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联合EBNA和Bamh1-W的实时PCR方法检测EB病毒DNA在鼻咽癌中的应用 被引量:7
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作者 王晖 魏修奇 杨坤禹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期2918-2922,共5页
目的探讨基于EB病毒EBNA基因设计引物的实时PCR在EB病毒DNA检测中的应用以及联合常用方法(Bamh1-W片段)检测在鼻咽癌患者中的诊断价值。方法用两种方法对234例血液标本(包括66例鼻咽癌患者标本)进行EB病毒DNA定量检测,每例样本对细胞内... 目的探讨基于EB病毒EBNA基因设计引物的实时PCR在EB病毒DNA检测中的应用以及联合常用方法(Bamh1-W片段)检测在鼻咽癌患者中的诊断价值。方法用两种方法对234例血液标本(包括66例鼻咽癌患者标本)进行EB病毒DNA定量检测,每例样本对细胞内及细胞外分别测定,比较两种方法以及联合检测在各组中的阳性率,观察EBNA法联合Bamh1-W法在鼻咽癌患者中对EB病毒检出率有无提高,方法学的验证采用回归分析及t检验。结果 EBNA法的阳性率(所有样本53.42%,鼻咽癌样本51.52%)低于Bamh1-W法(所有样本69.23%,鼻咽癌样本71.21%),但联合两种方法检测可提高阳性率(所有样本70.94%,鼻咽癌样本72.73%)且在鼻咽癌患者中得到了更大的提高,EBNA法与Bamh1-W法检测标本的相关性R2为0.577,且P<0.05,差异有统计学意义,但在鼻咽癌样本中R2为0.828,相关性较好且P>0.05,差异无统计学意义。结论联合EBNA法和Bamh1-W法检测EB病毒DNA可提高阳性率且在鼻咽癌患者的检测中阳性率能够得到更大的提高,对EB病毒DNA定量和鼻咽癌的辅助诊断具有一定的意义。 展开更多
关键词 EB病毒 EBNA bamh1-W 实时荧光定量PCR 鼻咽癌
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鼻咽癌中miR-BARTs的研究进展
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作者 潘林江 叶志华 +1 位作者 黄素宁 陈罡 《实用临床医学(江西)》 CAS 2015年第5期96-98,107,共4页
微小RNA(miRNAs)是一类具有调控功能的内源性非编码单链小分子RNA,长约18-24个核苷酸,与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发生发展、诊断以及预后、转归有关。BamHlA右向转录(BamHl A rightward transcripts,BARTs)是E... 微小RNA(miRNAs)是一类具有调控功能的内源性非编码单链小分子RNA,长约18-24个核苷酸,与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发生发展、诊断以及预后、转归有关。BamHlA右向转录(BamHl A rightward transcripts,BARTs)是EB病毒(EBV)中一组经转录后选择性多剪接的基因产物,存在于EBV所有潜伏状态的miRNA,共22种(miR-BARTl-22),并表达于NPC等EBV感染相关的恶性肿瘤。阐明miR-BARTs在NPC的作用机制对指导临床治疗有重要意义。 展开更多
关键词 鼻咽癌 bamh1A 右向转录 EB病毒 基因调控
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PCR AMPLIFICATION, MOLECULAR CLONING,DNA SEQUENCE ANALYSIS AND IMMUNO/PROTECTION IN BALB/C MICE OF THE 33 kDa ENDOFLAGELLAR PROTEIN OF L.INTERRORGANS SEROVAR LAI
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作者 戴保民 陈庄 +2 位作者 阎和平 赵慧业 李胜富 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1997年第1期15-21,共7页
A pair of oligonucleotide primers were designed to amplify the endoflagella gene of L. Interrogans serovar lai. An approximately 840 bp fragment was generated with PCR and inserted into plasmid pUC8,after the fragment... A pair of oligonucleotide primers were designed to amplify the endoflagella gene of L. Interrogans serovar lai. An approximately 840 bp fragment was generated with PCR and inserted into plasmid pUC8,after the fragment and pUC8 were digested respectively with BamHI and PstI. A recombinant plasmid (designated as pLF1 ) was obtained. SDS-PAGE analysis indicated that a 33 kDa was expressed in E. Coli JM103 harboring pLF1 and the expression level of the protein was 11 % of the total bacterial soluble proteins. Western blot analysis showed that the protein band could be recognized by the antiserum against the endoflegella (Axial filament ) of Leptospira interrt,gans serover lai. Nucleotide sequence data showed an open reading frame encoding 282 aminoacids residues,corresponding to a protein of molecular weight 33. 6kDa. Comparison of the deduced endoflagellar subunit protein (flaB) amino acid sequence with flagellins from other bacteria revealed a high level of identity with the Trehoema pallid um flaB proteins. Immunization/protection experiment was performed on the model of BALB/C mice and showed that there was higher survival rate in the group JM103-pLE1 than in the group JM103-pUC8. 展开更多
关键词 PCR扩增 分子克隆 基因序列 序列分析 BALB/C bamh1 pLFI JM103-pLEI JM103-pUC8
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