白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位抗肿瘤作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位的抗肿瘤作用。方法将接种S180肉瘤细胞的小鼠分为阴性组、阳性(环磷酰胺,CTX)组、白:半配对组,白半水提醇溶组以及白半水提醇沉组。给药12 d后,称重,取材,记录瘤重,计算抑瘤率、生长抑制率,记录肝脏、脾脏质量并计算指数。HE染色方法观察肿瘤组织细胞的形态学特征,ELISA法检测血清IL-2、IFN-γ、TNF-α含量,细胞免疫荧光标记法检测细胞凋亡。结果CTX组、不同给药组抑瘤率分别为83.46%、50.82%、32.79%、36.61%。与阴性对照组相比,CTX组肝指数、脾指数明显降低(P<0.05,P<0.01);给药各组肝指数和脾指数,明显升高(P<0.05,P<0.01)。HE染色显微镜观察,瘤组织出现大面积坏死区,但提取物组细胞坏死较少。用ELISA法测得,各中药给药组能提高机体IL-2、IFN-γ、TNF-α表达水平。体外细胞凋亡实验初步证明白花蛇舌草、半枝莲药对具有细胞毒作用,其提取物细胞毒作用减弱。结论白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位均具有抗肿瘤作用,提取分离后各部分作用均有所减弱,说明中药配伍作用的合理性以及综合性。

“半枝莲-白花蛇舌草”药对治疗胃癌的网络药理学作用机制分析

目的基于网络药理学,探讨"半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌(GC)的有效活性成分及作用机制。方法通过TCMSP数据库选取"半枝莲-白花蛇舌草"药对中含有的131个化合物,筛选其活性成分及潜在靶点;通过人类孟德尔遗传数据库、GeneCards数据库挖掘GC疾病靶点;结合化合物及疾病靶点,构建化合物-靶点网络图,并进行GO功能富集及KEGG通路富集分析。结果 "半枝莲-白花蛇舌草"药对中含有34个活性成分,对应GC161个靶点;主要通过调控RNA聚合酶II启动子、胞质、胞外间隙、血管生成、细胞凋亡信号通路等治疗胃癌,主要涉及肿瘤信号通路、蛋白聚糖信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、p53信号通路等。结论 "半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌的作用机制确切,这为临床中医治疗胃癌提供了客观依据,亦可指导"半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌作用机制的实验研究。

基于网络药理学探讨“白花蛇舌草-半枝莲”活性成分治疗卵巢癌机制研究

目的 基于网络药理学及分子对接技术,探究白花蛇舌草和半枝莲药治疗卵巢癌的作用机制。并对药对活性成分槲皮素进行体外细胞实验,验证其对卵巢癌的作用。方法 从中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)数据库筛选白花蛇舌草和半枝莲的活性成分并找出对应的靶点;在GeneCards数据库中检索出卵巢癌相关靶点;用jvenn在线作图工具得到药对和疾病相同的靶点交集;将交集靶点导入STRING平台,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction network,PPI)关系,用Cytoscape做出白花蛇舌草和半枝莲药对治疗卵巢癌的主要靶点图,用Metascape数据库对主要靶点进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。用分子对接对结果进行验证。并对白花蛇舌草-半枝莲活性成分槲皮素进行CCK-8细胞增殖实验和流式细胞术检测细胞凋亡实验。结果 与卵巢癌相关的白花蛇舌草-半枝莲药对成分-靶点网络中包含30种成分、109个靶点。其相关性位于前3位的候选化合物分子为槲皮素、木犀草素、β-谷甾醇。这些成分通过AKT1、BCL2L1、CASP3、CASP7等信号蛋白来抑制卵巢癌细胞的生长和转移,涉及信号通路有癌症的途径、乙型肝炎、脂质和动脉粥样硬化、AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的应用、PI3K-AKT信号通路等。分子对接结果显示核心成分与核心靶点均有较好的结合能力。不同浓度槲皮素可明显抑制卵巢癌细胞增殖,且浓度越高细胞抑制率越高,细胞凋亡率也随浓度增高,数据结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论 从网络药理学和分子对接技术得出白花蛇舌草和半枝莲药对可通过多成分、多靶点、多通路治疗卵巢癌的作用机制。槲皮素能有效抑制卵巢癌细胞并促进其凋亡。

白花蛇舌草-半枝莲药对治疗非小细胞肺癌的网络药理学研究

目的:利用网络药理学方法,研究白花蛇舌草-半枝莲药对治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的分子机制。方法:检索中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),筛选并预测白花蛇舌草-半枝莲药对的有效活性成分与作用靶点。检索人类基因数据库(GeneCards)获取与NSCLC相关的基因。结合网络构建与分析等相关方法,筛选白花蛇舌草-半枝莲药对治疗NSCLC的关键靶点。使用富集分析数据库(DAVID)对关键靶点进行基因本体论(GO)生物学过程分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:从TCMSP获取药对成分131种,按照药物代谢动力学(ADME)筛选出有效活性成分33种,预测作用靶点196个。挖掘GeneCards获取基因3015个。利用图形化显示网络分析和编辑软件(Cytoscape)分别构建活性成分与疾病的蛋白质-蛋白质相互作用网络,抽取合并网络后进行拓扑属性分析,筛选出关键靶点142个。对关键靶点进行GO生物学过程与KEGG通路富集分析显示,主要涉及265种生物学过程与114条信号通路,与NSCLC发生发展密切相关。结论:白花蛇舌草-半枝莲药对治疗NSCLC,具有多成分、多途径、多靶点的特点,其主要涉及RNA转录启动、细胞凋亡、细胞表皮生长、细胞增殖、T细胞调节等癌症相关生物学过程,并在多种癌症相关通路均有富集。

白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分对胃癌SGC-7901细胞周期的影响

目的:探讨白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分对胃癌SGC-7901细胞周期的影响。方法:将胃癌SGC-7901细胞分为对照组(0 mg·L^(-1))及白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分低(10 mg·L^(-1))、中(30 mg·L^(-1))、高(50 mg·L^(-1))剂量组,分别培养12 h、24 h、48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖能力;平板细胞克隆形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期变化;Western Blot检测细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及c-Myc蛋白表达水平。结果:与对照组比较,白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分各剂量组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞集落形成率显著降低(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05),G2/M期细胞比例显著降低(P<0.05),Cyclin D1及c-Myc蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分可将细胞阻滞于G0/G1期进而抑制SGC-7901细胞增殖,其作用与下调Cyclin D1、c-Myc蛋白表达水平有关。