基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术分析胀果甘草地上部分的黄酮类化合物

目的鉴定胀果甘草地上部分的黄酮类化合物,为后续药效及质量评价与控制等的研究奠定基础。方法用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)联用技术,用Waters Acquity UPLC BEH-C 18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-5 mL·L^(-1)甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^(-1),在电喷雾正负离子模式下采集数据。依据高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子的精确分子质量信息及相关文献数据,确证黄酮类化合物及其特征碎片离子的分子组成。结果鉴定出胀果甘草地上部分的乙醇提取物共含有95个黄酮类化合物,其中水溶性部位有52个黄酮,主要以黄酮苷类为主;脂溶性部位有83个黄酮类化合物,主要为黄酮苷元类。水溶性和脂溶性部位含37个共有黄酮,主要为黄酮苷、二氢黄酮。结论胀果甘草地上部分含有多种黄酮类化合物,用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术可以快速、准确、灵敏地鉴别胀果甘草地上部分的黄酮类化合物的结构。

气候变化背景下花叶海棠的适生区分析和预测

为保护我国特有种花叶海棠[Malustransitoria(Batalin)C.K.Schneider],并选择合适的人工栽培区域,本研究基于86个花叶海棠精确分布点和13个气候因子,利用MaxEnt建立最大熵模型,计算花叶海棠在过去3个气候时期、当前气候条件下及未来气候条件下潜在的分布区,预测气候变化条件下花叶海棠潜在的分布变化趋势及可能的质心迁移路线。根据模型分析发现,影响花叶海棠在我国分布的最主要气候因子为最冷季度平均温度,其次为最冷月最低温度和最干季度平均温度,3个因子的贡献率分别为13.05%、12.08%和11.36%。当前气候下花叶海棠适生区占我国国土面积的26.82%,高适生区以甘肃南部与宁夏南部为中心,主要分布在青海东部、陕西北部、四川北部和西藏东南部地区。随着气候变化,花叶海棠分布区域也在不断迁移,其在我国的潜在分布区会随着温度的增加而增加,同时适生区也在不断北移,未来气候条件下分布质心可能会迁移至内蒙古南部。该结果为其种质资源发掘和保护、人工驯化和栽培方面提供基础数据和科学依据。

云南鬼灯檠属植物中岩白菜素含量比较

[目的]比较云南鬼灯檠属植物不同种及产地样本的岩白菜素含量。[方法]采用HPLC测定云南鬼灯檠属植物不同种及产地样本的岩白菜素含量。色谱柱为AgilentZorbaxXDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～10 min,0%～20%A,100%～80%B),流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl,检测波长275 nm。[结果]岩白菜素在3～48μg/ml之间与吸光度值呈良好的线性关系,相关系数为0.999 6。4个种及变种的鬼灯檠属植物样本岩白菜素含量以西南鬼灯檠平均含量最高为5.59%,七叶鬼灯檠平均含量最低为3.45%。[结论]鬼灯檠属植物不同种之间岩白菜素含量不同,同种不同居群之间的岩白菜素含量变化也明显。

七叶鬼灯檠挥发油及不同提取物抑菌活性的研究

研究了七叶鬼灯檠根状茎的挥发油及不同提取物的体外抑菌活性,为七叶鬼灯檠资源开发利用提供科学依据。采用滤纸片法和牛津杯法对七叶鬼灯檠根状茎挥发油及其甲醇、丙酮和乙酸乙酯提取物体外抑菌能力进行评价。结果表明,七叶鬼灯檠根状茎挥发油表现出较强的抑菌活性,对肺炎克雷伯氏菌抑制作用最强,其次为巨大芽孢杆菌和粘红酵母,抑菌圈直径分别为(29.11±0.31)、(26.77±0.35)、(26.20±0.62)mm。在不同溶剂提取物中,丙酮提取物和甲醇提取物均有明显的抑菌效果,解脂假丝酵母对提取物最敏感。七叶鬼灯檠的挥发油及提取物含有天然抑菌活性物质,具有光谱的抑菌效果,值得进一步开发利用。

响应面法优化新疆胀果甘草多糖的提取工艺

研究以乙醇为提取剂从新疆胀果甘草中提取多糖的工艺。在单因素实验的基础上,运用Box-Behnken中心组合实验和响应面法考察了提取温度、提取时间和料液比3个因素对甘草多糖提取率的影响,并优化了提取工艺。结果表明最佳工艺条件为:温度93℃,时间83min,料液比为21∶1(mg∶L)。在此条件下胀果甘草多糖提取率的预测值为10.59%,验证实验值为10.48%,两者相近,说明响应面法优化胀果甘草多糖提取的工艺可行。

青钱柳叶的结构鉴定

目的研究青钱柳叶片的形态结构。方法利用叶表皮离析方法、脉序离析法、石蜡制片和扫描电镜法对青钱柳叶片的形态结构进行了研究。结果青钱柳叶表皮有许多小乳突,腺毛,盾状鳞片和非腺毛表皮毛;气孔器不规则型,仅分布于下表面;靠近表皮的叶肉组织中有规律地分布含簇晶的细胞;主脉中维管组织环状,封闭,具有一个副维管束;二级脉在叶缘内分支,相互连接形成脉环,三级脉及顶型,脉间区内充满分支的自由结束的小细脉。结论首次研究青钱柳叶的结构,利用这些叶微观结构特征能够将青钱柳和胡桃科其他植物区分开来。

新疆甘草内生细菌的分离及其系统发育分析

采用组织分离法和研磨分离法从甘草的根、茎、叶中共分离到129株内生细菌,经鉴定属于13个属,分别为芽孢杆菌属、伯克霍尔德氏菌属、棒杆菌属、柠檬酸细菌属、肠杆菌属、库克菌属、微杆菌属、类芽孢杆菌、叶杆菌属、假单胞菌属、沙雷氏菌属、葡萄球菌属和寡养单胞菌属。同时运用纯培养法和基于16S rRNA基因序列的系统发育分析对新疆胀果甘草中可培养内生细菌进行了研究。

秋水仙碱诱导甘草四倍体的研究

以胀果甘草成熟种子为材料,消毒后在培养皿中萌动处理12 h、24 h、36 h,用浓度为0.05%、0.075%、0.10%的秋水仙碱处理12 h、24 h、36 h,来进行四倍体的诱导,并对诱导处理后获得的再生植株进行染色体鉴定。结果表明:种子萌动处理24 h后,用浓度为0.075%的秋水仙碱溶液处理24 h诱导效果最好,变异率为41%。其体细胞染色体数目由2n=2x=16变为2n=4x=32。

3种植物的分布新记录

记述了蚤草（Pulicaria prostrata（Gilib.）Ascher）（菊科）、黄花羊角蒿（Incarvillea sinensin var. przewalskii（Batalin））（紫葳科）和坚硬女娄菜（Silene firmaSieb et Zucc.）（石竹科）3种植物的分布新纪录。蚤草是黄土高原植物新记录,蚤草在国内分布于新疆北部和西部,在黄土高原于宁夏海原南部的月亮山首次发现。黄花羊角蒿,早记载于甘肃兰州市,后记载于宁夏罗山,调查表明广泛分布于西北部农牧交错带东部海拔1 200~2 000 m丘陵地区。坚硬女娄菜首次记录于陕北靖边、吴起、志丹的西北农牧交错带地区。

七叶鬼灯檠种质资源遗传多样性的ISSR分析

目的：进行七叶鬼灯檠种质资源的遗传多样性研究。方法：对24份七叶鬼灯檠种质进行ISSR分析。利用NTSYS-pc 2.11F软件分析遗传相似系数,UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图。结果：8条引物共得到109条扩增条带,其中有96条呈现多态性,占88.1%。24份七叶鬼灯檠种质间的遗传距离（GD）变化范围为0.115~0.877,平均为0.421。聚类结果显示24份七叶鬼灯檠材料可划分为2个类群5小组,地理分布对材料的种质亲缘关系有较大影响。结论：七叶鬼灯檠的遗传多样性水平较高,种质间的亲缘关系和地理位置有一定相关性。

基于HPLC-DAD指纹图谱和化学计量法分析的红药子抗氧化活性谱效关联研究

目的:建立红药子药材醇提物的HPLC-DAD指纹图谱,分析指纹图谱与抗氧化作用的关联性,挖掘红药子抗氧化的物质基础,为控制红药子的质量提供依据。方法:通过HPLC-DAD法建立10批红药子醇提物的指纹图谱,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)清除活性、超氧阴离子自由基清除活性、羟自由基清除活性为指标评价红药子药材的抗氧化活性,并采用偏最小二乘法(PLS)分析HPLC-DAD指纹图谱与抗氧化活性关系,筛选红药子药材指标性成分。结果:10批红药子的指纹图谱共匹配出21个共有峰,其相似度均大于0.90。通过化学计量学方法分析,综合相关系数和VIP值两个指标,确定9个共有峰与DPPH自由基清除活性呈正相关且VIP值均大于1,3个共有峰与超氧阴离子清除活性呈正相关且VIP值均大于1,8个共有峰与羟自由基清除活性呈正相关且VIP值均大于1。最后经HPLC-QTOF-MS鉴别了红药子药材指纹图谱中10个峰,共鉴定出7个共有特征峰,3个非共有峰。其中,与抗氧化活性最相关的三个峰10、12、14分别为绿原酸、岩白菜素、隐绿原酸。结论:建立的红药子药材的指纹图谱方法简单可行,通过谱效关系分析筛选出抗氧化活性的重要成分,为明确红药子抗氧化作用提供物质基础,为整体控制红药子质量提供依据。

新疆胀果甘草粗提物和精制物对宫颈癌细胞的影响

目的研究新疆胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Batalin)粗提物和精制物体外抗宫颈癌的活性。方法利用超声辅助乙醇对新疆胀果甘草进行粗提取,得到粗提物后,进一步利用大孔树脂柱层析法对粗提物进行精制,得到精制物,并利用紫外分光光度法对粗提物及精制物总黄酮的含量进行测定,测得粗提物总黄酮含量为5.6%,精制物总黄酮含量为56.4%。将粗提物和精制物分别作为试药,顺铂为阳性药。采用人宫颈癌HeLa和SiHa细胞作为体外实验对象,用MTT法测定对宫颈癌细胞抑制率,用流式细胞仪测定胀果甘草精制物对人宫颈癌细胞的凋亡作用。结果新疆胀果甘草粗提物和精制物均能明显抑制宫颈癌HeLa和SiHa细胞的生长,且2种药的抑制效应呈时间和质量浓度依赖性,但在同一质量浓度下,精制物的抑制率更高。流式细胞测定结果显示,甘草粗提物、精制物能够显著诱导宫颈癌HeLa和SiHa细胞凋亡。结论新疆胀果甘草粗提物和精制物能够有效抑制宫颈癌细胞增殖,促进宫颈癌细胞凋亡,且精制物的抗癌活性明显优于粗提物。

青钱柳叶化学成分的研究

目的 研究青钱柳叶的化学成分。方法 对青钱柳叶乙醇提取物分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 从中分离得到11个化合物,分别鉴定为quercetin-3-O-(4″-methoxy)-α-L-rahmnopyranosyl (1)、山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷(2)、山柰酚(3)、金丝桃苷(4)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯(5)、3-α-亚麻酸甘油酯1-O-[α-D-半乳糖基-(1→6)-O-β-D-半乳糖苷](6)、丁香酚-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、青钱柳酸B (8)、icariside E4 (9)、(-)-isolariciresinol-2a-O-β-D-xylopyranosie (10)、(3S)-3′,4″-epoxy-1-(4′-hydroxylphenyl)-7-(3″-hydroxylphenyl)heptane-3-hydroxy (11)。结论 化合物1、5、6、7、9、10、11均为首次从该植物中分离得到。

红药子质量标准研究

目的建立红药子药材的定性定量评价方法。方法采用薄层色谱法建立红药子的定性鉴别方法,采用高效液相色谱法建立红药子中岩白菜素的定量分析方法,参照《中国药典》(2015年)附录相关方法测定红药子中水分、灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量。结果建立的薄层色谱法斑点清晰,重复性好,可以特征性地实现12批红药子药材的定性鉴别。红药子中岩白菜素测定的标准曲线为y=6249.8056x+369.11127,线性范围为0.0627~8.03 mg/mL,相关系数为0.9992,日内精密度RSD=0.64%,平均加样回收率为96.20%,RSD=2.97%。12批红药子中岩白菜素、水分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、水溶性浸出物含量分别为8.94%~12.59%、0.25%~0.95%、27.10%~40.32%、16.06%~26.58%、3.31%~9.45%。结论建立的薄层色谱法可以实现红药子药材的定性鉴别,高效液相色谱法简便、可行,具有较高的精密度和准确性,可用于红药子中岩白菜素的含量测定。

两种杜鹃生态生物学特性及园林利用价值

对循化孟达和大通达板山天然分布的黄毛杜鹃、陇蜀杜鹃进行调查研究。结果表明:黄毛杜鹃种子发芽率较高,为56.70%,种子繁殖容易。两种杜鹃为常绿,阔叶灌木,花期20d。花大,色白、芳香,具有较高的园林利用价值。

秤杆七药材的质量评价

目的:对秤杆七进行质量评价。方法:鉴别秤杆七的植物形态、药材性状、显微特征;采用TLC法进行定性鉴别;HPLC法测定岩白菜素、没食子酸的含量。结果:对秤杆七的植物形态、药材性状、显微特征进行了描述;建立了秤杆七TLC鉴别方法,斑点清晰,分离度好,具有较好的专属性;岩白菜素、没食子酸分别在1.54~7.72μg,0.05~0.31μg与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.86%、98.03%,RSD(n=6)分别为0.38%、0.19%。结论:该方法准确、简便、重复性好,适用于秤杆七药材的质量评价。

鬼灯檠鲜品不同溶剂提取液中挥发性成分的研究

目的:研究鬼灯檠鲜品不同溶剂提取液中挥发性成分的组成。方法:采用乙酸乙酯、无水乙醇、乙醚、石油醚分别浸提鬼灯檠,GC-MS法对各提取液中化学成分进行分离鉴定,峰面积归一化法计算各组分相对含量。结果:鬼灯檠鲜品挥发性成分主要由脂肪酸、香叶醇、香茅醇、香茅醛及一种香叶醇基糖苷等组成,香叶醇是构成其香味的重要物质基础。结论:揭示了鬼灯檠根茎鲜品不同溶剂提取液的化学成分,对进一步研究鬼灯檠、指导其产地加工提供帮助。

多蕊商陆脂溶性成分的GC-MS分析

目的分析多蕊商陆脂溶性化学成分。方法多蕊商陆全草的甲醇提取物加水后,用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯部分进行硅胶柱层析,石油醚洗脱部分得其脂溶性成分,通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,对其中的化学成分进行分析鉴定。结果通过计算机检索,鉴定了其中的45个化合物,占总量的97.73%,其中含量较大的组分依次是亚麻油酸、4-羟基-4-甲基-2-戊酮、1,3,5-三甲苯、苯乙烯、反式-9-十八碳烯酸、丙烯酸异辛酯等。结论多蕊商陆脂溶性化学成分主要为脂肪酸、烯烃类及芳香类化合物,其中的多种成分具有药理活性,为多蕊商陆的开发利用提供了依据。

早花忍冬离体快繁技术

以东北地区早春植物早花忍冬的幼嫩茎段为外植体,MS培养基为基本培养基,添加不同的植物生长调节物质,进行了离体快速繁殖技术研究。结果表明:采用2.0%NaClO处理20min的灭菌效果好;诱导早花忍冬侧芽分化的适宜培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;增殖培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂,30d的增殖系数为8;最佳的生根培养基为1/2MS+0.3mg/L IBA+0.3mg/L NAA+1.5%蔗糖+0.7%琼脂,生根率达100%。

黄花角蒿的化学成分研究

目的对黄花角蒿Incarvillea sinensis var.przewalskii全草的化学成分进行研究。方法采用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20以及半制备高效液相色谱等多种色谱技术进行分离纯化,运用NMR、MS等波谱学方法以及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从黄花角蒿全草80%乙醇水溶液提取物中分离得到13个化合物,包括生物碱和苯乙醇苷类化合物,其结构分别鉴定为对丁氧基红景天苷(1)、角蒿辛C(2)、角蒿酯碱(3)、7-羟基多花藤碱(4)、角蒿原碱(5)、苯乙醇葡萄糖苷(6)、地黄苷(7)、类叶升麻苷(8)、去酰基异角胡麻苷(9)、去咖啡酰基类叶升麻苷(10)、carceorioside B(11)、红景天苷(12)、去酰基类叶升麻苷二甲醚(13)。结论化合物1为新化合物,其他化合物均为首次从该植物中分离得到。