不同生境白屈菜(Chelidonium majus)生活史型特征及其与不同器官单宁、黄酮、生物碱含量的关系

运用主成分分析法,对不同生境条件下白屈菜植物生活史型相关的营养生长(vegetative growth,V)、有性生长(sexual growth,S)和克隆生长(clonal growth,C)的主成分得分及比例进行定量计算,并以此为基础研究了生活史型特征参数及次生代谢产物单宁含量、黄酮含量与生物碱含量的相关关系,目的是为植物活性成分环境定向诱导培育提供实验依据。研究结果表明:(1)对于不同光照状况的全光照(空地)、70%光照(榆树林内)和40%光照下(白扦林内)的9个样地白屈菜生活史型划分发现,全光照下白屈菜种群生活史型为V0.34S0.41C0.25,为SV生活史型,空地为DE(Disturbed but still Excellent)生境;榆树林下和白扦林下的白屈菜生活史型分别可表示为V0.28S0.38C0.34和V0.27S0.40C0.33,均为SC生活史型,榆树林下和白扦林下为DF(Disturbed and Fragile)生境。(2)白屈菜植株次生代谢产物(单宁、黄酮和生物碱)含量,空地均低于榆树林下和白扦林下生境。各样地白屈菜不同器官单宁含量:叶片(种(根(茎;黄酮含量:种(叶片(根(茎;生物碱含量:叶片(根(茎,各样地白屈菜茎和根的生物碱含量无明显差异,空地白屈菜叶片中生物碱含量低于榆树林下和白扦林下白屈菜植株59%～56.7%。(3)白屈菜生活史型与次生代谢产物(单宁、黄酮和生物碱)含量相关性分析结果中,显著的线性关系显示,白屈菜次生代谢产物(单宁、黄酮和生物碱)含量与营养生长和有性生长成负相关,与克隆生长成正相关。实验结果表明,较于空地的DE生境,林(榆树和白扦)下的DF生境条件差,使白屈菜向C型转变,同时也促进了次生代谢产物(单宁、黄酮和生物碱)的积累。结果可以为野生植物的人工定向培育中生境选择和目的活性成分定向累积提供基于形态学的评价方法和理论。

INHIBITORY EFFECT OF GLYCYRRHIZA URALENSIS FISH AND CHELIDONIUM MAJUS L ON GASTROCARCINOGENESIS . INDUCED BY N-METHYL-N' -NITRO-N-NITROSOGUANIDINE

In order to investigate the antagonistic effect of Glycyrrhlza Uralensis Fish (GUF) and Chelidonium maJus L (CML) on gastrccarcinogenesls Induced by MNNG in Wastar rats, we treated the rats with MNNG alone (group 1) and with MNNG plus GUF and CML (group 2 and 3) respectively. The Incidence of Infiltrating adenocarcinoma of the glandular stomach and duodenum in group 2 was significantly lower than that in group 1 (26.7% vs. 67.8%). The differentiation and aggresslvenees of carcinomas occured in group 2 were much better and mild than those in group 1. Present study also demonstrated that the Inhibitory effect of CML on proliferation of human stomach carcinoma cell line MGC-803 was very remarkable; in addition, GUF and CML were able to antagonise the mutagenlc activation of MNNG. These results suggest that GUF and CML may be empoyed In prevention of gastric carcinoma.

白屈菜总生物碱缓释片制备工艺研究

目的:以羟丙基甲基纤维素为缓释材料制备白屈菜总生物碱缓释薄膜衣片解决白屈菜有效成分药物浓度不稳定的缺点,并建立可靠的含量测定方法。方法:采用单因素实验对白屈菜总碱缓释薄膜衣片制备工艺进行筛选,以释放度为依据;采用高效液相色谱法(HPLC)建立了白屈菜总碱缓释薄膜衣片中血根碱的含量测定方法。结果:优化的缓释片工艺处方:30%白屈菜总碱提取物、30%HPMC、20%可压性淀粉、10%乳糖、10%微晶纤维素,挤压制粒,加1%硬脂酸镁,压片,即得。结论:该工艺制得白屈菜总碱缓释片释药曲线平缓,缓释效果良好,方法简单易行,所得薄膜衣片外观和可压性良好。

基于网络药理学和分子对接探讨白屈菜生物碱治疗功能性腹痛的作用机制

目的结合网络药理学和分子对接技术研究白屈菜生物碱治疗功能性腹痛的作用机制。方法收集通过高效液相色谱与四级杆飞行时间质谱联用技术(HPLC-Q-TOF/MS)鉴定出的白屈菜生物碱,通过SwissTargetPrediction预测其作用的靶点;从GeneCards、Drugbank、OMIM和TTD数据库获取功能性腹痛(FAP)的相关靶点。取两者靶点的交集作为白屈菜生物碱和抗FAP相关的作用靶点。通过STRING构建蛋白互作网络并进行拓扑分析得到白屈菜碱抗FAP的核心靶点。使用Metascape进行GO生物功能和KEGG通路富集分析;通过SwissDock将代表性白屈菜碱(木兰花碱)与核心靶点进行分子对接。结果白屈菜碱抗FAP靶点共有134个,关键靶点10个;GO、KEGG富集分别得到取排名前20个条目,主要涉及癌症通路、癌症中的蛋白聚糖、钙信号通路、5-羟色胺能突触、cAMP信号通路和轴突引导通路等;分子对接结果显示,木兰花碱与核心靶点都表现出较强的结合能力。结论白屈菜主要通过SRC、AKT1、EGFR、CASP3、MAPK3等多靶点干预的网络模式产生中枢镇痛作用,从而发挥抗FAP活性。

白屈菜-元胡药对抗雌激素受体阳性乳腺癌药效物质及作用机制

目的 分析白屈菜-元胡药对(CHCR)的主要成分,预测其抗雌激素受体(ER)阳性乳腺癌的药效物质、潜在作用靶点及通路并进行验证。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对CHCR乙醇提取物的成分进行分析;对所得成分进行网络药理学分析,构建CHCR“活性成分-靶点-通路”网络,并对富集通路进行体外细胞实验验证。结果共鉴定出58个化学成分,含生物碱57个、有机酸1个。网络药理学共筛选出活性成分38个,“成分-疾病”交集靶点的蛋白质-蛋白质互作网络中有核心靶点38个;得基因本体条目258个,京都基因与基因组百科全书通路137条,主要包括雌激素信号通路、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路等。验证实验结果显示,CHCR作用于MCF-7细胞的半数抑制浓度为693μg/mL;150、300、600μg/mL的CHCR可显著降低磷酸化PI3K、磷酸化Akt、ERα蛋白和ESR1 mRNA的表达水平(P<0.01)。结论 CHCR抗ER阳性乳腺癌的作用可能与调控ER、PI3K/Akt通路有关,具有多成分、多靶点的作用特点。

RP—HPLC法同时测定白屈菜药材中血根碱、小檗碱和白屈菜红碱的含量

目的:建立白屈菜药材的质量标准。方法:采用高效液相色谱法,用 Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-1%三乙胺水溶液(25:75,三乙胺水溶液用磷酸调 pH 3)为流动相,流速:1 mL·min^(-1),检测波长263 nm,柱温:30℃。结果:血根碱在60～1200μg范围内线性良好,r=0.9996,平均加样回收率(n=3)为96.6%～99.9%,RSD 为0.6%～2.0%;小檗碱在30～600μg范围内线性良好,r=0.9999,平均加样回收率(n=3)为99.0%～104.1%,RSD 为0.8%～1.3%;白屈菜红碱在100～2000μg范围内线性良好,r=0.9998,平均加样回收率(n=3)为97.3%～100.8%,RSD 为0.7%～1 4%。结论:本试验同时测定白屈菜药材中血根碱、小檗碱、白屈菜红碱的含量,方法准确,灵敏,可靠。

白屈菜提取物抑制变形链球菌的实验研究

目的:研究白屈菜提取物白屈菜碱和白屈菜红碱对变形链球菌的抑制作用,探讨其防龋机制。方法:用二倍稀释法将白屈菜碱和白屈菜红碱等倍稀释为不同的浓度,用纸片扩散法测定其对变形链球菌的抑制作用,并用液体培养基测定其最低抑菌浓度(MIC),0.16%氯已啶溶液作为阳性对照。采用Spearman相关检验进行两组样本之间的相关分析。结果:白屈菜红碱乙醇溶液出现抑菌圈,而白屈菜碱乙醇溶液的各个浓度则无抑菌圈;100mg/ml的白屈菜红碱抑菌圈(25.8mm)大于对照组氯已啶溶液的抑菌圈(19.4mm);白屈菜红碱溶液浓度与变形链球菌抑菌圈大小之间具有高度相关性(r=0.99,P<0.01)。白屈菜红碱的最低抑菌浓度为0.78mg/ml。结论:白屈菜提取物白屈菜红碱有明显的抗菌作用,提示其可能具有较强的防龋作用。

白屈菜中白屈菜红碱的提取及抑菌活性

对白屈菜中白屈菜红碱的含量和提取工艺进行研究,通过单因素试验和正交试验确定超声波法辅助提取最佳工艺:以60%乙醇作为溶剂,料液比1:20(g/ml),在超声波功率为700W的条件下超声波辅助提取35min。白屈菜红碱提取物对甜瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、茄子黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒炭疽病菌、葡萄炭疽病菌、草莓灰霉病菌、番茄灰霉病菌和西葫芦菌核病菌等植物病原真菌菌丝的生长均具一定抑制作用。

白屈菜总生物碱对豚鼠的平喘作用

目的:观察白屈菜总生物碱的平喘作用。方法:采用磷酸组织胺-氯化乙酰胆碱、卵蛋白引喘诱发豚鼠喘息模型,观察药物对出现喘息性抽搐的潜伏期及抽搐跌倒动物数的影响;采用豚鼠离体肺支气管灌流和离体完整豚鼠气管毛细管试验,测定药物对气管张力的影响。结果:TACM可明显延长引喘潜伏期(P<0.05),减少抽搐跌倒动物数;明显增加肺支气管的灌流量(P<0.05);松弛离体完整气管平滑肌,并可抑制组织胺收缩气管平滑肌效应。结论:TACM有显著的平喘作用。

HPLC法测定白屈菜不同器官多种生物碱的质量比

采用高效液相色谱法分析白屈菜不同器官生物碱的种类及质量比.取白屈菜不同器官粉碎,以甲醇∶水溶液（4∶1,V∶V）热回流提取,提取液蒸干后用50%甲醇溶液溶解,滤过后采用HPLC分析.采用Diamonsil C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%三乙胺水溶液（24∶76,三乙胺溶液用磷酸调至pH至3）,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,检测波长为290 nm.白屈菜碱、白屈菜红碱、血根碱、小檗碱、黄连碱分离良好,各成分质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系（r〉0.999 6）,重现性良好,5种成分的RSD值（n=5）均小于2.0%;平均加样回收率（n=5）为97.78%~99.63%.白屈菜不同器官所含生物碱的种类有所差异,根、茎及果实中所含生物碱的种类较多,质量比较高.明确了白屈菜碱各器官所含主要生物碱种类,为白屈菜的合理开发和利用奠定了基础;所建立的白屈菜多种生物碱同时测定的HPLC方法稳定可靠,简便易行,可用于白屈菜药材及其制剂的质量评价.

高效液相色谱法测定白屈菜注射液中白屈菜碱的含量

目的:建立用高效液相色谱法(HPLC)测定白屈菜注射液中白屈菜碱的含量。方法:采用DiamonsilC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈0.01mol·L-1磷酸二氢钾梯度洗脱,柱温:35℃;流速:1mL·min-1;检测波长290nm。结果:白屈菜碱的线性范围为:0.1068～1.068μg,r=0.9996(n=6),平均回收率为99.12%,RSD为1.09%。结论:该方法稳定、结果准确,可作为白屈菜注射液的质量控制方法。

白屈菜中多种生物碱含量的高效液相色谱法测定

目的通过测定白屈菜中多种生物碱的含量,以求建立更加完善的白屈菜药材的质量标准。方法采用反向高效液相色谱法。色谱柱为Inertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈-1%三乙胺水溶液(23∶77,三乙胺水溶液用磷酸调pH至3),流速1 ml/min,柱温:35℃,检测波长:274 nm。结果白屈菜红碱、血根碱、黄连碱分别在0.013 4～0.252 0μg,0.076 0～0.684 0μg,0.141 6～2.548 8μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997,0.9999和0.9999。结论该方法准确、灵敏、可靠,重复性好,适用于对白屈菜药材的质量评价。

白屈菜总生物碱的祛痰止咳作用

目的 :观察白屈菜总生物碱 (TACM)的祛痰止咳作用。方法 :TACM 10 ,2 0 ,4 0mg·kg-1,ig给药 ,经小鼠气管段酚红排泌量法观察TACM的祛痰作用、电刺激猫的喉上神经引咳实验观察TACM的止咳作用。结果 :TACM明显增加小鼠气管段酚红排泌量 ,与空白对照组比较 ,差异具显著性 (P <0 .0 5 ) ;显著提高猫的致咳阈电压 ,与空白对照组比较 ,差异具极显著性 (P <0 .0 1) ,并持续 3h以上。结论 :TACM有明显的止咳祛痰作用 。

一测多评法测定白屈菜中5种生物碱的含量

目的:建立一测多评法测定白屈菜中5种生物碱的含量。方法:以白屈菜为研究对象,建立黄连碱与白屈菜红碱、白屈菜碱、血根碱、小檗碱的相对校对因子,用相对校正因子计算各成分的含量,并将一测多评法计算的含量结果与外标法计算的含量结果进行比较。结果:5批白屈菜药材中5种生物碱成分含量的一测多评计算值与外标法实测值之间无显著差异。结论:一测多评法可用于测定白屈菜中5种生物碱成分的含量。

大孔吸附树脂分离纯化白屈菜总生物碱的研究

采用紫外可见分光光度法测定白屈菜（Chelidonium majus）总生物碱的含量,比较了10种大孔树脂对白屈菜总生物碱的吸附和解吸性能,从中筛选出适合分离纯化白屈菜总生物碱的大孔吸附树脂,并对其吸附和解吸条件进行了探讨。结果表明,HPD600树脂为纯化白屈菜总生物碱的良好树脂,确定最佳吸附流速2.0 BV/h,吸附液pH对吸附影响较小,解吸剂为70%~80%乙醇。经HPD600树脂精制得到的白屈菜总生物碱相对含量为39.8%,该结果可为白屈菜总生物碱的开发利用提供理论依据。

HPLC-Q-TOF/MS鉴定白屈菜中异喹啉类生物碱

目的:利用HPLC-Q-TOF/MS分析技术快速、系统地鉴定白屈菜中异喹啉类生物碱。方法:采用XAqua C8色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量为0.3 m L·min-1;ESI源正离子模式检测。结合对照品的二级质谱及相关文献推测生物碱的结构。结果:从白屈菜的甲醇提取物中鉴定了18个生物碱,其中木兰箭毒碱(1)、北美黄连碱(4)、药根碱(12)、非洲防己碱(14)为首次在白屈菜中报道。结论:HPLC-Q-TOF/MS方法能快捷、准确地鉴定白屈菜中的化学成分,为白屈菜化学成分的进一步提取分离和药效物质基础的研究提供科学依据。

白屈菜红碱的分离纯化及其抑菌活性

采用大孔吸附树脂分离纯化白屈菜中白屈菜红碱,并对白屈菜红碱的抑菌效果进行了研究。结果表明,AL-2型大孔吸附树脂对白屈菜红碱具有良好的吸附和解吸性能,效果最佳,适宜的分离条件为吸附温度30℃,上样液浓度为0.9 mg/mL,上样流速为1.0 mL/min,样品洗脱乙醇体积分数为30%,以1.5mL/min速度洗脱时,洗脱液量为4BV为洗脱终点;纯化后的白屈菜红碱对甜瓜枯萎病病菌、西瓜枯萎病病菌、茄子黄萎病病菌、黄瓜枯萎病病菌、辣椒炭疽病病菌的菌丝生长均具一定抑制作用。

白屈菜红碱对大鼠的长期毒性试验研究

目的:观察连续给予抗肿瘤药物白屈菜红碱对大鼠的长期毒性。方法:采用Wistar大鼠,白屈菜红碱组(12.6、8.4、5.6和3.7 mg/kg)及溶剂对照组,每组20只。腹腔注射给药6 d,停药8 d为1个周期,连续给药3个周期,间歇给药结束后12.6 mg/kg剂量组解剖大鼠6只,8.4 mg/kg剂量组解剖大鼠8只,其余每组解剖大鼠12只,停药观察4周后解剖各组剩余大鼠,进行一般状况、体质量、饲料摄入量、血液学、血清生化学、尸体解剖和脏器系数以及病理组织学检查。结果:大鼠在给药后,12.6和8.4 mg/kg剂量组立即出现腹膜刺激征,一周之内出现消瘦和被动体态等,体质量增长缓慢,摄食量减少,甚至死亡。与对照组比较,白屈菜红碱5.6 mg/kg以上剂量组大鼠红细胞系各项指标降低,白细胞数及白细胞分类异常,凝血时间延长,葡萄糖降低,碱性磷酸酶增加(P<0.05或<0.01);并可观察到肺脏瘀血,腹腔大量血性腹水,脏器粘连并严重变形,肝脏和脾脏明显增大,前列腺和睾丸系数明显减小(P<0.05或P<0.01),睾丸生精上皮细胞和精子明显损伤等。结论:白屈菜红碱在≥5.6 mg/kg剂量下,可引起大鼠局部刺激和药物毒性所引起的全身性异常反应,以致部分大鼠死亡。

白屈菜多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的:探索白屈菜多糖对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用.方法:通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,以灌服生理盐水小鼠为空白对照组,灌服香菇多糖小鼠为阳性对照组,灌服不同剂量的纯化后白屈菜多糖小鼠为实验组,分别灌服等体积上述溶液,观察腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数以及溶血素和溶血空斑的形成情况,探讨白屈菜多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响.结果:精制白屈菜多糖可显著提高免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,促进溶血素和溶血空斑形成.结论:白屈菜多糖能显著提高免疫低下小鼠的免疫活性,有进一步研究的价值.

白屈菜对大鼠软组织损伤中炎性因子1L-1β的影响

为研究满药白屈菜对大鼠急性软组织损伤模型中炎性因子1L-1β的影响,探究白屈菜对急性软组织损伤的治疗机制,选取48只雄性SD大鼠,随机分为4个大组,即实验组(白屈菜组)、药物对照组(扶他林组)、模型对照组、空白对照组。采取打击法造模,并在造模成功后1 h开始敷药,于第1、3、7、10 d采用酶联免疫法检测损伤组织中1L-1β的浓度。结果显示大鼠损伤肌肉组织中1L-1β、软组织损伤证候指数评分在造模后第3 d达到高峰。在造模后第3、7 d,白屈菜组、扶他林组低于模型对照组,而白屈菜组与扶他林组无显著性差异。因此,白屈菜能够抑制大鼠急性软组织损伤后组织释放IL-1β,可以有效缓解损伤局部组织炎症反应,对治疗急性软组织损伤有一定疗效。