利用两种真核昆虫表达系统表达可溶性甲型H1N1血凝素蛋白

目的利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素（haemegglutinin，HA）蛋白，进而获得具有生物学活性的目的蛋白。方法选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A／Sichuan／1／2009（H1N1），人工合成完整HA基因序列；分别利用杆状病毒表达系统BaculoGoldsystem和Bac—to-Bacsystem，在昆虫细胞中表达日的基因HA；经亲和层析纯化及Westernblot搭定，红细胞血凝试验检测ttA蛋门的生物学活性。结果获得测序正确的HA基因，分别克隆到pAcGP67B（Baculo Goldsystem）和pFASTBacl（Bac-to-Bacsystem）载体，经杆状病毒同源重组后转染Sf9细胞，Westernblot鉴定硅示，BaculoGoldsystem表达HA蛋白是分泌型的，而Bac—to—Bacsystem是胞内表达且表达效果优于前者；血凝试验证实，这两种表达系统表达的HA蛋白均具有生物学活性。结论利用杆状病毒表达系统成功表达出具有生物学活性的HA蛋白，Bac—to-Bacsystem更适合表达HA蛋白，为流感病毒的相关研究提供了保障。