基于人工智能嗅觉技术和化学计量学的白及饮片真伪鉴别

目的采用人工智能嗅觉技术结合化学计量学方法,探索建立适合鉴别白及饮片真伪的新方法。方法收集白及及其易掺伪饮片(天麻、玉竹、黄花白及)134批,以α-FOX4000电子鼻嗅觉感官数据为自变量(X),依据2020年版《中华人民共和国药典》和地方标准鉴别,参考传统经验辨识结果作为标杆辨识信息(Y),采用主成分分析-判别分析(PCA-DA)、偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)、支持向量机(SVM)、最小二乘-支持向量机(LS-SVM)以及反向传播神经网络(BP-NN)5种化学计量学方法建立白及与非白及的二分类辨识模型和4种饮片的四分类辨识模型Y=F(X);以鉴别准确率为指标,优选最优分类辨识模型。结果经留一法交互验证,在二分类辨识模型中,PCA-DA、PLS-DA、SVM和BP-NN正确率分别为95.52%、97.01%、91.79%和84.33%,以PLS-DA最优;在四分类辨识模型中,PCA-DA、PLS-DA、LS-SVM和BP-NN正确率分别为91.04%、88.06%、89.55%和82.28%,以PCA-DA最优。结论运用电子鼻技术对白及及其近似饮片进行气味特征的表征,并与多元统计分析方法结合,可准确、快速地鉴别白及饮片,为中药饮片气味客观化表达及真伪鉴别提供了新的思路和方法。

白及多糖的提取纯化、结构鉴定及生物活性研究进展

用于白及多糖(Bletilla striata polysaccharide,BSP)提取主要有溶剂提取法、辅助提取法等;分离纯化主要有活性炭或双氧水脱色,Sevage法脱蛋白,柱色谱法分离等;含量测定中通常使用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法;分子量采用高效液相色谱法、红外光谱、凝胶渗透色谱等方法来进行测定;结构表征主要采用液相色谱,红外光谱或核磁共振法来进行测定。白及多糖为葡甘聚糖,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节和促进伤口愈合等多种生物活性,在生物医药领域有广泛的应用前景。BSP有良好的药理活性,目前其研究大部分为粗多糖,药理活性仍在细胞阶段。因此对其提取分离纯化、结构鉴定、生物活性的研究仍是社会关注的热点。主要综述了BSP的提取分离纯化、结构组成及生物活性的研究进展并对其进行系统分析,为BSP的深度开发利用以及后续的研究提供了理论基础。

基于中性粒细胞胞外诱捕网探讨白及修复溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的作用及机制

目的基于中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)探讨白及对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障的修复作用及机制。方法将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.3 g·kg^(-1))及白及低、中、高剂量组(0.3、0.6、1.2 g·kg^(-1)),每组8只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇灌肠法复制UC大鼠模型,造模成功后按照设定剂量灌胃给药,每日1次,连续灌胃给药21 d。在给药干预的第1、11、21天进行疾病活动指数(DAI)评分;采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量;Western Blot法及免疫组化法检测大鼠结肠组织中NETs相关蛋白髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、血管内皮生长因子(VEGF)以及紧密连接(TJs)相关蛋白封闭蛋白2(CLDN2)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠DAI明显升高(P<0.05);结肠组织黏膜层出现大面积变性坏死且肠腺结构消失,大量炎性细胞浸润,累及黏膜下层、肌层和浆膜层,病理评分明显升高(P<0.05);血清TNF-α、IL-1β水平明显升高(P<0.05);结肠组织中MPO、NE、VEGF、CLDN2蛋白表达明显升高(P<0.05),ZO-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠的DAI均明显降低(P<0.05);柳氮磺胺吡啶组和白及中、高剂量组大鼠结肠肠腺结构完整清晰,黏膜未见明显变性及坏死,可见少量炎性细胞浸润,病理评分明显降低(P<0.05);血清TNF-α、IL-1β水平明显降低(P<0.05);结肠组织中MPO、NE、VEGF、CLDN2蛋白表达明显降低(P<0.05),ZO-1表达明显升高(P<0.05)。结论白及可能通过调控NETs激活及TJs相关蛋白表达,降低血清炎症因子水平,从而修复肠道黏膜屏障,发挥治疗UC的作用。

基于主成分分析和灰色关联度法的白及UPLC特征图谱及不同商品规格等级质量研究

目的:研究不同商品规格等级白及特征图谱间的差异性,为白及的质量评价提供参考。方法:按白及药材质量大小将白及分为3个等级,建立白及超高效液相色谱(UPLC)特征图谱分析方法,并采用相似度评价、主成分分析和灰色关联度法分析不同商品规格等级之间的差异。结果:对16批不同商品规格等级白及进样分析,共确定9个特征共有峰,指认其中1种成分,不同商品规格等级白及间的相似度为0.393~0.996,差异较明显。主成分分析和灰色关联度法分析结果显示一等品白及得分整体偏低,排名靠后。结论:不同商品规格等级白及特征图谱具有一定差异性,本研究可为白及不同商品规格等级的划分及其质量评价提供参考。

基于生长年限对白及类药材militarine成分的积累影响研究

目的探讨不同生长年限的白及、小白及和黄花白及药材中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine,化学式为C_(34)H_(46)O_(17))成分的积累规律,为白及质量控制和近缘种资源的开发提供依据。方法采用HPLC法,以XTerra Waters柱(5μm,4.6 mm×250 mm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(22∶78)进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长270 nm,测定各样品militarine的含量。结果经过对HPLC图谱分析比较,不同生长年限的白及与其2种近缘种的militaeine成分含量差别较大,以4年生最高,3年生的次之,2年生则最低,相同生长年限的种间含量稍有差异,白及稍高,小白及与黄花白及稍低。结论以3年及以上生长年限的白及作为药材原料具有一定的科学性。小白及、黄花白及与生长年限相同的白及的militarine含量相当,二者作为习用品具有一定的合理性,可为开展深入的资源评价提供参考依据。

基于HPLC-QAMS多指标成分联合化学计量学及熵权TOPSIS的白及综合质量评价

目的采用高效液相色谱-一测多评法(HPLC-QAMS)联合化学计量学及熵权TOPSIS(EW-TOPSIS)对白及质量进行评价。方法收集全国5省18批白及样品,以1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯为参照物,同时测定白及中天麻素、4-(葡糖糖氧基)-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷、手参苷Ⅲ、手参苷Ⅸ、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯、贝母兰宁、2,7-二羟基-3,4-二甲氧基菲、白及联菲A、白及联菲B、山药素Ⅲ和3'-O-甲基山药素Ⅲ的含量,运用化学计量学方法对含量测定结果进行综合分析,挖掘影响白及产品质量的主要潜在标志物,并对不同产地来源白及进行质量优劣性评价。结果12种成分分别在各自范围内线性关系良好,准确度良好;HPLC-QAMS和外标法含量测定结果差异无统计学意义(P>0.05);化学计量学方法显示18批白及样品可聚为3类,呈现一定的产区差异;山药素Ⅲ、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯、天麻素和贝母兰宁是影响白及产品质量的主要潜在标志物;EW-TOPSIS分析结果显示5个省中贵州和四川地区白及样品质量最优,其次为湖北、江西和陕西。结论本研究建立的HPLC-QAMS方法操作便捷、结果准确,化学计量学及EW-TOPSIS方法可用于白及质量的综合评价。

基于网络药理学与分子对接技术的保健食品白及五味子颗粒保胃护肝作用机制和功效成分含量测定研究

基于网络药理学和分子对接筛选辨识白及五味子颗粒中保胃护肝的功效成分及作用机制,并利用HPLC-DAD建立含量测定方法。该研究遵循多个功效成分共同测定取代总成分测定以提升保健食品质量控制总体思路,采用网络药理学的方法对功效成分进行筛选。基于TCMSP、GEO和Genecards等数据库共收集白及五味子颗粒的59个目标成分和74个疾病与成分的共同作用靶点,采用PPI平台及“成分-靶点-疾病”网络筛选得到包括AKT1、JUN等11个核心靶点与橙皮苷、芒柄花素、川陈皮素、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素共6个功效成分。通过对共同作用靶点进行GO和KEGG富集分析可知,白及五味子颗粒保胃护肝功能的发挥涉及对化学应激的反应、类固醇代谢过程、对酒精的反应、脂质和动脉粥样硬化通路、IL-17信号通路等关于脂质代谢、氧化应激和炎症反应的通路。提示了白及五味子颗粒发挥保胃护肝功能是通过多成分、多靶点、多通路的协同作用实现的。对筛选得到的功效成分与核心靶点的结合能力进行预测分析,结果显示,所有成分均与核心靶点结合情况良好,结合活性综合排名前3位分别是橙皮苷、五味子醇甲与五味子甲素。此外,对功效成分建立含量测定方法完成对白及五味子颗粒中功效成分的含量测定。该研究结果为保健食品白及五味子颗粒中保胃护肝功效成分的发现和作用机制的阐明提供了思路,建立的功效成分含量测定方法准确、稳定,为实际生产中质量控制环节提供参考。

重构本草——白及

通过古籍文献调研、中药现代研究进展及其研究成果的梳理,结合中医临床及中药学等学科领域内的专家学者的认识及应用经验,经讨论认为白及:主要功效为收敛止血,消肿生肌;症靶为咳血、消化道出血;标靶为口腔溃疡、胃及食管黏膜溃疡;现代药理研究发现白及及其有效成分具有抗菌、促进伤口愈合、抗肿瘤、止血、抗溃疡等作用;本品不宜与川乌、制川乌、草乌、制草乌、附子同用;临床使用剂量为3.7~50 g,内服时当根据不同疾病,或同一疾病的不同阶段进行辨证使用,并积极探索白及用量与症靶、标靶的量效关系构建。

基于指纹图谱-化学计量分析-网络药理学的白及饮片质量标志物研究

目的基于超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱、化学计量分析和网络药理学方法预测白及饮片的质量标志物(Q-Marker),为白及饮片质量控制提供参考。方法利用UPLC和中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件建立15批白及饮片的指纹图谱,确定共有峰;分别使用SIMCA 14.1、IBM SPSS Statistics 26软件以偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)和主成分分析法(PCA)对15批白及饮片共有峰组间主要差异成分进行筛选;进一步利用网络药理学方法,通过在线数据库检索成分靶点,采用David数据库对其进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,构建“成分-靶点-通路”网络,分析白及饮片主要活性成分和关键靶点、通路的相关性;最后,基于质量标志物筛选原则和网络药理学研究结果,分析确证白及饮片的Q-Marker。结果15批白及饮片确定了17个共有峰,相似度均大于0.961,指认了其中4个共有峰;利用PLS-DA、PCA共确定了4个主要差异性成分;网络药理学研究发现,STAT3、GRB2、VEGFA等靶点及Proteoglycans in cancer、JAK-STAT signaling pathway信号通路与白及发挥收敛止血、消肿生肌功效关联密切;基于上述研究确定了militarine、gymnosideⅠ、dactylorhin A、gymnosideⅢ4个成分可作为白及饮片的Q-Marker。结论通过指纹图谱、化学计量分析及网络药理学方法初步确证了白及饮片的Q-Marker,可为白及饮片质量控制及其药效物质基础的进一步研究提供参考,同时为单味药材饮片Q-Marker的关联研究模式提供了思路。

中药白及与其伪品“水白及”的电化学指纹图谱研究

目的:建立白及电化学指纹图谱,对白及与其伪品“水白及”进行鉴别研究,为其用药安全有效提供依据。方法:采用Belousov-Zhabotinski(B-Z)振荡反应研究白及及其伪品的电化学指纹图谱,以BrO_(3)^(-)+H^(+)+Ce^(4+)+丙二酸为震荡体系,考查温度、转速、加入量等条件对指纹图谱的影响;最佳测定条件为温度310 K、转速600 r/min、白及粉末加入量0.1000 g。结果:白及与其伪品“水白及”的电化学指纹图谱特征参数相差较大。结论:电化学指纹图谱的峰形、振荡寿命、振荡周期及诱导时间等特征参数可以作为白及与其伪品“水白及”的有效鉴别依据。

红外光谱结合化学计量学鉴别中药白及和其伪品“水白及”

目的基于红外光谱结合化学计量学建立白及和“水白及”的鉴别方法,为白及的鉴别提供一定的依据。方法利用傅里叶变换红外光谱仪采集白及和“水白及”37批样品的红外光谱图,并进行自动平滑、二阶求导等预处理,采用系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对白及和“水白及”的光谱数据进行分析。结果白及和“水白及”的红外光谱图有差异。二阶导数光谱图中,白及和“水白及”在1800~800 cm-1峰位、峰形及峰强存在明显差异。系统聚类分析(HCA)表明,当欧氏距离为5时,白及和“水白及”聚为两类;PCA和OPLS-DA的分析结果一致,白及和“水白及”分别分布在t[1]象限负值区和正值区,其中OPLS-DA的分类结果最突出。结论红外光谱结合化学计量学方法,能快速简便的鉴别白及和“水白及”,为白及的质量评价提供了一种快速、有效的方法。

白及多糖对大鼠深Ⅱ度烫伤创面的保护作用

目的:研究白及多糖(RBP)对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中脂多糖(LPS)及Toll样受体4(TLR4)含量的影响。方法:30只SD大鼠,随机均分为空白对照组、模型和RBP组。复制大鼠深Ⅱ度烫伤创面模型,每天观察烫伤大鼠创面,记录创面愈合时间并计算创面愈合率。于烫伤后第1、3、7、14、21、28天分别通过尾静脉采血收集大鼠静脉血。采用鲎试剂检测血浆中LPS含量;采用酶联免疫吸附法检测血清中相关致炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平;采用流式细胞术检测不同时相点大鼠外周血中TLR4阳性表达率。结果:与模型组比较,RBP组大鼠创面愈合时间显著缩短(P<0.01);用RBP 7 d后,大鼠血清中LPS、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05或P<0.01),大鼠外周血中TLR4阳性表达率显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:RBP可促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合,其作用机制可能与降低烫伤大鼠LPS、TLR4以及相关的致炎细胞因子的表达有关。

白及产业现状及可持续发展的探讨

简述白及产业发展现状与特点,为产业的可持续发展提供依据。查阅相关文献,实地调研考察,分析白及产业存在的主要问题,提出可持续发展的建议。资源短缺,种苗质量标准缺乏、栽培方式粗放、品种与质量控制技术研发应用滞后是目前制约白及产业可持续发展的关键问题。因此,加强白及优良品种选育与繁殖方面的研究,有效解决白及的资源问题并提高白及质量标准控制的技术,是推动白及产业可持续发展的强大动力。

白芨作为血管栓塞剂的应用

白芨作为一种止血中药,传统应用于多种内伤血证、外科血证及溃疡肿毒。现代药理新技术对白芨成分的深入研究,使得白芨的应用领域不断扩大。尤其是现代放射技术的发展,结合白芨的药理性质,使得白芨在血管栓塞治疗方面的基础研究和临床治疗领域得到进一步拓展。

中药白芨和地榆对角质形成细胞游走的不同影响

目的 探讨角质形成细胞游走在表皮病理修复中的作用及白芨和地榆对角质形成细胞游走的不同影响。方法 采用无血清表皮器官培养法 ,观察角质形成细胞正常游走时的形态变化和游走长度 ,以及含不同浓度白芨或地榆的培养剂对角质形成细胞游走的影响。结果 角质形成细胞从切缘基底层开始游走 ,形成皮包。核深染 ,未见核分裂相 ,胞浆染色较红 ,未见角质层。皮包起始部呈多层细胞 ,远端渐呈单层细胞。游走长度与培养时间呈直线正相关关系 ,与直线拟合 (P >0 .0 5 ) ,培养 2 4、4 8、72h游走长度皆有显著增加 ,组间差异非常显著 (P <0 .0 1 )。不同浓度含白芨上清液成分无血清培养基培养表皮植片 ,2 4、4 8h后表皮游走长于正常对照组。白芨浓度为 2× 1 0 -1mg/ml时差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,浓度为 2× 1 0 -2 mg/ml及 2× 1 0 -3 mg/ml时 ,促游走作用明显优于对照组 ,差异非常显著 (P <0 .0 1 )。浓度稀释到 2× 1 0 -4mg/ml时 ,游走接近于正常对照组。白芨培养 4 8h游走皆显著长于培养 2 4h。不同浓度含地榆上清液成分无血清培养基培养表皮植片 ,2 4、4 8h后部分表皮游走低于正常对照组。地榆浓度为 2× 1 0 -1 mg/ml时游走长度非常显著地低于正常对照组 (P <0 .0 1 )。浓度稀释为 2× 1 0 -2 mg/ml。

复方白及涂膜剂治疗大鼠烧烫伤实验研究

目的观察复方白及涂膜剂对大鼠烧烫伤的治疗作用。方法将实验用大鼠随机分为复方白及涂膜剂高、低剂量组及减方复方白及涂膜剂组、阳性对照组和模型对照组。分别采用热水、水蒸气、明火等造成大鼠局部皮肤深Ⅱ度和Ⅲ度烧烫伤,分别涂抹给药,进行治疗。观察记录各组动物受损部位皮肤愈合情况(结痂天数、脱痂天数及愈合时间)。结果复方白及涂膜剂低剂量、减方复方白及涂膜剂可以缩短烫伤大鼠结痂天数,尤其是后者还能缩短烫伤大鼠脱痂天数,在促进创面愈合方面有显著作用。结论复方白及涂膜剂治疗大鼠烧烫伤有确切效果,尤其是原方剂减去醋酸洗必泰后制成的减方复方涂膜剂在缩短热水和水蒸气烫伤大鼠脱痂时间、缩短愈合时间方面有显著疗效。

GC-MS分析中药白及中脂肪酸成分

目的气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析中药材白及中脂肪酸成分。方法采用石油醚索氏抽提法提取白及中脂肪油,经三氟化硼乙醚甲醇溶液甲酯化处理,用GC-MS测定脂肪酸组成。结果共分离出13个峰,确定了12种脂肪酸成分,主要为亚油酸(9,12-十八碳二烯酸),棕榈酸(十六烷酸),山嵛酸(二十二烷酸),木蜡酸(二十四烷酸),肉豆蔻酸(十四烷酸)等。结论此法操作简单、迅速、灵敏、准确度高,可满足白及药材中脂肪酸成分的分析需要。

纳米级中药白及覆膜生物补片对促进组织愈合的疗效研究

目的观察含有纳米级中药白及覆膜生物补片对大鼠创面组织的愈合作用。方法 60只SD大鼠随机分为4组,即空白对照组(A组)、白及普通补片组(B组)、普通白及生物补片(C组)和纳米级白及生物补片(D组)。各组大鼠均手术造成机械性全层皮肤圆形创面一处。采取相应的干预措施。在术后第3天、第6天及第9天观察创面愈合情况及计算创面愈合率;HE染色后进行毛细血管数量计数;并采用免疫组化SABC法染色,检测每张切片的VEGF蛋白的阳性表达。结果 (1)造模后第3天,各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第6天,D组与A、B、C组差异有统计学意义(P<0.05);造模后第9天,D组与A、B、C组有差异有统计学意义(P<0.05)。(2)造模后第3天,D组与A组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。造模后第6、第9天各组新生毛细血管计数均明显增多,D组与A组、B组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)造模后第3天,VEGF在各组创面的肉芽组织中均有阳性表达,B组、C组、D组表达为弱阳性(+),A组表达为阴性到弱阳性(-^+);C、D组与A、B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明C、D组VEGF阳性表达高于A、B组。造模后第6天,VEGF的阳性表达在4组创面肉芽组织中均上升,D组为强阳性(+++);B、C组为中度阳性(++);而A组表达为弱阳性(+)。D组中VEGF阳性表含量高于A、B组(P<0.05)。造模第9天以后,创面修复开始进入组织修复期,VEGF的阳性表达水平均开始下降。结论纳米级中药白及覆膜生物补片能加速伤口愈合,可能与其促进毛细血管增生、促进血管内皮细胞粘附生长有关。

白及胶提取工艺的优选

目的 探讨白及胶最佳的工艺 ;方法 通过正交试验以水提取物得率为指标 ,考察提取前冷浸时间、加水总量、煎煮次数、煎煮时间对提取效果的影响 ;以白及胶得率为指标 ,考察醇沉时白及水提浓缩液的浓度 (药材重量 /药液体积 )、白及水提浓缩液的含醇量对出胶率的影响。结果 白及胶最佳提取工艺是提取前冷浸 1h、加水总量是 2 6倍、煎煮次数 2次、煎煮总时间 4h ;醇沉时白及水提浓缩液的浓度为 1∶5 (W /V)、白及水提浓缩液的含醇量达 70 %。结论 该提取工艺条件科学 ,白及胶得率高。

黄柏、地榆、白及对溃疡性结肠炎大鼠组织中NF-κB和细胞因子表达的影响

目的探讨中药地榆、黄柏、白及对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠组织中核因子NF-κB和血清中白介素1β(IL-1β)、白介素10(IL-10)表达的影响。方法将60只成年SD大鼠随机分为正常组、模型组、地榆组、黄柏组、白及组、巴柳氮组。除正常组外,各组均以三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型。造模成功后,各组予相应处理,检测大鼠血清中IL-1β、IL-10含量,鼠结肠组织中NF-κBp65蛋白水平。结果地榆组、黄柏组、巴柳氮组大鼠血清中IL-1β水平均明显低于模型组,其中地榆组下调最明显。地榆组、黄柏组、巴柳氮组血清中IL-10水平与模型组相比明显升高,其中巴柳氮组升高最明显,地榆组、巴柳氮组效果更显著,而地榆组与巴柳氮组之间疗效相当。与模型组相比,各中药治疗组、巴柳氮组结肠组织中NF-κBp65蛋白水平均明显下调。治疗后,地榆组、巴柳氮组结肠组织中NF-κBp65蛋白表达水平较正常组明显下调,与巴柳氮组相比,地榆组下调肠组织NF-κBp65蛋白活性更显著。结论地榆、黄柏、巴柳氮均可显著降低IL-1β,升高IL-10水平,地榆、巴柳氮能明显下调NF-κBp65蛋白活性;黄柏对主要致炎因子和抑炎因子、NF-κBp65活性有一定的调节作用,对UC治疗可起辅助抗炎作用;白及对TNBS大鼠UC模型结肠组织中NF-κBp65蛋白表达有一定的调节作用,但对IL-1β、IL-10水平无明显调节作用。