Study of band 3 protein and intraerythrocytic acid-base regulation under chronic isobaric hypoxia and hypoxia-hypercapnia in rats

The changes of the structure and content of the erythrocyte membrane band 3 protein and its function of anion transport and blood gases inside and out of the erythrocytes were observed under isobaric hypoxia and hypoxia-hypercapnia in rats. It was found t

糖尿病大鼠红细胞膜Band3蛋白的变化

目的：研究糖尿病时红细胞膜蛋白的变化。方法：注射ＳＴＺ诱发大鼠糖尿病，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对糖尿病３个月大鼠红细胞膜蛋白进行电泳分析。结果：糖尿病大鼠红细胞膜Ｂａｎｄ３蛋白含量明显低于正常对照大鼠。结论：由于Ｂａｎｄ３蛋白是红细胞膜蛋白的主要成分，参与红细胞变形、物质通透等多方面的功能活动，其变化可能会直接影响红细胞的结构和功能，因此。

铁缺乏对红细胞膜带3蛋白结构相关酶的影响

方法：测定了１０种红细胞酶。结果：１．缺铁性贫血大鼠红细胞中大多数胞浆酶活力呈代偿性增高，而带３膜绑酶无显著增高表现。２．酶的稳定性在胞浆酶和膜绑酶均明显下降，稳定性测值可作为反映红细胞寿命的一项指标。３．铁缺乏使与ＣＤＢ３结合的ＰＦＫ、Ｇ３ＰＤ的活力与稳定性显著下降；带３蛋白分子降解、含量下降可能是缺铁红细胞膜绑酶病变的直接原因。４．适当的铁剂治疗对于缺铁红细胞酶稳定性的恢复有肯定作用。

红细胞膜带3蛋白与运动研究展望

红细胞运输氧和二氧化碳的基础是带 3蛋白介导的Cl- /HCO3- 转运。带 3蛋白还有调节红细胞糖酵解速率、变形能力和介导红细胞清除功能。运动引起的血乳酸、自由基、内环境变化和能量消耗可影响带 3蛋白的功能。

长期运动训练对大鼠红细胞膜带3蛋白磷酸化的影响

对长期运动训练大鼠红细胞带3蛋白磷酸化的变化进行研究,为运动训练导致红细胞溶血增加提供理论依据。实验结果表明长期大强度递增负荷跑台运动引起运动组大鼠红细胞参数显著降低,呈现运动性低血色素状态;运动组红细胞膜带3蛋白磷酸化与安静组比较非常显著性增加(P<0.01),表明长期大强度递增负荷跑台运动导致红细胞膜结构和功能受到严重影响,从而影响红细胞膜骨架,进而使红细胞溶血增加。

恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达及其对K562细胞生长的影响

背景与目的:带3蛋白介导Cl-/H CO3-的跨膜交换,从而调节细胞内pH值。有学者证实,Cl-/H CO3-交换的异常可引起细胞内pH值明显改变,使细胞发生增殖或凋亡。本研究旨在探讨红细胞膜带3蛋白的表达及其对K562细胞生长的影响。方法:以SPQ为荧光探针测定8例恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,W estern blot检测带3蛋白表达。转染带3蛋白膜段结构域cDNA至K562细胞,观察带3蛋白膜段结构域表达后对K562细胞阴离子转运活性及细胞增殖的影响。结果:7例恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的离子转运活性明显增强,5例蛋白质表达增强。同时发现带3蛋白膜段结构域表达于K562细胞膜后,对K562细胞生长有一定促进作用。结论:带3蛋白在部分恶性肿瘤患者红细胞膜表达增强,可作为恶性肿瘤的一种潜在标志物。

慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠带3蛋白与红细胞内酸碱调节的实验研究

文中报道了慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白结构，含量和阴离子转运功能，以及红细胞内外血气研究结果：慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白阴离子转运功能降低。其产生机制可能是由于长期严重缺氧，使胞浆ＡＴＰ含量减少，影响幼稚红细胞中带３蛋白的合成，致使网织红细胞阶段嵌入红细胞膜下的带３蛋白量减少，阴离子转运位点数目减少所致。

人红细胞带3蛋白胞质段的克隆及其表达

人红细胞带３ 蛋白胞质段（ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｄｏｍａｉｎ ｏｆ ｂａｎｄ ３，ｃｄｂ３） 起着将膜与膜骨架、细胞内环境相联系的重要作用．以带３ 蛋白全长基因为模板， 用ＰＣＲ方法扩增出ｃｄｂ３ 片段， 克隆至ｐＲＳＥＴ表达质粒上， 转化大肠杆菌ＢＬ２１ （ＤＥ３） ． 转化菌经诱导表达出较高含量的ｃｄｂ３ 蛋白， 纯化后，

慢性呼吸衰竭病人带3蛋白与红细胞内pH的研究

对80例慢性呼吸衰竭病人和37例健康人的红细胞(RBC)膜带3蛋白结构、含量和阴离子转移功能、RBC内外血气和血中HCO_3^-、Cl^-进行了研究。结果提示:肺心病Ⅱ型呼吸衰竭病人带3蛋白阴离子转运蛋白的氨基酸组分无变化,但带3蛋白阴离子转运功能降低,HCO_3^-/Cl^-交换受限,红细胞内产生的大量HCO_3^-不能充分排出,使红细胞内pH(pHi)升高。RBC内相对偏碱对缓解高碳酸血症所引起的氧离曲线过度右移,具有重要意义。

肺心病人红细胞膜带3蛋白和酸碱变化的研究

本文对肺心病人69例和健康对照50例的红细胞(RBC)膜带3蛋白(band 3 protein),RBC内、外血气和电解质进行了研究。结果表明,肺心病Ⅱ型呼吸衰竭病人RBC膜带3蛋白相对含量降低,HCO_3^-/Cl^-交换受限,可能是加重其CO_2潴留和呼吸性酸中毒的原因之一;肺心病Ⅱ型呼吸衰竭病人RBC内相对偏碱是由于RBC内HCO_3^-(〔HCO_3~_〕i)相对升高所致;肺心病低氧血症时,应及时给氧,不仅能改善细胞外酸碱状态,而且可提高细胞内PO_2(PiO_2),增加组织贮氧能力。

紫草多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜流动性与带3蛋白的影响

目的:观察紫草多糖对S180荷瘤小鼠瘤重、红细胞膜流动性和带3蛋白含量的影响。方法:采用荧光探针DPH标记法测定红细胞膜的荧光偏振度P,计算微黏度(η)与膜脂流动性(LFU);电泳法测定红细胞膜带3蛋白含量。结果:紫草多糖中剂量组抑瘤率达43.05%;且各剂量组对红细胞膜膜脂流动性、带3蛋白均有影响,以中剂量组效果最佳,与对照组相比P<0.01,P<0.05。结论:紫草多糖通过影响荷瘤小鼠红细胞膜流动性和带3蛋白恢复红细胞的正常功能发挥其抗肿瘤作用。

衰老红细胞与带3蛋白

循环系统里的成熟红细胞在其生命过程里经历着氧化性衰老 ,相应细胞组份出现血红蛋白变性、膜蛋白交联、带 3蛋白聚集以及带 3蛋白降解等多种修饰 .这些修饰作为红细胞膜上的衰老信号参与构成衰老细胞抗原 ,由此启动与IgG自身抗体 (主要为带 3蛋白抗体 )的结合以及补体的沉淀 ,最终是免疫吞噬系统对异常细胞的识别清除 .现就衰老红细胞与带 3蛋白的关系作一综述 .

带3蛋白转运吡啶二羧酸根离子的动力学研究

利用ＤＰＡ使Ｔｂ３＋的荧先强度显著增强的原理进行带３蛋白活性的测定，方法简便、灵敏、重复性好，而且能够进行连续荧光扫描测量．应用连续荧光扫描法测定了带３蛋白介导的ＤＰＡ与Ｃｌ－交换的动力学特征参数．结果表明，带３蛋白介导的ＤＰＡ与Ｃｌ－的交换对ＤＩＤＳ非常敏感，受ＤＩＤＳ的强烈抑制，抑制程度大于９０％；ＤＰＡ由内向外转运的米氏常Ｋｍ＝２８．１—３１．２ｍｍｏｌ／Ｌ；带３蛋白的天然底物Ｃｌ－从内侧竞争性抑制ＤＰＡ向外转运，抑制常数ｋｉ＝６０．４±６．９ｍｍｏｌ／Ｌ；膜内侧ＤＰＡ与外侧Ｃｌ－交换的活化能，在４—２５℃范围内为５．８±０．５ｋＣａｌ／ｍｏｌ２５—３７℃范围内为１９．８±１．５ｋＣａｌ／ｍｏｌ；膜内侧ＤＰＡ与外侧Ｃｌ－交换受转运介质ｐＨ（膜内外对称改变）的显著影响，ｐＨ＜７．４时，交换速度显著升高．本实验证明ＤＰＡ确是经带３蛋白而转运的，但转运机制可能与无机离子转运有所不同。

带3蛋白在慢性低氧伴高二氧化碳大鼠红细胞内酸碱调节中的作用

本文对慢性低氧和低氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白结构、含量和阴离子转运功能，以及红细胞内外血气进行了研究。结果表明，慢性低氧和低氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白阴离子转运位点结构可能无异常，但阴离子交换功能降低，ＨＣＯ／Ｃｌ￣－交换受限，阻止红细胞内ＨＣＯ向细胞外转移，使红细胞内呈们碱状态。因此，维护带３蛋白正常的结构和功能，将有助于维持红细胞内外的酸碱稳态。

头颈癌病人红细胞C_3b受体活性和sIL-2R测定

①目的了解头颈癌病人红细胞免疫功能和血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平的变化及其相互关系。②方法采用红细胞花环试验和双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，检测了３０例头颈癌病人红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（Ｅ－Ｃ３ｂＲＲ）和ｓＩＬ－２Ｒ水平的变化，并与正常对照组进行比较。③结果头颈癌病人Ｅ－Ｃ３ｂＲＲ明显低于对照组，ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组，差异均具有极显著意义（ｔ＝５．７８，３．４５，Ｐ均＜０．０１）。二者之间呈显著负相关性（ｒ＝－０．５８，Ｐ＜０．０１）。

带3蛋白磷酸化对西藏高血红蛋白献血者悬浮红细胞贮存质量的影响

目的分析西藏地区高血红蛋白人群血液制备的悬浮红细胞在体外保存过程中的质量变化及其临床应用的安全性。方法以体检及血液筛查合格的无偿献血者为对象,参照"青海标准"设高原高血红蛋白浓度(Hb)献血人群组(男性Hb≥210 g/L,女性Hb≥190 g/L,简称高红组):共招募西藏自治区(海拔>3 500 m)13名献血者,均为男性;对照组(男性Hb:120~185 g/L,女性Hb:115~165 g/L):共招募成都市25名献血者,其中男性12名、女性13名。采集全血200 mL/(人)袋,离心去除血浆并加入MAP保养液制备悬浮红细胞(简称悬红),分装到4个50 mL贮存袋于4℃保存。分别于保存d1、d14、d21、d35检测血常规、游离Hb、溶血率等指标,并分离红细胞膜蛋白进行带3蛋白酪氨酸磷酸化检测。结果高红组与对照组比较,RBC(×10^(12)/L)、Hct(%)、Hb(g/L)分别为6.76±0.95 vs 4.65±0.52、63.3±6.8 vs 43.1±4.4、214.4±19.8 vs 143.2±16.9(P<0.01);悬浮红细胞在贮存d1、d14、d21、d35的红细胞变形性检测:在3、5.33、9.49、16.87、30 Pa剪切力下高红组的红细胞变形性均明显低于对照组(P<0.01);高红组与对照组在贮存d1、d14、d21、d35的溶血率(%)分别为0.0502±0.0402 vs 0.0222±0.0111、0.0554±0.043 vs 0.032 1±0.0287、0.0612±0.0259 vs 0.0343±0.0317、0.0696±0.0320 vs 0.0440±0.0333(P<0.05);带3蛋白胞浆段N端Y21的磷酸化检测:在血液采集时高红组红细胞的带3蛋白呈高度磷酸化状态。结论与对照组相比,高红组悬浮红细胞的红细胞变形性降低,在体外保存过程中溶血率更高。但高红组悬浮红细胞的储存期末溶血率仍达到国家标准要求(<0.8%),高红组悬浮红细胞溶血率升高与带3蛋白的高度磷酸化密切相关。

红细胞膜带3蛋白及膜流动性在病理状态下的变化(英文)

目的 研究带 3蛋白与红细胞膜流动性的关系及其在病理状态下的改变。方法 对血液病及高血压患者红细胞膜带 3蛋白相对含量、红细胞膜流动性及血浆MDA分别进行了测定。结果 血液病患者红细胞膜带 3蛋白相对含量和膜流动性较对照组显著降低。而血浆MDA含量较对照组显著升高。结论 病理状态下 ,膜流动性的降低与带 3蛋白的相对含量减少有关。

具有生物活性的人带3蛋白胞质片段融合蛋白的克隆、表达与纯化

用 PCR法从质粒 p HB3中扩增了人红细胞带 3蛋白胞质片段 (CDB3 )基因 .PCR产物经限制性内切酶切割后与多克隆位点处带有编码 6个组氨酸序列的高效表达载体 p ET2 8b连接 ,构建为重组子p CDBHistag.重组子经酶切及序列测定后在大肠杆菌 BL2 1 (DE3 )中获得高效表达 ,可溶性目的蛋白占菌体总蛋白的 4 0 %左右 .C端带有 6个连续组氨酸的带 3蛋白胞质片段作为融合蛋白不仅可以降低宿主菌蛋白酶对其水解程度 ,而且简化了目的蛋白的纯化过程 .经一步螯合 Ni2 +的亲和层析获得了电泳纯的带 3蛋白胞质片段融合蛋白 .活性测定结果表明 ,带 3蛋白胞质片段融合蛋白能够抑制醛缩酶 (Aldolase)活性的70 % ,与文献报道的人红细胞内带 3蛋白胞质片段具有相同的功能 .

肝硬化患者红细胞膜带3蛋白含量和功能的变化

目的 :观察肝硬化患者红细胞膜带 3蛋白含量及功能的变化。方法 :采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离红细胞膜蛋白并分析带 3蛋白含量 ;取适量患者红细胞检测红细胞丙酮酸 Cl 交换速率常数 ,并与正常人比较。结果 :凝胶电泳显示患者组带 3蛋白分布较窄 ,着色减弱 ;扫描图谱显示带 3蛋白的浓度峰明显低于对照组 ;患者组红细胞丙酮酸 Cl 交换速率常数明显低于对照组。结论 :肝硬化患者红细胞膜带 3蛋白含量减少 ,阴离子交换功能降低 ;带 3蛋白阴离子交换功能减低是肝硬化患者红细胞内 2 ,3 二磷酸甘油酸含量明显增加的重要原因 ;改善带

碳酸酐酶、带3蛋白在肺气体交换中作用的实验研究

目的：探讨细胞膜带３蛋白介导的ＨＣＯ－３／Ｃｌ－交换和碳酸酐酶（ＣＡ）催化的ＨＣＯ－３脱水化反应在肺气体交换中的作用。方法：通过对麻醉犬右心房适时地灌注４，４′－二硫氰基－２，２′－二磺基芪（ＤＩＤＳ）抑制带３蛋白、乙酰唑胺（ＡＣＴＺ）抑制红细胞和肺组织ＣＡ活性来完成。结果：①ＤＩＤＳ可导致灌注后１５、３０ｍｉｎ的ＣＯ２产量（Ｖ·ＣＯ２）较灌注前显著减少（Ｐ＜０．０５）、心输出量（Ｑ）显著地增高（Ｐ＜０．０５）。１ｈ后完全恢复正常。②ＡＣＴＺ除出现上述变化且程度较重外，尚出现了灌注后１５、３０ｍｉｎ的耗氧量（Ｖ·Ｏ２）较灌注前显著减少（Ｐ＜０．０５）等改变。其变化在１ｈ后完全恢复正常。③ＤＩＤＳ和ＡＣＴＺ两者之间在Ｖ·ＣＯ２减少、血ＰＣＯ２增高、ｐＨ下降等方面存在协同效应。④正常犬红细胞阴离子交换速率ｋ值在１０℃、ｐＨ７．４１、红细胞数为８．０×１０８个／ｍｌ、介质液为盐酸盐的条件下为（２．２２±０．２）ｈ－１。结论：ＣＡ和／或带３蛋白是影响肺气体交换的重要因素，二者在肺气体交换过程中可能存在某种程度的协同作用。