双层纸袋套袋效果比较明显。

16s rDNA文库法分析番石榴果实蝇共生菌组成

[目的]探索分析番石榴果实蝇[Bactrocera correcta(Bezzi)]的共生菌组成,为进一步探索共生菌的生理功能以及与宿主的协同进化关系奠定基础。[方法]构建番石榴果实蝇室内种群共生菌的16srDNA文库,BLAST分析其共生菌的组成以及丰度。[结果]室内雄虫共生菌主要为Pseudomonas aeruginosa和Lactococcus lactis,雌虫共生菌主要为Enterobacter属的细菌。[结论]本研究结果证明番石榴果实蝇存在多种共生菌。

土壤含水量对番石榴实蝇蛹羽化的影响

土壤含水量对番石榴实蝇蛹羽化的影响试验结果表明：不同含水量的土壤对番石榴实蝇蛹的羽化率、羽化历期和羽化高峰期都有显著影响。当土壤含水量在20%-100%时,随土壤含水量的增加,羽化率逐渐降低并差异显著;当土壤含水量达到100%时,番石榴实蝇蛹都不能羽化。番石榴实蝇蛹在土壤含水量为10%-70%时,羽化高峰期在第13 d,土壤含水量为0、80%-90%时,羽化高峰期在第11 d。在相同含水量条件下,番石榴实蝇蛹在两种类型土壤中的发育历期无显著差异。

高温对番石榴实蝇不同虫态的致死效应研究

研究了高温下番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)各虫态的存活情况.结果表明,在高温条件下,番石榴实蝇各虫态随着试验温度升高和处理时间延长,死亡率显著升高.处理24.0 h卵、幼虫、蛹、成虫的亚致死高温区分别为43.0～44.0、44.0～45.0、38.1～42.3和38.2～43.8℃,致死高温区分别为45.0～46.0、>46.0、42.4～45.5和43.8～45.7℃.番石榴实蝇蛹、成虫死亡率(Y)与温度(X1)、处理时间(X2)之间的二次多项式方程分别为Y=828.63-45.22X1-11.45X2+0.616X21+0.300 4X1X2和Y=3 902.87-194.73X1-7.722X2+2.424X21+0.200 4X1X2.研究结果为该虫的检疫处理和风险预警等提供了科学依据.

高效氯氟氰菊酯亚致死浓度对番石榴实蝇代谢酶的影响

为了解高效氯氟氰菊酯亚致死浓度对番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)代谢酶的影响,采用药膜法测定了高效氯氟氰菊酯对番石榴实蝇不同种群的毒力及代谢酶活性.结果表明:经药剂选育15代后,种群抗性倍数为11.50,达到中等抗性.在LC10,LC25和LC50处理下,敏感种群的羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)显著提升(p<0.05),而抗性种群的CarE和GST无统计学意义.不同种群的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性无统计学意义.表明CarE和GST活性的提升与敏感种群的抗性发展有关.

基于荧光标记的两种实蝇在云南中南部的扩散迁移

分别于2004年和2014年5～7月在云南中南部的元江至昆明一线,对桔小实蝇和番石榴实蝇进行标记-释放-回收试验.以青龙厂为标放地,释放2 000头荧光标记桔小实蝇和番石榴实蝇,在距离释放点5 km的勐仰坝回收14头桔小实蝇和42头番石榴实蝇,青龙厂的桔小实蝇和番石榴实蝇可以沿通道走向向北到达勐仰坝.以元江坝为标放地,释放5 000头荧光标记桔小实蝇和番石榴实蝇,在17 km的青龙厂丫口回收70头桔小实蝇和20头番石榴实蝇,证明青龙厂所诱捕到的桔小实蝇和番石榴实蝇至少部分来源于元江坝区.以青龙厂、丫口为标放地,在6月和7月分别释放10 000、20 000头荧光标记桔小实蝇和番石榴实蝇,结果表明桔小实蝇飞行距离达到150 km,番石榴实蝇仅在化念得到回收,证明昆明地区桔小实蝇来自青龙厂.同时,研究发现,元江桔小实蝇向北迁飞极大地借助了西南气流,并主要沿峡谷或高速公路所形成的南北通道行进.

番石榴果实蝇形态、危害与入侵中国的风险

通过对番石榴果实蝇的形态、危害以及分布、潜在的危害性、定殖传播扩散蔓延的可能性以及危害性管理难度等方面的风险进行了定性分析,并应用"多指标综合分析法",对番石榴果实蝇入侵中国的风险进行定量评估。结果表明,番石榴果实蝇在我国的风险值R为2.33,属于高度危险的有害生物。