百蕊草扩繁和栽培利用研究进展

百蕊草(Thesium chinense Turc.)是我国重要的中草药植物,具有清热解毒功效,有“植物抗生素”之美誉。针对百蕊草半寄生性、种子深度休眠、植株生长期短、休眠期长及繁殖效率低等特点,本文综述了百蕊草寄生生物学特性、实生植株的生长、组织培养快速繁殖、栽培利用及相关基础研究进展,得出限制人工栽培种植百蕊草的因素主要有:气候、土壤类型、种子萌发和植株根部养分积累量等,并提出相关栽培方法,为深入研究百蕊草组培扩繁和栽培利用提供参考依据。

百蕊草无性系建立与瓶外生根研究(英文)

[Objective] The aim of this study is to establish the rapid micro-propagation system in Thesium chinense Turcz.[Method]With stem fragments of wild Thesium chinense Turcz as explants,different culture media were designed to conduct induction culture,strengthening plantlet culture and in vitro rooting.[Result]The optimum medium for inducing clustered shoots was determined to be MS medium appended with 1.5 mg/L 6-BA,0.01 mg/L NAA and 0.3 mg/L 2,4-D;in addition,60 mg/kg ABT was suitable for rooting,by which the percentage of rooted plantlets reached 76.6%.[Conclusion]This study simplified the procedures of tissue culture in Thesium chinense Turcz and enhanced the proliferation rate,providing basis for artificial cultivation and resource protection of Thesium chinense Turcz.

百蕊草野生苗与组培苗抑菌抗炎实验比较的研究

通过观察百蕊草野生苗和组培苗提取物的体外抑菌和对二甲苯致小鼠耳肿胀的急性炎症、大鼠棉球肉牙肿的慢性炎症和蛋清所诱发的大鼠足肿胀炎症的影响。研究百蕊草野生苗和组培苗的抗炎抑菌作用。结果表明:百蕊草野生苗与组培苗提取物在体外对大肠杆菌、金葡萄球菌、苏云金杆菌均有一定的抑制作用;两组百蕊草提取物对几种炎症均有明显的抑制作用。其抗炎抑菌作用具有等效性。

苯酚-硫酸法测定百蕊草中多糖的含量

目的 建立苯酚-硫酸法测定百蕊草多糖的含量。方法 采用60％乙醇除去黄酮类成分，再以水提醇沉的方法分离纯化百蕊草多糖，最后用苯酚-硫酸法测定百蕊草多糖的含量。结果 在0．01—0.07mg／mL内，浓度与吸收度呈良好线性。回归方程：A=15．644C-0．0053，r=0．9995，平均回收率为99．6％，RSD为1．92％（n=9）。百蕊草多糖的含量为15．9％，RSD为1．56％（n=5）。结论 方法简便，结果准确，为百蕊草多糖的进一步研究奠定良好的基础。

百蕊草总黄酮的含量测定

目的 建立百蕊草总黄酮中黄酮类成分含量测定的方法。方法 以百蕊草素Ⅰ为对照品 ,三氯化铝显色 ,选择波长 4 0 1nm ,分光光度法测定。结果 回归方程 y =- 6 4 5× 10 -3 +2 0 4x(r=0 9999) ,总黄酮含量为 6 1 8% ,RSD为 1 2 3% ,加样回收率为 10 1 3% ,RSD为 1 6 4 %。结论 测定方法简便易行 ,结果较满意 ,可作为百蕊草总黄酮质量控制的方法。

白蕊草组织培养和快速繁殖的研究

通过对白蕊草组织培养的培养基种类、激素配比、添加物汁液、碳源的研究 ,得出适合白蕊草侧芽分化生长的最佳培养基为 MS+6 - BA2 .0 mg/ L +NAA0 .5 mg/ L +狗牙根汁液。诱导愈伤组织以 2 ,4 - D浓度在 0 .5 mg/ L -2 m g/ L之间最佳。碳源以蔗糖 ,浓度 3%最佳。生根实验表明 :较低浓度的生长素不利于生根 ,最佳生根培养基为MS+6 - BA 0 .5 mg/ L +NAA2 m g/ L +狗牙根汁液或 MS+6 - BA 0 .5 m g/ L +IBA2 m g/ L

百蕊草中总黄酮的提取工艺研究

用正交试验法优选百蕊草中总黄酮的提取工艺.以50 g原药材的总黄酮提取量为评价指标,选择提取用水量(倍)、提取时间(h)、提取次数(次)、醇沉浓度(%)为考察因素,采用正交试验法L9(34)确定百蕊草中总黄酮的最佳提取工艺,采用分光光度法对干浸膏中总黄酮的含量进行了测定,检测波长274 nm.最佳提取工艺条件为提取所用水量为15倍,提取次数为2次,回流提取时间为1 h,醇沉浓度为75%,芦丁在2.06-12.22μg/Ll浓度范围之内呈良好的线性关系.平均回收率为99.57%,RSD为0.83%.总黄酮正交提取工艺的研究,结果比较可靠,含量测定方法简便、准确,可用于百蕊草干浸膏中总黄酮的含量测定.

正交设计优选百蕊草的提取工艺

目的优选百蕊草的最佳提取工艺。方法采用正交试验法,以干膏得率及山奈酚含量为指标,考察溶剂浓度、溶剂用量、提取时间以及提取次数的影响,确定最佳提取工艺。结果最佳提取工艺参数为:加8倍量80%乙醇,提取3次,每次1h。结论优选的提取工艺切实可行,可以作为百蕊草的提取工艺。

抗菌中草药百蕊草的研究进展

百蕊草是一种有着较高医用价值的广谱抗菌中草药。阐述百蕊草的有效成分、药理作用、有效成分的提取工艺及组织快繁技术的可行性等方面的研究近况,提出运用现代中医药研究的新方法及新技术研究比较天然与人工繁殖的百蕊草组织在成分上的差异,清楚了解其抗菌消炎作用机制,以加快百蕊草有效成分生物合成的产业化发展。

百蕊草生物碱成分的分离与鉴定

目的研究百蕊草中的生物碱成分。方法应用多种色谱手段进行分离纯化,通过IR、MS、HR-MS、NMR、2D-NMR技术鉴定化合物结构。结果从百蕊草总生物碱部位分离得到3个化合物,分别鉴定为N-甲基金雀花碱(1)、白金雀儿碱(2)和槐果碱(3)。结论化合物N-甲基金雀花碱、白金雀儿碱、槐果碱均为首次从该植物中分离得到。

百蕊草药材高效液相特征图谱的研究

目的建立百蕊草高效液相色谱(HPLC)特征图谱,为百蕊草药材的质量控制提供依据。方法采用ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈(A)—0.2%甲酸(B)为流动相,梯度洗脱,检测波长为265 nm,柱温35℃,流速0.4 m L·min-1,进样2.0μL。结果百蕊草药材HPLC特征图谱中主要成分得到有效分离,得到12个共有峰,选其中4个作为其特征峰。10批百蕊草药材的特征图谱与对照图谱相似度均在0.9以上,可用于百蕊草药材的定性鉴别。结论建立了百蕊草药材特征图谱,该方法简单,准确,重复性好,可用于百蕊草药材的质量控制。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS分析百蕊草醇提物的化学成分

为明确百蕊草醇提物中的化学成分,本研究采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对百蕊草醇提物的化学成分进行分析鉴定,在正、负离子模式下采集质谱数据,采用Agilent Mass Hunter B.07.00软件对采集的准分子离子峰信息进行分析,选择误差在5×10^(-6)内的分子式与TCM数据库初步比对,同时参考百蕊草相关文献、结合对照品比对、化合物精确相对分子质量、质谱碎片信息对化合物进一步鉴定。通过液质联用技术共鉴定了百蕊草醇提物54个化学成分,主要包括16个黄酮类、10个生物碱类、5个二萜类、5个有机酸类和其他类化合物,其中首次从百蕊草醇提物中发现氧化苦参碱、4-O-阿魏酰基奎宁酸、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-新橙皮苷等25个化学成分,并进一步探讨了生物碱类、黄酮类和二萜类化合物的质谱裂解规律。通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术快速对百蕊草醇提物的化学成分进行了较为系统而全面的分析,为其探究药效物质基础、临床应用及质量控制提供参考。

不同干燥方式对百蕊草中两种黄酮醇苷含量影响

研究不同干燥方法对百蕊草及百蕊草不同部位中槲皮素醇苷和山柰素醇苷含量的影响和百蕊草不同部位中两种黄酮醇苷的含量分布。采用阴干、晒干、105℃杀青后80℃烘干、霉变后80℃烘干4种干燥方式及80℃,60℃,40℃直接烘干3种不同烘干温度处理百蕊草样,并用80℃烘干百蕊草叶、茎、叶、果实、根不同部位样,测定其酸水解液中槲皮素及山柰素含量,计算其两种黄酮醇苷含量。4种不同干燥方式对百蕊草中两种黄酮醇苷含量影响为烘干=晒干>阴干>酶变,3种不同烘干温度对百蕊草中两种黄酮醇苷含量影响为:40℃烘干样<80℃烘干样=60℃烘干样。百蕊草不同部位样中山奈素醇苷分布为叶>茎>种子>根;而其槲皮素醇苷分布由高至低则为:茎>叶>种子>根。明确了百蕊草根、茎、叶及种子中槲皮素及山柰素醇苷的分布,其中叶中含量最高,同时确定百蕊草最佳干燥方式为烘干,且80℃及60℃烘干温度均能有效地保持百蕊草中两种黄酮醇苷成分。

百蕊草愈伤组织培养影响因素研究

[目的]对影响百蕊草愈伤组织培养的因素进行研究。[方法]以百蕊草幼嫩枝条和叶片为外植体,研究不同浓度6-BA、NAA、2,4-D或其组合,碳源以及pH等因素对百蕊草愈伤组织生长的影响。[结果]3种植物生长调节剂和碳源对愈伤组织的生长都有促进作用,对愈伤组织诱导生长的培养基最佳组合为MS＋6-BA 1 mg/L＋NAA 0.15 mg/L＋2,4-D 0.1 mg/L,碳源中蔗糖显著促进了百蕊草愈伤组织的增长,以30 g/L的蔗糖为最佳;pH 5.8~6.0有利于愈伤组织的诱导和生长。[结论]该研究为后续研究百蕊草细胞悬浮培养体系的建立提供材料。

百蕊草的开发利用研究进展

百蕊草是多年生半寄生草本植物,具较强抗菌消炎作用,被誉为"植物抗生素"。根据近年来的研究成果,整理概述了百蕊草的生物学特征、植物化学、指纹图谱、药理作用以及临床应用等方面的研究成果,为进一步研究与开发利用百蕊草提供科学依据。

百蕊草离体快繁体系技术优化

为优化百蕊草离体培养快速繁殖技术,本试验以野生百蕊草的叶片及幼嫩茎段为外植体,通过研究外植体消毒时间、不同浓度激素配比对芽苗诱导、增殖、壮苗的影响,以提高外植体诱导率和瓶苗增殖率。结果表明:(1)75%的酒精溶液消毒10 s后0.1%的氯化汞溶液浸泡8 min,外植体消毒效果最佳;(2)最适初代培养配方为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.13 mg·L-1 NAA,增殖继代培养配方为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 NAA,健壮无根苗培养基配方为MS+0.5 mg·L-1 NAA。

百蕊草有效成分提取工艺优化及生物活性检测

为进一步拓展天然药物的应用领域,以百蕊草为原料,采用单因素和响应曲面法优化百蕊草有效成分提取工艺条件,测定提取物抗氧化性、生物安全性、抑菌性、抗炎性。结果表明:在乙醇浓度为65%、料液比为1∶40 g/mL、温度为65℃、超声时间为50 min的条件下,有效成分提取当量(以黄酮提取当量计)为28.2 mg/g;经萃取及层析纯化后的提取物在400μg/mL时对DPPH、ABTS自由基的清除率分别为93.5±0.31%、98.96±0.33%;对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为10~12.5 mg/mL;在1 mg/mL浓度范围内无细胞毒性,对巨噬细胞具有促增殖作用,能够抑制LPS诱导RAW264.7分泌NO,表现出良好的抗炎活性。研究结果说明提取物在1 mg/mL浓度范围内仍具有较好的生物活性,能为百蕊草活性成分的开发应用提供参考。

基于TCMGIS的百蕊草产地适宜性定量分析

目的:通过对野生百蕊草标本的生态因子研究,寻找适宜百蕊草生长特性的潜在分布区域。方法:利用中药材产地适宜性分析地理信息系统(TCMGIS)对699个百蕊草标本地理分布信息进行研究,分析百蕊草不同生态相似度下适宜产地空间的分布状况。结果:百蕊草适宜分布区主要位于我国温带季风气候区和亚热带季风气候区,且处于我国湿润区和半湿润区;生态相似度100%的最适生长区域较为广泛,分布在30个省区的2049个县市,面积总和为3183197.7 km^2,生态适宜区主要集中在我国西南、东北、华东、华北、华中等地区。结论:为百蕊草的分布研究、野生资源保护、人工引种栽培和新产区预测等方面提供参考。

百蕊草的研究进展

中药百蕊草具有清热解毒、消肿之功效,目前,相关研究主要涉及其生物特性、加工炮制、化学成分及其提取分离、药理作用4个方面:百蕊草共有25科82种寄主,半寄生特性是其人工栽培的一大难点;百蕊草的炮制加工方法为洗净,切段后干燥;已分离鉴定出66种化合物,其中黄酮类化合物31种,生物碱类9种,二萜类化合物5种,有机酸类6种,杂类化合物15种;体内外研究表明,百蕊草具有抑菌、抗炎镇痛、抗氧化、抗癌等药理活性。尽管现代研究已经分离鉴定了包括黄酮、酚酸、二萜在内的多种成分,但已知的化合物数量十分有限,且对各类活性成分的生物合成、转运调控过程及分子机制也知之甚少,亦无官方药材质量控制标准。此外,野生百蕊草与栽培品种的功效是否一致缺少定论。故今后亟须进一步探讨百蕊草药材来源与生物活性成分和防治疾病作用的关系,推动百蕊草用药的规范化和科学化,为药材的质量控制和优良种植的选育提供参考。

百蕊草药材与标准汤剂量值传递规律研究及分析

目的 建立百蕊草Thesii Herba标准汤剂的UPLC特征图谱及其指标成分的含量测定方法;研究百蕊草药材与标准汤剂特征图谱的变化,并分析指标成分百蕊草素I在药材-标准汤剂的量值传递规律。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,检测波长330、270 nm,柱温30℃,建立特征图谱与含量测定方法。以出膏率、含量及转移率、特征图谱共有峰传递数为主要评价指标,分析百蕊草标准汤剂的量值传递规律。结果 19批百蕊草药材、标准汤剂与各自的对照特征图谱相似度分别为0.986~1.000、0.989~1.000。百蕊草标准汤剂特征图谱标定6个共有峰,药材中的5个共有峰全部转移至标准汤剂并被指认,其中4个共有峰采用对照品比对确认,分别为5-O-阿魏酰奎宁酸(峰2)、4-O-阿魏酰奎宁酸(峰3)、百蕊草素I(峰5)、山柰酚-3-O-(2″-O-α-鼠李糖基-6″-O-丙二酰基)-β-葡萄糖苷(峰6)。19批标准汤剂的平均出膏率为27.45%,百蕊草素I从药材-标准汤剂的平均转移率为89.48%,出膏率与转移率均未出现离散数据。结论 建立的标准汤剂特征图谱及含量测定方法稳定可靠,百蕊草素I从药材到标准汤剂的量值传递结果表明,百蕊草标准汤剂的质量得到了较好地控制,其制备工艺具有科学性、可行性,为百蕊草配方颗粒的质量标准制定奠定基础。