甘肃省新纪录—宜昌蛇菰及同属药用植物资源初步调查与生境分析

通过野外实地考察、标本鉴定、逐个考证、资料整理等方式,对两当蛇菰资源与寄主植物初步调查和生境分析.调查结果显示,在甘肃省两当县境内发现了两种蛇菰分别是宜昌蛇菰(Balanophora henryi Hemsl.)和筒鞘蛇菰(Balanophora involucrata),其中宜昌蛇菰为本次发现的甘肃省新记录种.甘肃两当境内的蛇菰主要分布于南部的深山林区中,寄主分别是甘肃山楂、五味子、辽东栎、葛萝槭、旱柳.摸清了两当县野生蛇菰生长的现状,通过对其生境分析,为两当野生蛇菰资源的开发利用和研究等提供参考.

蛇菰内生菌Aspergillus sp. SHG-7代谢产物研究

从药用植物宜昌蛇菰(Balanophora henryi Hesml.)中分离得到一株内生真菌Aspergillus sp.SHG-7,通过固体发酵,乙酸乙酯萃取得浸膏,其浸膏经硅胶柱层析、Sephadex LH-20、半制备型HPLC等分离手段分离得到6个化合物,经核磁共振、质谱等手段鉴定其结构分别为灰黄霉素(1),麦角甾醇(2),麦角甾-7,22-二烯-3,6-二酮(3),麦角甾-7,22-二烯-3,5,6-三醇(4),软脂酸-1-甘油酯(5),肉豆蔻酸(6).化合物1对MCF-7、A549及Hela细胞具有一定的细胞毒活性,IC50分别为18.36±2.32μM、26.58±1.62μM和74.29±1.34μM,化合物2~化合物6对以上肿瘤细胞无明显活性.

秦岭产宜昌蛇菰生药学特征与抗氧化活性研究

目的对秦岭产宜昌蛇菰的生药学特征进行鉴别研究,为品种鉴定提供参考依据;对宜昌蛇菰体外抗氧化活性进行研究,为有效利用其资源提供参考依据。方法对原植物形态、性状、根茎、鳞叶、横切面显微进行鉴别研究;借助紫外分光光度法,通过比较1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率,评价宜昌蛇菰各部位不同溶剂提取物的体外抗氧化活性。结果宜昌蛇菰的茎横切面表皮以内为薄壁组织,外韧性维管束散在,无明显皮层、中柱以及髓部分化;鳞叶横切面可见主脉维管束散在,无栅栏组织、海绵组织的分化,呈现等面叶的特征。宜昌蛇菰各部位不同溶剂提取液在实验质量浓度范围内,各提取物抗氧化能力均随其质量浓度升高而增强。结论宜昌蛇菰花茎和鳞叶横切面初生构造的特征,对其品种鉴定提供参考依据。宜昌蛇菰根茎、鳞叶、花均具有明显抗氧化活性,三者间无明显差异,故提示其应全株入药。

鹿仙草多糖通过靶向miR-122a改善酒精性肝病的实验研究

研究鹿仙草总多糖(total polysaccharides from Balanophora henryi,TBP)对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的作用,并探究其可能的作用机制。C57BL/6N小鼠随机分为4组,配对饮食对照组,酒精饮食模型组,模型+TBP干预组,TBP对照组。采用Gao-binge法制备慢性ALD小鼠模型,同时用400 mg·kg^-1 TBP进行干预,喂养6周后留取血清和组织待检测。与饮食对照组相比,模型组小鼠肝组织表现出明显的脂肪样变和炎性细胞的大量浸润,血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平升高。经过TBP干预后,模型组小鼠肝脏组织病理学变化明显改善,脂质沉积减少,肝细胞排列较为紧密,炎性因子表达水平降低,同时血清ALT和AST的水平降低,说明TBP具有显著改善ALD的作用。对小鼠结肠组织的观察显示,TBP能有效维持ALD小鼠肠道组织结构的完整性,增强紧密连接蛋白occludin的表达和降低miR-122a水平,更重要的是显著降低模型小鼠血清脂多糖(LPS)水平。这一结果表明,TBP可能通过维持和增强肠道屏障功能来发挥对ALD的护肝作用。体外实验发现,TBP能够显著抑制乙醇暴露下Caco-2细胞中miR-122a的表达水平。在Caco-2细胞中过表达miR-122a诱导了对occludin蛋白生成的抑制,而TBP的加入可以显著干预这一作用。这些结果提示,TBP通过增强occludin蛋白表达来维持肠道屏障功能的稳定性,减少肠道LPS进入肝脏进而改善ALD,其潜在机制部分可能是通过抑制miR-122a的表达实现的。

UPLC-MS/MS法测定蛇菰中7种成分含量及其活性成分没食子酸的降尿酸作用研究

目的:建立疏花蛇菰和宜昌蛇菰中7种成分的含量测定方法,并探索其活性成分没食子酸的降尿酸作用。方法:采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)建立蛇菰中没食子酸、没食子酸甲酯、短叶苏木酚酸、咖啡酸、对香豆酸等5种酚酸类成分及圣草酚、柚皮素2种黄酮类成分的含量测定方法;建立腺苷诱导的肾小管上皮细胞NRK-52E高尿酸细胞模型,给予没食子酸4、20、100μmol/L,利用高效液相色谱(HPLC)法检测细胞上清液中尿酸含量;建立高尿酸血症(HUA)小鼠模型,给予100、300 mg/kg没食子酸后检测小鼠血清中尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及肝脏和血清中黄嘌呤氧化酶(XO)活力。结果:7种成分在各自的浓度范围内线性关系良好(R~2>0.9982),精密度、重复性和稳定性均良好,平均加样回收率为87.35%~105.47%,RSD为1.14%~2.55%;没食子酸可降低腺苷诱导的细胞尿酸含量,且可降低HUA小鼠血清中UA、Cr、BUN含量,抑制肝脏及血清中XO活力。结论:本研究首次建立了UPLC-MS/MS法测定蛇菰成分,简单快速,重复性和稳定性良好,灵敏度高,且可用于同时检测蛇菰中多个成分的含量;蛇菰中活性成分没食子酸在体内外均有较好降尿酸作用,可能是通过减少尿酸生成发挥降尿酸作用,且可改善HUA所致尿酸性肾病。