巴豆的炮制研究进展

巴豆始载于《神农本草经》,其炮制历史悠久,炮制方法较多,除目前临床上主要应用的生巴豆仁与巴豆霜外,历代本草文献记载其炮制方法有炒法、煨法、煅法、煮法、蒸发、水制法等。作者根据古今文献的进行全面查阅和梳理,对巴豆的古法炮制进行概述,对其现代工艺进行归纳,比较古今炮制方法之间的差异及研究进展情况。并对巴豆炮制的后续研究工作提出设想,以期为规范炮制工艺、阐述炮制机理、提升药材资源利用提供参考依据。

巴豆炮制历史沿革考证

巴豆为临床常用泻下药,《神农本草经》将其列为下品,现代文献多关注巴豆的临床应用及理化研究,对巴豆的炮制历史沿革研究甚少。笔者查阅汉代以来与巴豆相关的本草、医药典籍、古方书等文献64部,归纳总结出巴豆去壳、熬、研、油煎、压榨、炒焦、煨、薄荷汁煮、米炒、制霜、酒炙、醋炙等48种炮制方法。结合中药炮制不同历史发展阶段特点,整理不同时期巴豆的炮制方法变化。梳理巴豆的炮制历史沿革,参考历年中国药典、全国中药炮制规范及期刊文献,归纳巴豆现代炮制工艺。本文以期为巴豆的进一步炮制研究及遵古炮制提供思路与参考。

紫外分光光度法测定巴豆中总生物碱的含量

目的:建立紫外分光光度法测定巴豆中总生物碱含量的方法。方法:采用紫外分光光度法,以巴豆苷为对照,在292nm波长处进行含量测定。结果:巴豆苷在3.84～23.04μg·mL-1与吸光度呈良好的线性关系,回归方程Y=0.0365X-0.0297,r=0.9999(n=6),平均加样回收率为101.38%,RSD=1.21%。结论:本测定方法准确、简单、灵敏、快速、重现性好,可以作为控制巴豆及巴豆霜质量的方法与指标。

巴豆非脂肪油部分HPLC指纹图谱研究

目的建立巴豆非脂肪油部分的高效液相色谱指纹图谱,为其质量评价提供理论依据。方法采用RP-HPLC法,测定了10批巴豆样品。色谱条件:Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:A相为0.2%醋酸,0.3%三乙胺溶液,B相为乙腈,梯度洗脱,体积流量:0.8 mL/min,柱温:30℃,检测波长:247 nm。结果在色谱指纹图谱中,确立了其中12个共有峰,建立了巴豆非脂肪油部分的共有模式,10批样品指纹图谱相似度在0.982～0.995之间。结论该方法简便、准确、重现性好,为评价巴豆药材的质量提供了依据。

脐疗药物性味归经特点探析

目的:探析古今文献中脐疗药物性味归经特点,为脐疗药物的临床应用和研究提供参考。方法:查阅从先秦至民国的医籍650种、现代医籍50种和各种期刊杂志100余册,收集并分类筛选文献,现代文献来源以中国生物医学光盘数据库、清华同方系列数据库、中国学位论文全文数据库为主。选用权威数据挖掘工具SPSS clementine对处理的脐疗方剂数据进行统计分析。结果:麝香、葱白、盐、附子、肉桂、白矾、吴茱萸、丁香、生姜、巴豆、胡椒、当归、硫黄、大蒜等14味药物出现频次在50次以上。结论:脐疗药物的药性以温性、热性居多;药味以辛味为主;归经以脾经、肝经为主。

巴豆对大鼠膀胱逼尿肌肌条运动的影响

目的观察巴豆水煎剂对豚鼠离体膀胱通尿肌肌条运动的作用，并探讨其作用机理。方法将通尿肌肌条悬挂于离体平滑肌灌流肌槽内，采用累积加入巴豆水煎剂的方法，观察其影响。结果①巴豆增高豚鼠离体膀胱逼呆肌肌条的张力，并呈剂量依赖性关系（r＝0．80，P＜0．01）。②异搏定部分阻断巴豆增高肌条张力的效应（P＜0．001）。六烃季胺、阿托品、酚妥拉明和消炎痛均不阻断巴豆增高肌余张力的效应（P＞0．05）。结论巴豆剂量依赖性增高豚鼠离体膀胱通尿肌张力，其作用部分经由平滑肌细胞膜的Ca^(2+)通道。

巴豆对豚鼠离体胆囊肌条收缩活动影响的实验研究

目的 :观察巴豆水煎剂对胆囊平滑肌运动的影响并探讨可能的作用机理。方法 :将肌条置于离体平滑肌灌注肌槽内 ,用生理记录仪记录肌条的收缩活动。结果 :( 1)巴豆剂量依赖性增高胆囊肌条张力 ,加快收缩频率 ,减小收缩波平均振幅。( 2 )苯海拉明、六烃季铵、消炎痛、酚妥拉明可部分阻断巴豆对胆囊肌条的作用。结论 :巴豆对豚鼠胆囊肌条的作用与组胺 H1受体、胆碱能 N受体、前列腺素合成酶、肾上腺素能α受体有关。

基于古籍整理的巴豆外用治疗咽痛研究

目的探讨巴豆外用治疗咽痛的规律,为临床提供参考。方法通过检索《中华医典》中收录的古籍,整理古代文献中巴豆外用治疗咽痛的方法及适应症。结果经筛选,共纳入巴豆外用治疗咽痛相关的条文35条。其中含咽法适用于病情较轻者;塞鼻法、吹喉法适用于因咽喉肿胀难以张口者,其中咽喉痰多者用塞鼻法,痰少者用吹喉法;烟熏法、催吐法适合病位较深、病情较重者,不省人事者可用催吐法。结论不同情况咽痛可使用不同巴豆外用方法进行治疗,简便廉验,值得推广。

巴豆调中作用初探

巴豆大毒,辛热燥烈,药力峻猛,具有峻下冷积、逐水退肿、豁痰利咽之效。除上述功效外,梳理古代文献,发现有诸多名医应用巴豆治疗泄泻、积滞、痞满等脾胃系疾病。小剂量应用巴豆能散寒除湿、消积助运,起到调理中焦脾胃的目的。故针对巴豆的调中作用,本文分别从本草论述、医家应用、现代研究三个方面来进行讨论,以期为有毒中药的合理使用提供思路。

HPLC测定中药巴豆中巴豆苷和木兰花碱的含量

目的：建立HPLC测定巴豆中巴豆苷和木兰花碱含量的方法,比较不同产地样品含量差异为制定中药巴豆的质量标准提供实验依据。方法：采用Accurasil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.2%磷酸0.2%三乙胺水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0-10 min,5%A;10-12 min,5%-15%A;12-29 min,15%A;29-30 min,15%-5%A）,流速0.8m L·min-1,柱温30℃,检测波长275 nm。结果：巴豆苷在0.078 8-0.472 8μg线性关系良好（r=0.999 9）,平均加样回收率为99.29%,RSD 2.5%;木兰花碱在0.013 7-0.082 2μg线性关系良好（r=0.999 9）,平均加样回收率为99.28%,RSD2.2%。不同产地巴豆中巴豆苷、木兰花碱的含量差异较大。巴豆苷的含量以四川最高、广西最低,分别为17.57,7.07 mg·g^-1,木兰花碱的含量以贵州最高、广西最低,分别为3.42,1.00 mg·g^-1。结论：该方法准确简便,快速可行,可用于中药巴豆的质量控制。

巴豆化学成分、药理作用及其质量标志物预测分析

巴豆Crotonis Fructus是我国传统中药材,也是大毒中药,误用容易造成极大危害。巴豆化学成分复杂多样,包括挥发油、二萜、有机酸、蛋白质、生物碱、甾醇以及微量元素等成分。近年来,随着国内外学者研究的逐渐深入,巴豆在抑菌、抗癌等方面显示出特殊疗效,其新的化学成分与药理活性也不断被发现。在对巴豆资源、化学成分和主要药理活性总结的基础之上,结合质量标志物概念,从巴豆化学成分与其特异性、可测性和中药毒效性的相关性等方面进行质量标志物(quality maker,Q-Marker)的预测分析,建议进一步聚焦巴豆二萜类和蛋白质成分化学物质组的研究分析,为明确巴豆质量标志物,建立科学的巴豆质量评价体系提供依据。

巴豆生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bax,Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究巴豆生物碱(croton seed alkaloid,CA)对人肝癌SMMC-7721细胞的诱导凋亡作用并探讨其对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。方法:不同浓度CA分别处理SMMC-7721细胞24～48 h后,MTT法检测细胞的生长活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达。结果:10～200 mg.L-1 CA均能抑制SMMC-7721细胞增殖(P<0.05),其抑制率与作用时间及浓度相关;CA作用SMMC-7721细胞24 h后,对照组凋亡率为(0.26±0.14)%,10,50,100,200 mg.L-1 CA组细胞凋亡率分别为(5.85±0.47)%,(17.70±1.23)%,(33.25±2.08)%,(49.52±1.85)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果提示经CA作用24 h后,随着药物浓度的增加,Bax的表达逐渐增加,而Bcl-2的表达逐渐减少。结论:CA能抑制SMMC-7721细胞的生长并促进其凋亡,其发生与Bcl-2蛋白的减少和Bax蛋白表达增多有关。

基于小鼠胃肠道系统毒性及利尿效应的大枣与巴豆霜配伍减毒机制研究

研究大枣对巴豆霜胃肠毒性及利尿效应的干预作用。将48只小鼠随机分为空白对照组(control)、巴豆霜低剂量组(0.039 g·kg^(-1)·d_(-1), CTL)、巴豆霜高剂量组(0.078 g·kg^(-1)·d_(-1), CTH)、大枣水提液组(9.75 g·kg^(-1)·d_(-1), JF)、巴豆霜低剂量与大枣配伍组(巴豆霜0.039 g·kg^(-1)·d_(-1),大枣9.75 g·kg^(-1)·d_(-1), JFCTL)、巴豆霜高剂量与大枣配伍组(巴豆霜0.078 g·kg^(-1)·d_(-1),大枣9.75 g·kg^(-1)·d_(-1), JFCTH),每组8只。各组于给药第9天进行排尿量测定;给药10天后,收集新鲜粪便样品,采用16S rDNA测序的方法研究巴豆霜和大枣配伍前后肠道菌群的变化。所有实验方案均经南京中医药大学动物伦理委员会批准。结果表明,大枣与巴豆霜合用可减缓巴豆霜的快速利尿作用,显著上调单用巴豆霜后下降的血清白介素-2 (IL-2)、白介素-6 (IL-6)、胃泌素(GAS)和生长抑素(SS)水平,减轻巴豆霜导致的小鼠小肠组织损伤,并改善其引起的肠道菌群失调。大枣合用低剂量巴豆霜后可使Sphingomonas、Oscillospira的相对丰度显著降低,大枣合用高剂量巴豆霜后致病菌属Bilophila水平降低。本研究表明大枣与巴豆霜配伍应用可在血清免疫指标、肠道运动、肠道损伤、肠道菌群结构等方面表现出一定的配伍减毒作用趋势。此外,大枣尚可减缓巴豆霜的逐水药势,呈现出一定的降效作用。

基于不同剂量比的巴豆配伍桔梗“减毒”作用机制探讨

目的:探索巴豆配伍桔梗是否具有"减毒"作用及其作用机制。方法:以动物死亡状态及半数致死量(LD50)为评价指标,比较巴豆配伍不同剂量比的桔梗前后的动物中毒情况;通过测定比较巴豆配伍桔梗的不同剂量比下巴豆苷含量,从化学成分角度揭示巴豆配伍桔梗"减毒"作用机制。结果:巴豆配伍不同剂量比桔梗,其毒性反应均减小,且以1∶3剂量比值下LD50及其95%可行限抬高最多;同时配伍不同剂量比桔梗后巴豆苷含量呈现"抛物线"式变化,在1∶3剂量比时巴豆苷含量降低最多(32.57%)。结论:巴豆配伍桔梗(1∶3)剂量比值为其减毒作用最佳比值,可能与其减少了游离态巴豆苷含量有关。

基于祛痰作用的三物白散配伍机制的拆方研究

目的拆方研究三物白散各药味组合对"寒痰证"的祛痰作用,探讨方中药味配伍机制。方法通过冰水浴和灌胃冰水的方法制备小鼠"寒痰证"模型,通过气管酚红排泌实验模型,比较各组合的祛痰作用,并利用计算机辅助层级聚类分析,探讨三物白散拆方后各药味组合机制。结果三物白散全方、巴豆配伍桔梗和巴豆配伍贝母具有显著祛痰作用(P<0.05),单用巴豆则无明显祛痰作用。层级聚类结果显示含巴豆与不含巴豆的组合为不同的作用类型,配伍巴豆的实验组祛痰作用明显增强。结论三物白散方中巴豆需配伍桔梗或贝母后表现出较强的祛痰作用。

巴豆油中佛波醇类成分的HPLC指纹图谱

目的:建立巴豆油中佛波醇类的HPLC指纹图谱,为巴豆油的质量评价提供依据。方法:采用RP-HPLC,测定了10批巴豆样品。色谱条件为Thermo Hypersil Gold C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相水-乙腈梯度洗脱,流速1.0m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长235 nm。结果:在建立的巴豆油中佛波醇类指纹图谱中,10批样品HPLC指纹图谱相似度在0.884~0.991,确立了12个共有峰的共有模式。结论:该方法简便、准确、重复性好,为评价巴豆油定性鉴别及内在质量提供了科学依据。