T_3对人神经干细胞分化为少突胶质细胞的影响

目的 以体外诱导生成的人神经干细胞 (NSCs)为模型 ,研究甲状腺激素 (TH)对其分化的影响。 方法 无菌状态下取因治疗目的而终止妊娠的胎龄 10～ 2 2周的人胎大脑半球 ,机械法分散细胞后 ,以 10 5个 ml细胞密度接种于含N 2配方的DMEM/F12培养基中 ,同时添加表皮生长因子 (EGF ,2 0 μg L)和 /或碱性成纤维生长因子(bFGF ,2 0 μg L)。采用自然分化以及T3诱导的方法诱导分化 ,免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型 ,抗体分别为NF 2 0 0、GFAP、Gal C ,并采用抗MBP、O4、A2B5抗体鉴别少突胶质细胞发育的不同阶段。 结果 T3有助于向胶质细胞方向发展 ,包括少突与星形胶质细胞 ,MPB阳性细胞比例超过 80 % ,尤其在EGF +T3组 ,这种现象更为突出。 结论 NSCs的定时分化是内外源信号共同作用的结果。TH就是这样一种信号 ,激活“生物钟”机制的效应组件 。

碱性成纤维细胞生长因子在周围神经损伤局部的基因表达与细胞定位

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)mRNA在周围神经损伤后的局部表达规律及细胞定位。方法60只Wistar大鼠随机分为正常组(4只)、对照组和实验组(各28只)。用改良持针器钳夹大鼠坐骨神经制成神经挤压伤模型 ,分别于术后4h ,1、3、7、14、21、28d处死大鼠 ,切取包括挤压伤及其上下各2mm的神经段 ,应用引物原位标记技术 (primedinsitulabel ing,PRINS) ,结合光镜及计算机图像分析系统检测损伤局部的bFGFmRNA表达变化及细胞定位 ,分别以图像分析结果中灰度值和阳性面积值表示bFGFmRNA的表达强度和阳性细胞数。结果实验组于术后4h ,表达强度开始增加 (176.07±16.64) ,阳性细胞数增多[(725.33±60.45) μm2] ,与正常组及对照组比较差异有显著性意义 (均P<0.05) ;术后7d ,表达强度最高(122.89±10.77) ,阳性细胞数最多[(1876.35±108.40)μm2] ,与对照组比较差异有显著性意义 (均P<0.05) ;术后28d表达强度(189.85±19.51)及阳性细胞数[(605.25±36.40) μm2]均降至正常组及对照组水平 (P>0.05)。