Mechanistic action of the acute toxicity of Bajitian(Morinda officinalis)in zebrafish embryos

Objectives:To investigate acute toxicity of Bajitian(Morinda officinalis)in zebrafish embryos.Methods:Zebrafish embryos at 48-h post fertilization(hpf)were exposed to Bajitian ethanol extract for72 h.The causative action of a delay in yolk sac absorption by Bajitian was investigated by RT-PCR analysis of lipid metabolism-related microsomal triglyceride transfer protein(MTP),apolipoprotein CII(ApoC2)and lipogenesis-related liver x receptor(LXR)genes.The effect of Bajitian eliciting an inflammatory response was studied by exposing 72 hpf myeloperoxidase(MPO):GFP transgenic zebrafish embryos to Bajitian extract for 4 h.Assessment was done by TUNEL,caspase-3/7,and RT-PCR analysis of the apoptosis related pathway B-cell lymphoma 2 associated X protein(Bax),Nuclear factor kappa-lightchain-enhancer of activated B cells(NF-k B)genes,neutrophil development-related stem cell leukaemia(SCL)and transcription factor PU.1 genes,to reveal the causative action of Bajitian reducing neutrophils.Results:RT-PCR analysis found that Bajitian extract had no effect on the expression of MTP or ApoC2 genes,but upregulated LXR gene,which might explain the delay in yolk sac absorption.Analysis of the inflammatory response showed that compared with negative controls,Bajitian extract significantly(P<.05)reduced the number of neutrophils in MPO:GFP embryos.TUNEL,caspase-3/7,and RT-PCR analysis of Bax and NF-k B genes found that Bajitian extract did not trigger the cell apoptosis.Further RT-PCR analysis found that Bajitian extract did not affect SCL expression,but did lead to down-regulation of PU.1.The inhibition of neutrophil development/differentiation may explain the decline in the total number of neutrophils following Bajitian treatment,which could be attributed to the anti-inflammatory effects found clinically for this drug.Conclusions:This study demonstrated that Bajitian caused a delay in yolk sac absorption and a decrease neutrophil in zebrafish embryos,which may be related to the inhibition of neutrophil development.

柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量及营养价值评价

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以0.1 mol/L无水乙酸钠-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长为254 nm,测定氨基酸含量;通过氨基酸比值、氨基酸比值系数、氨基酸比值系数分等评价其营养价值,并采用系统聚类和主成分分析对其进行分类分析。结果表明,15种氨基酸线性关系良好,相关系数r≥0.9996。16份巴戟天氨基酸总含量为17.87~102.15 mg/g,均检测到15种氨基酸,其中包含6种必需氨基酸,占总氨基酸含量的14.15%~32.06%;8种药用氨基酸,占总氨基酸含量的45.20%~56.31%。限制氨基酸为苏氨酸和亮氨酸,氨基酸比值系数分为33.87~61.31。不同巴戟天样品氨基酸组成相关性显著;主成分分析提取2个主成分,累计方差贡献率为97.085%,可将16批巴戟天分为三类。该实验测定方法简单有效,可同时分离测定15种氨基酸,精密度与重复性良好,有较高的药用价值,可为巴戟天的品质分析和资源开发利用提供参考。

不同产地巴戟天HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:利用HPLC指纹图谱及化学模式识别对巴戟天药材进行评价。方法:采用Shodex Asahipak NH2P-504E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,使用蒸发光散射检测器(ELSD)。利用相似度评价、聚类分析和主成分分析等化学模式识别方法,对不同产地的巴戟天药材进行分析。结果:所建立的HPLC指纹图谱共识别了18个共有峰,经与对照品图谱比较,鉴定其中的4个共有峰分别为果糖、蔗糖、蔗果三糖和耐斯糖。6个产地巴戟天的相似度在0.861~0.995;经聚类分析和主成分分析,6个产地巴戟天共聚为3类。结论:本研究采用的巴戟天HPLC指纹图谱及化学模式识别技术可反映出不同产地的巴戟天样品的差异,可为巴戟天的质量控制提供参考。

基于BDNF/CREB信号通路探讨巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤的影响

目的研究巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/细胞内环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine phosphate response element binding protein,CREB)信号通路的影响。方法从40只SD大鼠随机选取其中10只为正常组,对其余大鼠构建慢性不可预知温和应激模型后,再将其分为3组,即模型组,盐酸氟西汀组(3.17 mg·kg^(-1)),巴戟天组(3.17 g·kg^(-1))。持续灌胃后给药8周,1次/d,并先后在造模前、造模后和给药后开展了行为学实验,以判断大鼠的抑郁情况。通过苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)研究大鼠海马形态学改变,用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)测定大鼠海马BDNF蛋白表达,用HE染色研究大鼠海马组织病理损伤并评分,用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB mRNA相对表达,用蛋白免疫印迹法(western blot,WB)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB蛋白的相对表达。结果与正常组比较,模型组大鼠活动总路程显著减少(P<0.05),自主游泳时间显著减少(P<0.05),悬尾挣扎时间显著减少(P<0.05)。HE染色结果中表明海马神经元组织受到破坏,病理损伤评分显著下降(P<0.05),免疫组织化学染色中海马BDNF表现显著下降(P<0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达显著下降(P<0.05);与模型组对比,盐酸氟西汀组和巴戟天组大鼠活动的总里程明显提高(P<0.05),自主游泳时间显著增加(P<0.05),悬尾挣扎时间显著增加(P<0.05),HE染色结果表明海马神经元组织明显复原,病理损伤评分增加(P<0.05),免疫组织化学染色中BDNF表现显著增加(P<0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达明显增加(P<0.05)。结论经慢性应激刺激后,巴戟天可能通过激活BDNF/TrkB/CREB信号通路对抑郁大鼠海马神经元损伤发挥神经保护作用,改善其抑郁样行为。

巴戟天多糖对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响

试验旨在研究饲粮中添加巴戟天多糖(Morinda officinalis polysaccharide,MOP)对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响。选取6日龄健康雌性文昌鸡600只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,各试验组分别在基础饲粮中添加250、500、1000、2000 mg/kg的MOP。试验期40 d。结果表明:与对照组相比,各试验组十二指肠和空肠绒毛高度/隐窝深度均显著提高(P<0.05),500、1000、2000 mg/kg MOP组回肠绒毛高度/隐窝深度显著提高(P<0.05);250、500、1000 mg/kg MOP组十二指肠紧密连接蛋白Occludin mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),1000、2000 mg/kg MOP组十二指肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);250、500 mg/kg MOP组盲肠观测物种数和Ace指数显著提高(P<0.05);各试验组Shannon指数均显著上升(P<0.05);2000 mg/kg MOP组的Simpson指数显著提高(P<0.05);250、500、1000 mg/kg MOP组的Chao1指数均显著增加(P<0.05)。各试验组盲肠弯曲杆菌门相对丰度均显著降低(P<0.05),1000、2000 mg/kg MOP组文昌鸡盲肠另枝菌属相对丰度显著降低(P<0.05),有益菌副拟杆菌属相对丰度显著提高(P<0.05);2000 mg/kg MOP组链球菌相对丰度显著降低(P<0.05);250、2000 mg/kg MOP组拟杆菌属相对丰度显著降低(P<0.05),CHKCI001菌属相对丰度显著提高(P<0.05)。研究表明,在文昌鸡的饲粮中添加适量MOP可改善肠道黏膜形态,提高十二指肠紧密连接蛋白Occludin mRNA表达量,降低炎症因子TNF-αmRNA表达量,增加盲肠微生物Alpha多样性和均匀度,增加肠道有益菌含量,促进肠道健康,MOP添加量以500 mg/kg为宜。

巴戟天多糖对炎性微环境牙周膜成纤维细胞FN及FN-EDA表达的影响

目的:探讨巴戟天多糖(morinda officinalis polysaccharides,MOP)对炎性微环境牙周膜成纤维细胞纤连蛋白(fibronectin,FN)及含额外结构域A的纤连蛋白(fibronectin containing extra domain A,FN-EDA)表达的影响。方法:将36只大鼠随机分为对照组(n=12)和模型组(n=24),模型组采用正畸丝结扎法建立牙周炎,3周后每组各取6只大鼠通过Micro-CT确认建模完成;剩余模型组大鼠随机分为牙周炎组、生理盐水组(NS组)和MOP组。MOP组于大鼠左侧上颌第一磨牙腭侧注射MOP(200 mg/kg、3 d,50μL、4周),NS组注射等体积NS,牙周炎组不做任何处理。取大鼠左侧上颌骨组织,采用H-E染色观察牙周组织病理改变,免疫组织化学染色检测FN、FN-EDA的表达。体外培养牙周膜成纤维细胞,CCK-8法检测MOP对细胞活性的影响。将第4代细胞分为对照组、炎症组(10 mg/mL脂多糖)及实验组(12.5μg/mL MOP,12.5μg/mL MOP+10 mg/mL脂多糖)。利用qRT-PCR及Western印迹法检测FN和FN-EDA的表达变化。采用Prism 8.0软件包对数据进行统计学分析。结果:体内实验中,MOP组较牙周炎组和NS组FN-EDA表达显著下降(P<0.05),炎细胞浸润减少;但各组FN表达量未见统计学差异。体外实验中,与对照组相比,炎症组FN-EDA mRNA和蛋白表达量显著增高(P<0.0001);MOP显著降低炎症细胞FN-EDA表达,但对FN表达无明显影响。结论:FN-EDA在炎症牙周膜组织和细胞中表达升高,MOP可能通过下调FN-EDA而发挥炎症抑制作用。

基于药理学分析巴戟天治疗阿尔茨海默病的机制

目的:基于网络药理学、分子对接和GEO数据分析巴戟天治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的潜在靶点和作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),获取巴戟天的主要活性成分,用SwissTargetPrediction获取巴戟天全部作用靶点。从DrugBank、PathCard、Chemogenomic Database和PubChem数据库获得AD相关靶点。使用韦恩图取交集,得到巴戟天治疗AD的共同作用靶点。利用Cytoscape3.8.0构建靶点的“成分-靶点”网络图,并分析靶点的相互作用PPI网络图、基因本体论(GO)和KEGG信号通路等。使用Autodock对关键成分和靶点进行分子对接,并用Pymol和Discovery Studio展示对接结果。最后利用GEO数据库Alzdata分析关键靶点基因在AD中的表达。结果:预测得到巴戟天的50种主要活性成分,636个作用靶点,674个AD相关靶点,其中巴戟天治疗AD共同靶点124个。GO富集分析得到蛋白质磷酸化、磷酸化的正调控、细胞对氮化合物的反应、水解酶活性的调节、细胞对化学刺激的反应。KEGG富集分析显示阿尔茨海默病为最显著的通路。分子对接显示,巴戟天的5个核心成分2-羟基-1,5-二甲氧基-6-(甲氧基甲基)-9,10-蒽醌、1-羟基-3-甲氧基-9,10-蒽醌、大黄素-A、甲基异茜草素、甲基异茜草素-1-甲醚和3个核心靶点EGFR、PARP1、FTO的结合较好,并且Egfr在AD病人中显著(P<0.05)上调表达,Parp1和Fto在AD病人中显著(P<0.05)下调表达。结论:巴戟天可能通过多个成分、多个靶点、多个通路,参与调控AD疾病进程。

施用复合肥对巴戟天产量、养分吸收和寡糖累积量的影响

【目的】研究复合肥施用量对巴戟天产量、养分吸收和主要有效成分寡糖累积量的影响,为巴戟天的施肥管理提供理论依据。【方法】以巴戟天为研究对象,通过盆栽试验,设置每株施用复合肥0、2、4、6、8和10 g(CK、T1、T2、T3、T4和T5)共6个处理,测定巴戟天在不同施肥处理下的产量、养分含量和寡糖含量,分析各指标间的相关性,并运用主成分分析方法进行综合评价。【结果】施用复合肥可以显著提高巴戟天产量和N、P、K含量,并有利于提高寡糖的累积量。其中,单株施肥量为6 g处理的巴戟天产量和寡糖总累积量最高,与CK相比,分别提升114.47%和75.36%。施肥在一定程度上降低了巴戟天的寡糖含量,与CK相比,降幅最高达35.65%。巴戟天对复合肥中养分的利用效率表现为N>K>P,其中T3处理N、P、K累积量均高于其他处理。影响巴戟天寡糖累积量的最关键因素是产量,巴戟天产量与全株N/P/K含量、4种寡糖累积量呈显著或极显著正相关,但耐斯糖、1F−果呋喃糖基耐斯糖含量与产量、全株N/P/K含量呈显著或极显著负相关。主成分分析的综合得分由高到低为T3>T5>T4>T2>T1>CK,T3处理最佳。【结论】建议巴戟天的种植以N肥为主,适量补充K和P肥,适当施肥可显著提高巴戟天药材产量和寡糖累积量。

中药巴戟天抗骨质疏松症作用机制的研究进展

目的 综述巴戟天的抗骨质疏松作用研究进展,为骨质疏松症的临床治疗提供有价值的建议和新的思考方式。方法 通过在中国知网、万方、PubMed等数据库中检索近5年巴戟天及其有效成分在预防和治疗骨质疏松症方面的作用及机制的临床及实验研究的相关文献,并进行系统性总结。结果 巴戟天能够通过促进成骨细胞的增殖分化、发挥抗炎、类雌激素样作用,并通过OPG/RANK/RANKL通路抑制骨吸收、调节脂代谢等多种途径发挥抗骨质疏松作用。结论 巴戟天抗骨质疏松机制愈趋明确,但仍缺乏深入研究。

巴戟天水提液对双酚A染毒小鼠性激素及受体表达的影响

目的探讨巴戟天水提液对双酚A(BPA)染毒小鼠性激素及受体表达的影响。方法将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组和巴戟天水提液低、中、高剂量组(20、40、60 mg/kg),每组12只。模型组和巴戟天水提液各剂量组小鼠灌胃BPA[50 mg/(kg·d),每天1次,连续4周]以建立BPA染毒模型。造模后,各药物组小鼠灌胃相应药液,每天1次,连续4周。末次给药后,称定各组小鼠的体重和睾丸质量,观察其睾丸组织病理改变,检测其血清性激素[黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)]含量和睾丸组织中LH受体(LHR)、FSH受体(FSHR)mRNA及蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠睾丸组织存在结构变性,生精细胞与支持细胞之间连接松散、出现明显裂隙,且生精细胞数量减少;睾丸组织中LHR、FSHR mRNA及蛋白的表达均显著下调(P<0.01),但其体重、睾丸质量和血清LH、FSH含量均无明显变化(P>0.05)。与模型组比较,巴戟天水提液各剂量组小鼠睾丸组织病理改变均有不同程度改善;睾丸组织中LHR、FSHR mRNA及蛋白的表达亦有不同程度上调(P<0.05或P<0.01),且部分指标水平与对照组相当(P>0.05),但其体重、睾丸质量和血清LH、FSH含量无明显变化(P>0.05)。结论巴戟天水提液对BPA染毒小鼠睾丸损伤有一定的改善作用,可能与其提高LHR、FSHR蛋白及mRNA的表达有关。

巴戟天提取物对地塞米松诱导小鼠肌少症的治疗效果及作用机制研究

目的:旨在探究巴戟天提取物(MoE)在地塞米松(Dex)诱导的肌少症小鼠中的治疗效果及可能作用机制。方法:首先利用网络药理学方法研究巴戟天的药效成分、重要靶点并富集通路,以预测MoE的作用机制。在动物实验中,50只KM小鼠随机分为5组(control、sarcopenia、MoE-H、MoE-M、MoE-L)。除control组,其他组皮下注射Dex 45 d诱导形成肌少症,3个治疗组同时经口给予不同剂量的MoE。实验过程中定期检测动物体重、运动能力(跑台和拉力计)和体成分。处死动物后计算后肢肌肉系数,进行组织学及相关基因表达检测。结果:网络药理学结果表明MoE可能通过上调IGF-1/AKT/mTOR信号通路来治疗肌少症。动物实验结果显示MoE显著逆转Dex导致的小鼠体重、肌肉系数的下降,提升运动能力,改善组织学病变,上调了IRS-1、mTOR、MFN2、OPA1、MYOD、MYOG等基因的表达,下调了Atrogin-1、MuRF-1、MSTN等基因的表达。结论:MoE对Dex引起的肌肉萎缩具有治疗作用,可改善肌肉组织学形态,其作用机制可能是激活IGF-1/AKT/mTOR通路。

基于表型和分子标记分析24份巴戟天遗传多样性

【目的】广东省德庆县是道地药材巴戟天的产地,该文对广东德庆不同地区的24份巴戟天进行了种质资源的遗传多样性分析。【方法】以德庆县各地收集来的24份巴戟天资源为研究对象,使用主成分分析和SRAP、CDDP两种分子标记方法对24份巴戟天材料进行遗传多样性分析。【结果】在表型分析中,基于主成分分析的聚类图发现,官圩镇和高良镇、凤村镇和高良镇分别聚类至4个类群中。此外,18对SRAP引物组合和16条CDDP引物扩增后分别获得100条和98条总条带,其中SRAP多态性条带为50条,多态性比率达50%,平均遗传相似系数(GS)为0.87,遗传相似系数变化范围为0.71~0.97;CDDP多态性条带为80条,条带之间多态性比率达79.0%,各种质间遗传系数范围为0.71~0.96,平均遗传相似系数为0.86,且当系数为0.82时,两种分子标记结果均表明高良镇、官圩镇和凤村镇的种质之间具有一定的相似性。【结论】结合表型和分子标记聚类结果,高良镇和官圩镇、高良镇和凤村镇的亲缘关系最近,SRAP和CDDP两种分子标记方法对巴戟天遗传多样性的结果具有一定的差异,而联合分析可以更好地反映巴戟天遗传多样性研究及其资源的系统发育关系。

基于分子对接技术探讨巴戟天改善子宫内膜容受性的机制

目的运用分子对接技术分析巴戟天改善子宫内膜容受性的作用机制。方法将60只Wistar雌性大鼠随机分为正常组、模型组、枸橼酸氯米芬组、巴戟天组,每组15只。模型组、枸橼酸氯米芬组和巴戟天组构建不孕症大鼠模型;正常组、模型组给予生理盐水2 mL灌胃,1次/d;枸橼酸氯米芬组给予0.83 mg/mL枸橼酸氯米芬溶液2 mL灌胃,1次/d;巴戟天组给予0.5 g/mL巴戟天溶液2 mL灌胃,2次/d。给药15 d后取大鼠子宫检测,比较子宫内膜厚度、子宫内膜下血流参数[子宫动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期/舒张期流速比值(S/D)]和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平。结合实验结果,通过网络药理学分析巴戟天可能的作用机制,并通过分子对接预测活性成分的结合部位。结果与正常组比较,模型组大鼠子宫内膜厚度、PI、RI、eNOS、VEGF降低,S/D升高(P<0.05)。与模型组比较,枸橼酸氯米芬组大鼠子宫内膜厚度、PI、RI、eNOS、VEGF升高,枸橼酸氯米芬组大鼠S/D降低(P<0.05)。与枸橼酸氯米芬组比较,巴戟天组大鼠子宫内膜厚度、PI、RI、eNOS、VEGF升高,巴戟天组大鼠S/D降低(P<0.05)。网络药理学共筛选出巴戟天有效成分199种,子宫内膜容受性相关靶点792个,其交集靶点99个。PPI网络分析巴戟天主要作用于ESR1、NCOA1、NCOA2、MAPK14、PGR和AR等关键靶点。分子对接结果表明筛选得到的主要活性成分与靶点有较强的结合。结论巴戟天对改善子宫内膜容受性或许具有积极作用,其作用机制可能与调节ESR1、NCOA1、NCOA2、MAPK14、PGR和AR等信号通路有关。

巴戟天联合运动对小鼠坐骨神经损伤修复的影响

目的 研究巴戟天和运动对坐骨神经损伤小鼠神功能恢复的作用。方法 建立小鼠坐骨神经损伤模型,80只小鼠随机分为对照不运动、对照运动、巴戟天不运动和巴戟天联合运动组,每组20只。巴戟天组每天按0.1 ml/10 g巴戟天水提液灌胃、对照组每天按0.1 ml/10 g生理盐水灌胃,适应性喂养5 d后,灌胃半小时后对照运动组和巴戟天联合运动组小鼠在动物跑台上跑步训练,1次/天,连续28 d。通过观察神经元变化和神经胶质细胞数量、检测小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化歧化酶(SOD)活力值、坐骨神经功能指数、腓肠肌湿重等,观察巴戟天和运动对坐骨神经功能的恢复情况。结果 各组都存在神经元浓缩、破碎,尼氏Nissl数量减少,但巴戟天联合运动组神经元浓缩、破碎的情况明显减少,神经胶质细胞数量明显增加。腓肠肌湿重结果显示,对照组与巴戟天联合运动相比差异有统计学意义(P<0.01);坐骨神经功能指数结果显示,21 d时对照组与巴戟天联合运动相比差异有统计学意义(P<0.01),巴戟天联合运动和巴戟天不运动相比差异有统计学意义(P<0.05),28 d时对照不运动与巴戟天组相比差异有统计学意义(P<0.05);MDA含量测定结果显示,对照组与巴戟天联合运动相比差异有统计学意义(P<0.05);SOD活力值检测显示,对照运动与巴戟天组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 巴戟天可能有助于小鼠坐骨神经损伤的恢复,其与运动联合的恢复效果更佳。

南药巴戟天对大鼠运动行为及骨骼肌结构与功能的影响

目的:探究南药巴戟天对大鼠运动能力的影响及其作用的生理机制。方法:健康成年SD大鼠随机分为巴戟天组(n=8)及对照组(n=6)。巴戟天组采用自然进食方式定量饲喂含巴戟天的饲料,对照组饲料中不含巴戟天。于给药前(W0)和给药4周(W4)、8周(W8)后作行为学检测,包括基础运动行为(步态实验)和应激运动行为(悬挂和摇杆实验);行为学测试结束后,在体制备坐骨神经-腓肠肌标本,于一侧坐骨神经施以单个电刺激,另一侧坐骨神经施以连续电刺激并描记疲劳曲线,分析巴戟天对骨骼肌收缩能力的影响;随后对腓肠肌作组织切片,探究巴戟天对肌纤维形态的影响。结果:与对照组大鼠行为学结果相比,巴戟天组大鼠的基础运动能力没有发生显著变化,但在应激状态下的运动能力明显增强;与对照组大鼠肌张力结果相比,巴戟天组大鼠由单刺激引起肌收缩的强度没有发生显著变化,但在连续电刺激描记的疲劳曲线上耐力明显增强;与对照组大鼠肌纤维形态相比,巴戟天组大鼠肌纤维横截面明显增大。结论:巴戟天增强大鼠在应激状态下的运动能力,可能与骨骼肌收缩耐力增强及肌纤维增粗有关。该研究结果为巴戟天的药理研究和产品应用开发提供科学指导。

巴戟天治疗抑郁症的药理活性及其复方制剂研究

目的总结巴戟天抗抑郁的药理作用及复方制剂等方面的研究进展,为巴戟天的临床应用和中医药治疗抑郁症的现代研究提供思路。方法通过整理、分析国内外巴戟天的相关研究文献,探讨巴戟天及其复方制剂治疗抑郁症的药理活性、作用机制。结果巴戟天中所含的巴戟天寡糖、巴戟天多糖以及巴戟甲素有抗抑郁的作用,目前已知的抗抑郁中药制剂有巴戟天寡糖胶囊,还有将巴戟天寡糖胶囊与米那普仑、舍曲林、阿戈美拉汀等临床上联合使用治疗抑郁症,并且联合用药疗效比单独使用抗抑郁药物好。结论研究资料表明,巴戟天确有抗抑郁作用,且巴戟天寡糖胶囊已经在临床上应用,但巴戟天在抑郁症的治疗上还有很大的发展空间,需要不断的开拓和挖掘。

基于国家药品评价性抽检的巴戟天饮片质量分析与研究

目的:通过国家药品评价性抽检工作,了解市场上的巴戟天饮片质量及存在的问题,为巴戟天的质量标准提高和市场监管提供数据支持。方法:从全国24个省级行政区抽取巴戟天饮片,按照《中华人民共和国药典》2015年版(一部)巴戟天性状项和薄层鉴别项方法开展检验工作,并进行DNA条形码技术、指纹图谱、环烯醚萜含量测定、真菌毒素残留量共4项探索性研究,分析检验结果以评价巴戟天饮片的市场情况。结果:本次抽检的88家企业的巴戟天饮片共计108批,按照国家法定标准检验的合格率为100%。DNA条形码技术可以有效区分巴戟天及其混伪品。指纹图谱研究结果显示,正品巴戟天指纹图谱相似度均超过95%,混伪品相似度均低于70%。含量测定结果显示,不同巴戟天炮制品中环烯醚萜从种类和含量上具有显著性差别。真菌毒素筛查试验结果显示,有1批样品的黄曲霉毒素G1超出药典限度。结论:按标检验结果显示,市场上巴戟天饮片质量基本合格。根据探索性研究结果,建议标准增加环烯醚萜含量测定和黄曲霉毒素限量检查。

巴戟天寡糖对绝经后骨质疏松大鼠血清骨转化指标和骨组织结构的影响及其机制研究

目的探究巴戟天寡糖对绝经后骨质疏松模型大鼠血清骨转化指标和骨组织结构的影响及可能机制。方法50只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(阿仑膦酸钠,7 mg/kg)、巴戟天寡糖低剂量组(25 mg/kg)、巴戟天寡糖高剂量组(75 mg/kg),每组10只,除假手术组外,其余各组大鼠构建绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)大鼠模型并给予不同药物干预处理后,测定各组大鼠中血清骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)、I型前胶原氨基端延长肽(procollagen type 1 N-terminal propeptide,P1NP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(tartrate resistant acid phosphatase-5b,TRACP-5b)、Ⅰ型胶原C-末端肽交联(C-terminal telopeptide of type 1 collagen,CTX-1)水平,通过双能X线骨密度分析仪对大鼠腰椎骨密度进行检测,采用微计算机断层扫描技术对股骨远端骨微结构进行分析,三点弯曲法测定骨生物力学参数及制片测量骨组织形态计量学参数,使用蛋白免疫印迹法测定左侧股骨骨组织骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear faactor-κB Ligand,RANKL)蛋白相对表达水平;qPCR法检测左侧股骨OPG、RANKL的mRNA表达水平。结果与假手术组相比,模型组血清BALP、P1NP水平、腰椎骨骨密度、股骨相对骨体积、骨小梁厚度、骨小梁数量、荧光标记周长百分率、骨形成率与骨体积之比、矿化沉积率、OPG的蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.05),TRACP-5b、CTX-1、股骨骨小梁间距、结构模型指数、破骨细胞数目、RANKL蛋白、mRNA水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,巴戟天寡糖低、高剂量组及阿仑膦酸钠组大鼠BALP、P1NP水平显著上升(P<0.05),股骨相对骨体积、骨小梁厚度、骨小梁数量、荧光标记周长百分率、骨形成率与骨体积之比、矿化沉积率、OPG的蛋白及mRNA表达水平明显增加(P<0.05),TRACP-5b、CTX-1股骨骨小梁间距、结构模型指数、破骨细胞数目、RANKL蛋白及mRNA水平明显下降(P<0.05),但巴戟天寡糖高剂量组改善骨代谢指标、骨骼质量、骨微结构的作用相比于低浓度巴戟天寡糖更为显著,与阿仑膦酸钠的作用相近。结论巴戟天寡糖具有调节绝经后骨质疏松模型大鼠骨代谢指标的作用,可有效增加大鼠骨量,改善骨生物学性能、骨小梁形态及骨微结构,具有较好的抗骨质疏松作用,其作用机制可能与调控OPG/RANKL信号轴相关。

盐制巴戟天多糖结构表征及其免疫活性

该研究采用水提醇沉法从盐制巴戟天中提取粗多糖(SMP),经DEAE-52纤维素柱和葡聚糖凝胶Sephadex G 100柱分离纯化得到多糖(SMP-4),采用红外光谱、高效凝胶渗透凝胶色谱、气相色谱和核磁共振波对SMP-4进行结构表征,并以RAW264.7巨噬细胞为模型,通过测定其细胞增殖活性和细胞因子分泌水平来评价其免疫活性。多糖结构分析表明,SMP-4是由阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、核糖、木糖、葡萄糖和甘露糖组成的,摩尔比例为:0.55:0.23:0.16:0.03:0.02:0.01:0.01,分子量为1.32×10^(5) u的多糖。SMP-4具有六种糖苷键,其中→3)-D-Araf-(1→占比最高,为58.35%。在免疫活性评价分析中表明,与对照组相比,在15.625~500.000μg/mL质量浓度范围内不影响RAW264.7细胞的增殖,同时能显著地促进肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌。SMP-4质量浓度为500μg/mL时,RAW264.7细胞分泌的TNF-α质量浓度最高,为2100.00 pg/mL(P<0.001);在31.25μg/mL质量浓度下,RAW264.7细胞分泌的IL-1β质量浓度最高,为14.50 pg/mL(P<0.05)。综上,SMP-4表现出良好免疫活性,具有成为一种天然的免疫调节剂的潜力。

基于质量标志物和抗氧化药效的盐巴戟天蒸制时间及特色质量标准研究

目的基于质量标志物(Q-marker)成分和抗氧化药效综合优选盐巴戟天的最佳蒸制时间,并建立该炮制饮片的特色质量标准。方法采用高效液相色谱-蒸发光散色检测器(HPLC-ELSD)法同时测定不同蒸制时间盐巴戟天中6种Q-marker成分(1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、果果三糖、果果四糖、果果五糖)的含量,采用紫外-可见分光光度法测定样品提取液清除4种氧化自由基的活性及其铁还原能力,采用灰色关联度与熵权逼近理想解排序-融合模型法筛选盐巴戟天的最佳蒸制时间;测定10批按最佳蒸制时间制备的盐巴戟天中6种Q-marker成分的含量,并建立盐巴戟天饮片的HPLC-ELSD指纹图谱。结果盐巴戟天在蒸制3~5 h时,6种Q-marker成分含量较高;当蒸制5 h时,其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基、2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代-1-氧自由基、羟基自由基和铁还原能力均最好。10批自制盐巴戟天样品的指纹图谱中共有20个共有峰,相似度均大于0.990;共指认出9个色谱峰,分别为D-果糖(峰1)、D(+)-无水葡萄糖(峰2)、蔗糖(峰3)、1-蔗果三糖(峰4)、耐斯糖(峰5)、1F-果呋喃糖基耐斯糖(峰6)、果果三糖(峰X2)、果果四糖(峰X3)和果果五糖(峰X4)。6种Q-marker成分的平均含量分别为4.17%、5.54%、6.60%、2.89%、2.62%、2.13%。结论盐巴戟天的最佳蒸制时间为5 h;初步拟定6种Q-marker成分的含量以干燥品计算,分别不得少于3.03%、4.11%、4.87%、2.15%、1.96%、1.58%,菊淀粉型总寡糖/全果型总寡糖含量比值不得大于2.5。