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伪狂犬病病毒经典疫苗株Bartha-K61对家兔的致病性研究
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作者 包玮玲 郑浩 +11 位作者 李国新 周艳君 单同领 于海 姜一峰 高飞 虞凌雪 刘长龙 李丽薇 孔宁 童武 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期27-32,共6页
已有研究表明伪狂犬经典疫苗株Bartha-K61对小鼠具有较强的致死性,为了研究伪狂犬疫苗株Bartha-K61对兔的致病性,本研究以10^(3)TCID_(50)的剂量接种5只成年家兔,家兔于接种后第3 d出现死亡,并陆续在5 d内全部死亡。对病死兔进行解剖后... 已有研究表明伪狂犬经典疫苗株Bartha-K61对小鼠具有较强的致死性,为了研究伪狂犬疫苗株Bartha-K61对兔的致病性,本研究以10^(3)TCID_(50)的剂量接种5只成年家兔,家兔于接种后第3 d出现死亡,并陆续在5 d内全部死亡。对病死兔进行解剖后发现大脑血管扩张及出血,心脏出现坏死以及肺部气肿、出血、坏死等典型的伪狂犬病病理变化。病理切片也显示心脏血管扩张,血管周围轻度水肿,脑部胶质细胞增生,细胞数量增多,其他各脏器也都有不同程度的病理变化。通过荧光定量PCR的方法对病死兔各组织的病毒载量进行了测定。结果表明,病死兔的各组织脏器均检测出高水平的病毒DNA,均显著高于对照组。为了进一步研究伪狂犬疫苗株Bartha-K61对家兔的致病性,本研究测定了Bartha-K61对家兔的半死致死量,结果表明:Bartha-K61对家兔的半数致死量为10^(0.3)TCID_(50),以1×TCID_(50)的剂量接种成年家兔后,仍可引起20%的家兔致死,由此可见Bartha-K61对家兔的致死性要显著强于小鼠。因此在使用Bartha-K61过程中应针对不同物种注意生物安全控制。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 bartha-k61 致病性
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表达绿色荧光蛋白的伪狂犬病毒Bartha-K61株TK^-突变株的构建 被引量:2
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作者 范伟兴 宋建兰 +2 位作者 魏荣 陈溥言 赵宏坤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期476-482,共7页
提取伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的PRVKa plan株UL区UL25、UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)的可用于同源重组的左臂片段(L... 提取伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的PRVKa plan株UL区UL25、UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL25、全部UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失270个核苷酸。将L片段和R片段克隆于pBluescriptM13-载体上,获得pSKLR;再将绿色荧光蛋白载体pEGFP-C1上含GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLRG。提取pSKLRG质粒,经单酶切线性化后用脂质体与PRVBartha-K61株共转染143TK-细胞,在细胞培养液中有5 溴脱氧尿嘧啶(BrdU)存在的条件下筛选出表达绿色荧光蛋白的重组PRVBartha-K61毒株:PRVrBGFP。 展开更多
关键词 基因表达 绿色荧光蛋白 伪狂犬病毒 Bartha—K61 TK^-突变株 基因构建 PCR扩增模板 DNA
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含绿色荧光蛋白基因和猪瘟E_2基因的伪狂犬病毒Bartha-K_(61)株TK基因缺失转移载体的构建 被引量:11
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作者 范伟兴 张雪莲 +2 位作者 魏荣 赵宏坤 陈溥言 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第3期3-8,共6页
提取伪狂犬病毒 ( PRV) Bartha- K6 1 株基因组 DNA为 PCR扩增模板 ,并根据 Genbank已发表的 PRV Kaplan株 UL区 UL2 5、U L2 4、U L2 3、U L2 2基因序列 ,选择保守序列设计了两对引物 ,这两对引物分别扩增出位于 UL2 3( TK)两侧 (含部... 提取伪狂犬病毒 ( PRV) Bartha- K6 1 株基因组 DNA为 PCR扩增模板 ,并根据 Genbank已发表的 PRV Kaplan株 UL区 UL2 5、U L2 4、U L2 3、U L2 2基因序列 ,选择保守序列设计了两对引物 ,这两对引物分别扩增出位于 UL2 3( TK)两侧 (含部分TK基因 )的可用于同源重组的左臂片段 ( L )和右臂片段 ( R) ,L包括部分 UL 2 5、全部 UL 2 4、部分 TK,R包括部分 TK及部分U L2 2 ,L 和 R的拼接片段中 TK基因内部缺失 2 70个核苷酸。将 L 片段和 R片段克隆于 p Bluescript M13-载体上 ,获得p SKL R;再将绿色荧光蛋白载体 p EGFP- C1上含 GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入 p SKL R的 L 片段和 R片段之间构成转移载体 p SKL KG;又将猪瘟病毒 1.2 3 kb的 E2 ( CSFV- E2 )基因片段插入 p SKL RG的多克隆位点的 Bg1 与 Pst 之间获得转移载体 p SKL 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白基因 伪狂犬病 伪狂犬病毒bartha-k61 TK基因 EGFP基因 猪瘟病毒E2基因 基因缺失 转移载体 疫苗
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高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92疫苗株对低剂量伪狂犬病毒Bartha-K61疫苗株的免疫干扰研究 被引量:2
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作者 夏铭崎 印春生 +8 位作者 王鑫 王炜 王宇菲 孟庆森 陈超阳 武莹 封腾 武华 薛青红 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期412-415,共4页
为研究高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92疫苗株对低剂量伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61疫苗株是否存在免疫干扰作用,本研究对其从体液免疫水平、免疫攻毒保护水平及病理学变化等方面进行评价。结果表明,二联免疫组抗体... 为研究高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92疫苗株对低剂量伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61疫苗株是否存在免疫干扰作用,本研究对其从体液免疫水平、免疫攻毒保护水平及病理学变化等方面进行评价。结果表明,二联免疫组抗体消长规律与低剂量PRV Bartha-K61株免疫对照组抗体消长规律相一致,二联免疫组中高剂量PRRSV TJM-F92株未抑制低剂量PRV Bartha-K61株抗体生成;二联免疫组与低剂量PRV Bartha-K61免疫对照组对PRV JL1株强毒攻击保护率均为5/5;免疫病理学研究结果表明,两组免疫组攻击PRV JL1株强毒后各组织器官病理变化轻微;二联免疫组与低剂量PRV Bartha-K61免疫对照组均可对PRV强毒攻击产生良好的保护效果。综上,高剂量PRRSV TJM-F92株对低剂量PRV Bartha-K61株无免疫干扰作用。 展开更多
关键词 PRRSV TJM-F92株 PRV bartha-k61 免疫干扰
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伪狂犬病C株与Bartha-K61株活疫苗在gE抗体阴性场的免疫效果比较 被引量:2
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作者 卫秀余 欧伟业 +3 位作者 彭俊平 胡永明 李江 娄昆鹏 《养猪》 2022年第1期106-107,共2页
某伪狂犬病野毒阴性场,分别选用伪狂犬病疫苗C株和Bartha-K61株做仔猪免疫平行对比试验,采用IDEXX伪狂犬病ELISA试剂盒检测抗体滴度和阳性率,评估母源抗体干扰度和维持时间。检测结果表明,某厂家C株伪狂犬病疫苗效果优于某厂家Bartha-K6... 某伪狂犬病野毒阴性场,分别选用伪狂犬病疫苗C株和Bartha-K61株做仔猪免疫平行对比试验,采用IDEXX伪狂犬病ELISA试剂盒检测抗体滴度和阳性率,评估母源抗体干扰度和维持时间。检测结果表明,某厂家C株伪狂犬病疫苗效果优于某厂家Bartha-K61毒株。研究为规模猪场伪狂犬病疫苗毒株的选择提供参考依据。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 C株 bartha-k61 免疫效果
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Bartha-K61疫苗对PRV变异株免疫效果的Meta分析 被引量:2
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作者 徐玉 王彬 +8 位作者 曾智勇 梁海英 汤德元 何信群 徐松平 黄二素 万娟 张婧旭 祝羊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期80-85,共6页
为了给预防与控制伪狂犬病(PR)提供科学参考,本试验采用Meta分析的方法对已发表的Bartha-K61疫苗对伪狂犬病病毒(PRV)变异株免疫效果进行评估。首先通过计算机建立检索式检索中国知网、万方、维普和PubMed数据库,收集对照试验;然后采用R... 为了给预防与控制伪狂犬病(PR)提供科学参考,本试验采用Meta分析的方法对已发表的Bartha-K61疫苗对伪狂犬病病毒(PRV)变异株免疫效果进行评估。首先通过计算机建立检索式检索中国知网、万方、维普和PubMed数据库,收集对照试验;然后采用RevMan 5.4.1软件以攻毒保护率为结局指标进行Meta分析;共纳入15篇文献,190头仔猪,试验组105头,对照组85头,试验组均采用接种Bartha-K61疫苗+攻毒PRV变异株的干预方式,对照组有3种干预方式,分别为接种Bartha-K61疫苗+攻毒PRV经典株、不接种PRV疫苗+攻毒PRV变异株、接种其他PRV疫苗+攻毒PRV变异株,其中只有不接种PRV疫苗+攻毒PRV变异株对照组的数据有统计学意义。结果显示:各研究间同质(P=0.91>0.1,I~2=0<50%),研究结果稳定性较好,Bartha-K61疫苗对PRV变异株的攻击可以提供免疫保护(合并OR=22.77,95%CI=9.91~52.28)。综合分析15篇单个试验研究的结果表明,经典疫苗Bartha-K61对PRV变异株的免疫保护达到80%以上,且高滴度的疫苗效果更好,但比起其对经典株的保护效果略差;而且,以PRV变异株为亲本研制的疫苗对亲本毒株的攻毒保护效果优于Bartha-K61疫苗。 展开更多
关键词 bartha-k61疫苗 PRV变异株 PRV经典株 META分析 免疫效果
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猪伪狂犬病毒Bartha-K61疫苗株和变异株主要免疫原性基因分析 被引量:13
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作者 杨涛 张丹英 +1 位作者 赵冉 陈琼 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第4期50-55,共6页
自2011年底以来,我国多个省份暴发了猪伪狂犬病,一些研究院所证实当前猪伪狂犬病毒流行株发生了一定程度的变异,疫苗不能提供完全的保护。为了在分子生物学水平上比较不同厂家猪伪狂犬病毒Bartha-K61疫苗株,以及与当前流行的猪伪狂犬病... 自2011年底以来,我国多个省份暴发了猪伪狂犬病,一些研究院所证实当前猪伪狂犬病毒流行株发生了一定程度的变异,疫苗不能提供完全的保护。为了在分子生物学水平上比较不同厂家猪伪狂犬病毒Bartha-K61疫苗株,以及与当前流行的猪伪狂犬病病毒变异株,在主要免疫原性蛋白之间的差异,选取了4个厂家的活疫苗Bartha-K61株,通过二代测序方法进行测序,对Bartha-K61株gB、gC和gD这3种主要免疫原性基因以及推导出的氨基酸序列与变异株之间进行同源性分析。结果显示,Bartha-K61疫苗株与变异株gB蛋白序列中有23处特征性的差异,同源性为96.3%~96.9%;gC蛋白序列中有25处特征性的差异,同源性为92.7%~93.1%;gD蛋白序列中有10处特征性的差异,同源性为96.8%~97.3%;以gB、gC和gD氨基酸序列建立的进化分析结果显示,Bartha-K61疫苗株与变异株分属两个不同进化分支。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 bartha-k61 免疫原性基因
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Strain Softening and Hardening Behavior in AZ61 Magnesium Alloy 被引量:7
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作者 Haitao ZHOU, Liufa LIU, Qudong WANG, Da LU, Xiaoqin ZENG and Wenjiang DINGNational Engineering Research Center of Light Alloys Net Forming, School of Materials Science and Engineering, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200030, China 《Journal of Materials Science & Technology》 SCIE EI CAS CSCD 2004年第6期691-693,共3页
The deformation behavior of AZ61 Mg alloy during hot deformation has been investigated in wide temperature and strain rate range by a Gleeble simulator. Specimens are deformed in compression in the temperature range o... The deformation behavior of AZ61 Mg alloy during hot deformation has been investigated in wide temperature and strain rate range by a Gleeble simulator. Specimens are deformed in compression in the temperature range of 523-673 K and at strain rates of 0.001-1 s-1. It is found that the flow curves exhibit a peak and then decrease towards steady-state of classical DRX, which decrease with rising temperature and decreasing strain rate. The deformation behavior of the specimens can be attributed to the occurrence of strain hardening and softening. As stress decreases, the strain hardening rate declines at a fast rate when temperature rises or strain rate decreases. The shapes of θ-σ curves indicate some important features such as subgrain formation, the criticai stress, the peak stress and steady stress. The onset of DRX can be determined by the point of inflection on θ-σ or Inθ-σ curves. 展开更多
关键词 AZ61 Mg alloy RECRYSTALLIZATION strain hardening and softening
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利用高效价Bartha-K61株疫苗防控净化猪伪狂犬病的研究与实践 被引量:3
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作者 陈耀 杨傲冰 +2 位作者 白挨泉 林德锐 马春全 《中国猪业》 2020年第3期54-56,60,共4页
自2011年以来,我国猪场陆续发现PRV变异毒株感染导致的疫情,对我国养猪业造成了巨大的威胁,引起了行业的高度关注。目前,疫苗仍然是防控PRV的最主要手段,本文总结了2个规模种猪场通过高效价Bartha-K61株疫苗免疫防控、净化PRV的相关案例... 自2011年以来,我国猪场陆续发现PRV变异毒株感染导致的疫情,对我国养猪业造成了巨大的威胁,引起了行业的高度关注。目前,疫苗仍然是防控PRV的最主要手段,本文总结了2个规模种猪场通过高效价Bartha-K61株疫苗免疫防控、净化PRV的相关案例,为猪场防控PRV提供参考。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 bartha-k61 疫苗 净化
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猪伪狂犬病活疫苗Bartha-K61株对流行毒株的免疫效力研究 被引量:4
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作者 吴文福 黄秋雪 +5 位作者 侯高伟 林益坤 赖月辉 牛贝贝 吉艺宽 李宁 《广东畜牧兽医科技》 2019年第3期40-43,51,52,共6页
本研究通过对不同的免疫剂量免疫仔猪和母猪免疫后所产仔猪进行攻毒,以评估该疫苗对伪狂犬病毒(PRV)流行强毒株的保护效果。取3~4周龄PRV抗体阴性仔猪,以106.0组织半数感染量(TCID50)、106.5TCID50、107.0TCID50剂量接种猪PRV活疫苗(Bar... 本研究通过对不同的免疫剂量免疫仔猪和母猪免疫后所产仔猪进行攻毒,以评估该疫苗对伪狂犬病毒(PRV)流行强毒株的保护效果。取3~4周龄PRV抗体阴性仔猪,以106.0组织半数感染量(TCID50)、106.5TCID50、107.0TCID50剂量接种猪PRV活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源),免后10d连同条件的对照组和母源抗体阳性组用PRV流行强毒(GD株)攻毒,检测免疫后的抗体水平,记录攻毒后的体温、临床症状和病理变化。结果显示:免疫组试验猪在免后7dPRVgB抗体均转阳;各种剂量免疫组和母源抗体阳性组试验猪在PRV流行强毒攻击后,均未出现临床症状和病理变化,而对照组则出现明显的神经症状,体温升高,发病率100%(5/5),死亡率80%(4/5),剖检可见肝脏有白色坏死点和脑充血水肿。研究表明高病毒滴度的猪伪狂犬病活疫苗(BarthaK61株,传代细胞源)免疫猪后可对PRV流行强毒株提供良好的免疫保护。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病活疫苗 bartha-k61株(传代细胞源) 伪狂犬病流行毒株 免疫保护
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猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)的免疫程序研究 被引量:1
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作者 林德锐 吴文福 +4 位作者 黄秋雪 牛晓芸 李宁 邹伟斌 侯高伟 《广东畜牧兽医科技》 2018年第3期38-41,共4页
研制了三批猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源),采用对3~4周龄仔猪首免、一个月后加强免疫1次,妊娠母猪于分娩前3~4周进行一次免疫的免疫程序进行疫苗接种,并在免疫前和免疫后定期采血检测PRV抗体。结果表明:免疫前PRV母源抗体... 研制了三批猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源),采用对3~4周龄仔猪首免、一个月后加强免疫1次,妊娠母猪于分娩前3~4周进行一次免疫的免疫程序进行疫苗接种,并在免疫前和免疫后定期采血检测PRV抗体。结果表明:免疫前PRV母源抗体为阴性的仔猪在首免后7日PRV抗体检测为阳性,21日达到高峰,并在首免后130日PRV抗体仍维持在一个较高水平;免疫前PRV母源抗体检测为阳性的仔猪,在首免后3日和7日时PRV抗体略有下降,但随后上升并在首免后21日达到高峰,直至首免后130日仍为PRV抗体阳性;免疫前PRV抗体为阴性的妊娠母猪,在免疫后3日和7日PRV抗体有一定上升,免疫后14日达到较为理想水平,并于分娩前达到高峰,产仔数也较为理想;免疫前PRV抗体为阳性的妊娠母猪,在免疫后3日和7日PRV抗体水平稍有下降,但随后上升,并在分娩前达到高峰,产仔数也较为理想。综上结果表明,此免疫程序较为适合仔猪和妊娠母猪的免疫。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病活疫苗(bartha-k61 传代细胞源) 免疫程序
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ST传代细胞源猪伪狂犬病毒活疫苗(Bartha-K61株)超剂量免疫的安全性实验 被引量:2
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作者 林德锐 吴文福 +3 位作者 黄秋雪 李宁 赖月辉 侯高伟 《广东畜牧兽医科技》 2018年第2期48-51,共4页
ST传代细胞生产3批次伪狂犬病毒活疫苗(Bartha-K61株)中试产品,检验合格后对20~25日龄、50~55日龄健康猪以及妊娠后期的母猪,分别采用耳后颈部肌肉注射方式进行超剂量免疫接种,同时设立相应对照组。超剂量免疫后各组猪只精神、食欲、体... ST传代细胞生产3批次伪狂犬病毒活疫苗(Bartha-K61株)中试产品,检验合格后对20~25日龄、50~55日龄健康猪以及妊娠后期的母猪,分别采用耳后颈部肌肉注射方式进行超剂量免疫接种,同时设立相应对照组。超剂量免疫后各组猪只精神、食欲、体温、生产状况等经持续观察记录,均表现为正常。结果表明,ST传代细胞生产猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株)对不同日龄猪和妊娠后期母猪进行超剂量免疫接种均是安全的。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病活疫苗(bartha-k61 传代细胞源) 超剂量免疫
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猪脾转移因子提高Bartha-K61株伪狂犬病活疫苗免疫猪抗体水平的初探
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作者 陈上永 《江西畜牧兽医杂志》 2022年第3期16-19,共4页
为了解猪脾转移因子(TF)对伪狂犬病(PR)活疫苗(Bartha-K61株)免疫抗体的影响,本研究采用本课题组具有自主知识产权的中国发明专利制备3批猪脾TF,将PR活疫苗(Bartha-K61株)单独(单独免疫组)、分别与3批TF联合(联合免疫组1、联合免疫组2... 为了解猪脾转移因子(TF)对伪狂犬病(PR)活疫苗(Bartha-K61株)免疫抗体的影响,本研究采用本课题组具有自主知识产权的中国发明专利制备3批猪脾TF,将PR活疫苗(Bartha-K61株)单独(单独免疫组)、分别与3批TF联合(联合免疫组1、联合免疫组2和联合免疫组3)免疫PR病毒(PRV)gB抗体阴性仔猪,并设立非免疫空白组,采用ELISA方法检测PRV抗体水平。结果显示,免疫后第7 d、14 d、28 d、42 d和56 d,联合免疫组1、联合免疫组2和联合免疫组3的PRV免疫抗体阳性率分别比单独免疫组高30%~40%、20%~40%、0%、20%和40%~50%。说明TF可以提高PR活疫苗(Bartha-K61株)的免疫抗体水平,为PR的防控提供参考。 展开更多
关键词 转移因子 伪狂犬病活疫苗 bartha-k61 免疫抗体 阳性率
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伪狂犬病病毒BarthaK61株Us区缺失片段的鉴定 被引量:5
14
作者 彭金美 陈瑾 +4 位作者 田志军 王瑜 周艳君 安同庆 童光志 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期646-649,共4页
为利用PCR技术对伪狂犬病病毒(PRV)BarthaK61株us区的具体缺失情况进行分析,根据已发表的PRV全基因组序列设计了4对引物,以PRV双城株基因组作为对照,对us区进行扩增。对扩增片段的序列分析表明,BarthaK61株基因组的Us区缺失了348... 为利用PCR技术对伪狂犬病病毒(PRV)BarthaK61株us区的具体缺失情况进行分析,根据已发表的PRV全基因组序列设计了4对引物,以PRV双城株基因组作为对照,对us区进行扩增。对扩增片段的序列分析表明,BarthaK61株基因组的Us区缺失了3489bp,为第122560~126049位核苷酸,其间包括部分gI基因、全部的gE和Us9基因以及部分Us2基因。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 Bartha K61 缺失
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Microstructure and mechanical properties of AZ61 magnesium alloy parts achieved by thixo-extruding semisolid billets prepared by new SIMA 被引量:13
15
作者 姜巨福 王迎 +3 位作者 柳君 曲建俊 杜之明 罗守靖 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2013年第3期576-585,共10页
New strain induced melt activation(new SIMA) method was employed to prepare high-quality semisolid billet of AZ61 magnesium alloy.Optical microscopy and tensile test were used to study the microstructure and mechani... New strain induced melt activation(new SIMA) method was employed to prepare high-quality semisolid billet of AZ61 magnesium alloy.Optical microscopy and tensile test were used to study the microstructure and mechanical properties of the thixo-extruded component.The results showed that the optimal process parameters for achieving the complete filling status involved the applied pressure of 784 MPa,the pressure holding time of 90 s and the die temperature of 450 ℃.Compared to semisolid isothermal treatment,high mechanical properties such as the tensile strength of 300.5 MPa and elongation of 22% and fine microstructure were obtained in the thixo-extruded parts.With increasing the isothermal temperature and holding time,the tensile strength and elongation were increased firstly and then decreased.When the press pass was increased from 1 to 4,the tensile strength and elongation of the thixo-extruded parts were greatly enhanced and microstructure was refined obviously. 展开更多
关键词 AZ61 magnesium alloy semisolid billets new strain induced melt activation THIXO-EXTRUSION
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生防菌Ⅲ-61抗真菌活性产物的摇瓶发酵
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作者 刘伟成 刘学敏 +3 位作者 刘霆 卢彩鸽 潘争艳 周美娟 《菌物研究》 CAS 2009年第3期153-158,163,共7页
对生防链霉菌Ⅲ-61产生抗真菌活性物质的摇瓶发酵工艺进行了研究。利用正交试验设计优化了发酵培养基组分,其最适配方为黄豆粉1.5%,蛋白胨0.3%,蔗糖1.0%,淀粉1.3%,磷酸二氢钾0.02%,硫酸镁0.025%,氯化钠0.5%,配成水溶液,调pH至7~7.4,加... 对生防链霉菌Ⅲ-61产生抗真菌活性物质的摇瓶发酵工艺进行了研究。利用正交试验设计优化了发酵培养基组分,其最适配方为黄豆粉1.5%,蛋白胨0.3%,蔗糖1.0%,淀粉1.3%,磷酸二氢钾0.02%,硫酸镁0.025%,氯化钠0.5%,配成水溶液,调pH至7~7.4,加碳酸钙1%。通过单因素试验,筛选获得了最优培养条件组合:液体种龄24h,接种量5%~10%,500mL摇瓶培养基装量为80mL,摇床转速240r/min,培养温度31℃,发酵周期96~120h。此优化的发酵培养基与发酵条件的组合所得菌株Ⅲ-61发酵液对主要靶标黄瓜灰霉病菌的抑菌圈直径达49.5mm,较优化前提高了45.59%。 展开更多
关键词 链霉菌Ⅲ-61 抗真菌活性 发酵培养基 培养条件
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Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析 被引量:14
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作者 严伟东 李畅 +2 位作者 于学祥 何启盖 杨汉春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期15-18,23,I0001,共6页
为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用P... 为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用PRV-EA株和流行变异PRV-XT株攻毒,观察仔猪的临床症状和病理变化,检测鼻腔排毒情况。结果显示,Bartha K61株活疫苗可对经典PRV-EA株攻毒提供良好的免疫保护,但对变异毒株PRV-XT仅能提供部分保护。PRV-EA株攻毒组所有猪只未出现明显临床症状,而PRV-XT攻毒组出现较为明显的临床症状。表明Bartha K61株活疫苗对传统毒株有良好保护效果,而对流行变异毒株不能提供完全保护。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 Bartha K61株活疫苗 PRV-EA株 变异强毒PRV-XT株 攻毒保护试验
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带BAC质粒的重组伪狂犬病毒的构建及其体外生长特性研究 被引量:15
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作者 彭金美 王瑜 +4 位作者 田志军 周艳君 陈瑾 安同庆 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-15,共6页
本研究通过基因克隆技术以伪狂犬病病毒(PRV)弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源重组序列,以绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载... 本研究通过基因克隆技术以伪狂犬病病毒(PRV)弱毒疫苗株Bartha K61株的部分TK基因作为同源重组序列,以绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,构建了带LoxP位点的pUCTKAB-EGFP质粒,将pBeloBACII线性化后插入到pUCTKAB-EGFP中构建了转移载体pUCTK-EGFP-BACII。将PRV基因组和转移载体共转染Vero细胞,利用同源重组在Bartha K61株的TK基因中插入了BAC质粒和绿色荧光蛋白筛选标记,经过11轮噬斑纯化和鉴定证实获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC。通过噬斑试验和一步生长曲线测定等方法对重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC的生长特性进行研究,结果发现带有BAC质粒及筛选标记的重组病毒rv-PRVBAC在体外细胞培养中的增殖速度与亲本毒Bartha K61株相比没有明显差别,说明大的基因片段的插入没有影响重组病毒在体外的繁殖速度。重组病毒rv-PRVBAC在Vero细胞上盲传18代,其绿色荧光蛋白仍能够稳定表达,通过PCR鉴定可以检测到插入的外源片段和插入位点两侧的病毒基因序列,表明所获得的重组病毒rv-PRVBAC得到了稳定遗传。本研究成功获得了带BAC质粒的重组伪狂犬病毒rv-PRVBAC,为进一步开展PRV的细菌人工染色体的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 Bartha K61 BAC 重组病毒
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免疫增强剂对猪伪狂犬灭活疫苗的免疫增强作用 被引量:5
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作者 耿文学 唐波 +3 位作者 华涛 侯继波 张道华 许家荣 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第11期1828-1833,共6页
为了评价免疫增强剂VA5对猪伪狂犬病毒灭活疫苗的免疫增强作用,将VA5与灭活疫苗混合并制成疫苗。通过常规Bartha-K61株灭活疫苗、含免疫增强剂灭活疫苗和Bartha-K61活疫苗3组免疫效力对比试验,首次免疫后14和35 d对猪进行采血,并且进行... 为了评价免疫增强剂VA5对猪伪狂犬病毒灭活疫苗的免疫增强作用,将VA5与灭活疫苗混合并制成疫苗。通过常规Bartha-K61株灭活疫苗、含免疫增强剂灭活疫苗和Bartha-K61活疫苗3组免疫效力对比试验,首次免疫后14和35 d对猪进行采血,并且进行中和实验以及对相关细胞因子进行检测。结果表明,该免疫增强剂能够显著地提高猪伪狂犬灭活疫苗血清中抗体产生,同时能显著提高猪外周血淋巴细胞(PBMC)中IL-2和IFN-γ mRNA表达。交叉中和试验表明,VA5能够显著地提高猪伪狂犬灭活疫苗对伪狂犬流行变异株的中和作用。试验表明,VA5能够显著提升猪伪狂犬病毒灭活疫苗体液与细胞免疫,为研制免疫效果更好的灭活疫苗提供了依据。 展开更多
关键词 免疫增强剂 伪狂犬病毒灭活疫苗 bartha-k61 免疫效力
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伪狂犬病病毒(PRV)不同毒株抗原相关性研究 被引量:1
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作者 程晓霞 车勇良 +6 位作者 王劭 肖世峰 朱小丽 陈仕龙 林锋强 陈少莺 周伦江 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第4期337-340,共4页
为了解PRV不同毒株之间的抗原性差异,评价弱毒FB株预防新型PRV的潜力,以4株PRV(FA、FB、Bartha-K61和FJ2012)毒株及其高免血清为材料,应用交叉中和试验测定PRV不同毒株的抗原性差异,通过FB免疫猪攻毒试验评价弱毒FB株对新型PRV的保护潜... 为了解PRV不同毒株之间的抗原性差异,评价弱毒FB株预防新型PRV的潜力,以4株PRV(FA、FB、Bartha-K61和FJ2012)毒株及其高免血清为材料,应用交叉中和试验测定PRV不同毒株的抗原性差异,通过FB免疫猪攻毒试验评价弱毒FB株对新型PRV的保护潜力。结果表明:中和抗体测定表明兔抗FB株、FA株、Bartha-K61株和FJ2012株高免血清的中和效价分别为1∶54、1∶91、1∶91和1∶215。交叉中和试验显示FB株与FA株、FB株与FJ2012株、FA株与FJ2012株的抗原相关性(R值)均大于0.8,Bartha-K61株与FA株、FB株、FJ2012株的R值均小于0.4,表明FB株与FJ2012株的抗原相关性高于Bartha-K61株与FJ2012株。仔猪免疫攻毒试验显示FB免疫猪能抵抗新型PRV(FJ2012株)的攻毒,保护率100%。提示PRV弱毒FB株有望成为预防新型猪伪狂犬病毒(FJ2012株)的疫苗候选株。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(PRV) FA株 FB株 bartha-k61 FJ2012株 抗原相关性 免疫保护
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