目的:探讨碱性核蛋白1(BNC1)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法:通过q PCR法检测ESCC细胞和正常食管上皮细胞中BNC1 m RNA的表达水平,免疫组织化学染色法检测10例ESCC患者癌及癌旁...目的:探讨碱性核蛋白1(BNC1)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法:通过q PCR法检测ESCC细胞和正常食管上皮细胞中BNC1 m RNA的表达水平,免疫组织化学染色法检测10例ESCC患者癌及癌旁组织中BNC1的蛋白表达水平。利用si RNA敲低BNC1在KYSE-150和KYSE-30细胞中的表达,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术检测BNC1对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡等的影响。通过CHIP-seq实验和GEPIA在线网站数据分析并结合敲低BNC1后的转录组测序数据分析筛选BNC1调控的下游靶基因,q PCR法验证BNC1敲低后靶基因的表达变化,并用双荧光素酶报告基因实验验证BNC1对靶基因的调控作用。结果:BNC1 m RNA和蛋白水平在ESCC组织中较癌旁组织高表达(均P<0.01)。敲低BNC1可明显抑制KYSE-150、KYSE-30细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01),将细胞阻滞于G1期并促进细胞的凋亡(均P<0.01)。CHIP-seq实验结果和在线网站GEPIA数据分析结合敲低BNC1后的转录组测序数据显示,G蛋白通路抑制因子1(GPS1)可能为BNC1正向调控的致癌靶基因。q PCR法和双荧光素酶报告基因实验结果显示,BNC1对GPS1有调控作用(P<0.01)。结论:BNC1在ESCC组织和细胞中高表达,干扰BNC1可显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,阻滞细胞于G1期并促进细胞凋亡,其机制可能是BNC1通过靶向GPS1调控ESCC细胞的恶性生物学行为。展开更多
文摘目的:探讨碱性核蛋白1(BNC1)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法:通过q PCR法检测ESCC细胞和正常食管上皮细胞中BNC1 m RNA的表达水平,免疫组织化学染色法检测10例ESCC患者癌及癌旁组织中BNC1的蛋白表达水平。利用si RNA敲低BNC1在KYSE-150和KYSE-30细胞中的表达,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术检测BNC1对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡等的影响。通过CHIP-seq实验和GEPIA在线网站数据分析并结合敲低BNC1后的转录组测序数据分析筛选BNC1调控的下游靶基因,q PCR法验证BNC1敲低后靶基因的表达变化,并用双荧光素酶报告基因实验验证BNC1对靶基因的调控作用。结果:BNC1 m RNA和蛋白水平在ESCC组织中较癌旁组织高表达(均P<0.01)。敲低BNC1可明显抑制KYSE-150、KYSE-30细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01),将细胞阻滞于G1期并促进细胞的凋亡(均P<0.01)。CHIP-seq实验结果和在线网站GEPIA数据分析结合敲低BNC1后的转录组测序数据显示,G蛋白通路抑制因子1(GPS1)可能为BNC1正向调控的致癌靶基因。q PCR法和双荧光素酶报告基因实验结果显示,BNC1对GPS1有调控作用(P<0.01)。结论:BNC1在ESCC组织和细胞中高表达,干扰BNC1可显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,阻滞细胞于G1期并促进细胞凋亡,其机制可能是BNC1通过靶向GPS1调控ESCC细胞的恶性生物学行为。
