龙须藤提取物的镇痛抗炎作用

目的研究龙须藤乙醇提取物的镇痛抗炎作用,筛选出龙须藤镇痛抗炎作用的有效部位。方法采用热板法和冰乙酸扭体法观察镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳郭肿胀法观察抗炎作用。结果龙须藤醇提物具有较好的镇痛抗炎作用;龙须藤醇提物的乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物具有显著的镇痛作用,并能较好抑制炎症的组织液渗出。结论龙须藤醇提物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位可能是龙须藤镇痛抗炎作用的有效部位。

龙须藤的化学成分研究

本文旨在研究龙须藤Bauhinia championii(Benth.)Benth藤的化学成分。本实验运用硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20等柱色谱手段进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。分离得到7个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇、胡萝卜苷、正三十烷、正六十烷、槲皮素、杨梅素和oblongixanthone A。其中化合物oblongixanthone A为首次从该植物中分离得到。

龙须藤化学成分及其抗类风湿性关节炎活性研究

目的:研究龙须藤的化学成分及其对滑膜细胞的抑制作用。方法:运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法,对龙须藤乙酸乙酯部位化学成分进行分离纯化,利用现代波谱学技术鉴定化合物结构,采用MTT法对分离得到的单体化合物进行体外抑制滑膜细胞增殖的活性筛选。结果:从龙须藤乙酸乙酯部位分离得到9个化合物,分别鉴定为:豆甾醇-4-烯-3-酮(1)、β-谷甾醇棕榈酸酯(2)、1-(2,4-二羟基苯基)-3-(3,4-二羟基苯基)-3-羟丙基-1-酮(3)、7-羟基香豆素(4)、没食子酸(5)、松柏醛(6)、1-(3,4-二甲氧基苯基)-1-丙醇(7)、丁香酸(8)、没食子酸乙酯(9)。结论:其中,化合物1～4、6、7、9为首次从龙须藤中分离得到,化合物1、3、6、7、9为首次从该属植物中分离得到。MTT法结果显示化合物1～9均对滑膜细胞具有一定的抑制作用,其中化合物5抑制作用最强。

基于响应曲面法的龙须藤多糖提取条件优化

采用响应曲面法分析与确定龙须藤多糖提取工艺,通过单因素实验确定影响多糖提取的主要影响因素,然后在单因素实验的基础上,采用响应曲面法分析提取因素对龙须藤多糖含量的影响,得出龙须藤多糖提取的最优条件为:提取温度100℃、提取时间4 h、料液比1∶23、提取次数为2次。在此条件下龙须藤多糖提取率理论值为3.12%,实测值为2.98%。

大孔吸附树脂分离纯化龙须藤总黄酮的工艺研究

目的研究AB-8大孔树脂分离纯化龙须藤黄酮的工艺条件。方法通过静态吸附-解吸附实验筛选最佳大孔树脂,并以总黄酮含量为考核指标,采用L9(34)正交试验法对影响AB-8大孔树脂分离纯化龙须藤黄酮的因素进行考察,确定最佳工艺条件。结果最佳工艺条件为:采用AB-8型大孔树脂,取龙须藤黄酮提取液(含生药0.5 g/mL)上样,树脂用量为4倍生药量,洗脱剂采用体积分数50%乙醇,用量为16倍生药量。结论该工艺条件科学合理,可有效地用于龙须藤黄酮的分离富集。

龙须藤中黄酮类化合物提取条件的研究

目的探讨龙须藤中以芦丁为指标的总黄酮最佳提取条件。方法正交试验法对龙须藤中黄酮类化合物的提取工艺进行优选,以提取时间、乙醇浓度、提取次数、料液比为因素,以总黄酮得率为指标进行试验。结果最佳提取工艺条件:60%(体积分数)乙醇溶液,提取时间3 h,提取次数3次,乙醇用量10倍,提取率为7.426%。结论本实验结果可靠,方法简便,适合于该药材的批量提取。

反向分子对接法预测龙须藤两种多甲氧基黄酮的分子靶标

目的预测龙须藤两种多甲氧基黄酮5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮(PMFA)及5,6,7,5'-四甲氧基-3',4'-亚甲二氧基黄酮(TMFA)的分子靶标。方法采用反向分子对接法,对这两种成分进行分析。结果 PMFA和TMFA可能在抗癌、抗类风湿性关节炎及抗心血管疾病等方面发挥作用,并通过防止CTSK与DHODH靶点作用于Toll样受体、破骨细胞分化与嘧啶代谢等途径治疗类风湿性关节炎。结论该方法可为龙须藤及两种多甲氧基黄酮的药效学及分子作用机制实验提供参考。

九龙藤中黄酮类化合物的研究

从豆科植物九龙藤(Bauhinia championii Benth)的乙醇提取物中分离出7个已知黄酮类化合物,经过核磁共振谱(NMR)和质谱(MS)分析及标准品对照,鉴定了它们的结构,分别为:5,6,7,5′-四甲氧基-3′,4′-亚甲二氧基黄酮(1),5,6,7,3′,4′,5′-六甲氧基黄酮(2),5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮(3),5,6,7,3′,4′-五甲氧基黄酮(甜橙素)(4),5,7,4′-三甲氧基黄酮(5),5,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(6),(-)-表阿夫儿茶素(7).其中化合物5,7为首次从该植物中分离得到.

星点设计-效应面法优化龙须藤总黄酮分散片的处方

目的优选龙须藤总黄酮分散片的处方。方法以乳糖(Lactose)、微晶纤维素(MCC)、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)的用量为考察因素,以崩解时限和分散均匀性为评价指标,采用星点设计-效应面法优选龙须藤总黄酮分散片的处方。结果最优处方为龙须藤总黄酮6.6%,乳糖18.4%,MCC 64.0%,CMS-Na 10.0%,滑石粉1%。结论按最优处方所制备的龙须藤总黄酮分散片崩解快,分散均匀,有效成分溶出速率快,该处方可用于龙须藤总黄酮分散片的质量控制。

3种闽产中药体外对大鼠血小板聚集的影响

为观察闽产巴戟天、养心草、龙须藤85%乙醇提取物对体外ADP诱导的SD大鼠血小板聚集的影响,采用大鼠血小板加中药孵育,比浊法测定血小板聚集率。结果:巴戟天、养心草、龙须藤均具有抗血小板聚集作用,其中巴戟天、养心草、龙须藤的85%乙醇提取物在体外具有抗血小板聚集作用,巴戟天、养心草优于阿司匹林;龙须藤与阿司匹林相当。

纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮的工艺研究

目的考察用纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮的最佳提取工艺条件。方法在单因素分析的基础上进行Box-Behnken效应面优化,以龙须藤总黄酮提取率为指标,并采用Design expert 7.0.0软件对数据进行分析。结果纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮的最佳工艺条件为:每1 g药材酶用量9.13 mg、酶解时间2.06 h、酶解温度51.03℃。在优化条件下,提取率平均值为19.24%(RSD为1.68%),与预测值19.02%接近。结论纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮可获得较高的提取率。

龙须藤提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠的影响

目的研究龙须藤乙酸乙酯提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨其作用机理。方法建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,观察大鼠足趾肿胀度的变化,用免疫组化法检测大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果龙须藤乙酸乙酯提取物能抑制大鼠足趾肿胀及滑膜组织中TNF-α、IL-6及IL-8的表达。结论龙须藤乙酸乙酯提取物对类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理是降低滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平。

5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮平衡溶解度及油水分配系数的测定

目的考察5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮在水和缓冲溶液中的平衡溶解度及表观油水分配系数。方法采用HPLC法测定5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮在不同介质中的平衡溶解度,摇瓶法测定表观油水分配系数。结果在37℃下,5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮及龙须藤总黄酮中的5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮在水中的平衡溶解度分别为0.603、77.702μg/mL,相应的表观油水分配系数为246.24(lg Papp=2.39)、257.51(lg Papp=2.41)。结论 5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮水溶性极差,脂溶性适中。与单体相比,龙须藤总黄酮中的5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮水溶性增大。

龙须藤总黄酮对糖尿病大鼠肾脏中NF-κB信号通路的影响

目的:探讨龙须藤总黄酮对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾脏中NF-κB信号通路的影响。方法:通过免疫组化、免疫荧光和Western Blot的方法研究龙须藤总黄酮对糖尿病大鼠肾脏中NF-κB信号通路是否有抑制作用。结果:免疫组化和免疫荧光结果均发现糖尿病大鼠肾皮质中P65在细胞核中的分布较多,而给予龙须藤总黄酮治疗后P65在细胞核中的分布与糖尿病组比较明显减少;分离细胞浆蛋白和细胞核蛋白,然后采用Western Blot检测P65在细胞浆和细胞核中的分布,结果发现,糖尿病组大鼠肾皮质中P65在细胞核中的分布比在细胞浆中的分布多,而采用龙须藤总黄酮治疗后P65在细胞核中的分布明显减少,抑制了P65的核转位。结论:龙须藤总黄酮能够抑制糖尿病大鼠肾脏中NF-κB信号通路的激活。

九龙藤茎化学成分和抑菌活性研究

从九龙藤茎部的乙醇提取物中分离得到了15个非黄酮类化合物,经IR,1HNMR,13 CNMR等分析法表征,结合标样对照,鉴定了它们的结构,分别为:β-谷甾醇(1)、正三十烷(2)、正六十烷(3)、羽扇豆醇(4)、β-香树脂醇(5)、计曼尼醇(6)、cameroonan-7α-ol(7)、silphiperfolane-3,5,6-trio1(8)、齐墩果酸(9)、β-胡萝卜苷(10)、没食子酸(11)、3,4-二羟基苯甲酸乙酯(12)、阿魏酸(13)、3,4-二甲氧基-5-羟基苯甲酸(14)和4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(15).其中,化合物3~4,7~9和12~14为首次从该植物中得到.抑菌实验结果表明,该植物的乙酸乙酯提纯部分和正丁醇提纯部分均具有较好的抑菌活性.

微波提取龙须藤多糖的最佳条件研究

选取微波功率、提取温度、提取时间和料液比作为因素,以毛细管电泳-紫外检测测定龙须藤多糖水解产物中的单糖峰面积总和为指标,通过单因素和正交试验,对提取条件进行了优化.结果表明,最大影响因素为微波功率,其次为提取温度,再次为提取时间,最后为料液比.最优提取条件为微波功率600 W,提取温度70℃,提取时间25 m in,料液比1:35.

九龙藤乙酸乙酯部位化学成分的分离鉴定

目的:对九龙藤乙酸乙酯部位的化学成分进行研究。方法:利用色谱法和波谱方法对九龙藤乙酸乙酯部位的化学成分进行分离和结构鉴定。结果:从九龙藤乙酸乙酯部位共分离得到8个化合物,分别为儿茶素(1)、表儿茶素(2)、儿茶素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(3)、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(4)、(R)-六羟基联苯邻二甲酸甲酯(5)、4-羟基-3-甲氧基苯基-1-O-(6'-O-没食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、3,5-二甲氧基-4-差羟基苯基-1-O-β-D-(6'-O-没食子酰基)-吡喃葡萄糖苷(7)、3,4-二羟基苯乙醇4-O-b-D-(6"-O-没食子酰基)-吡喃葡萄糖苷(8)。结论:这8个化合物均为首次从九龙藤中分离得到。

龙须藤总黄酮中5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的建立测定大鼠血浆中5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮浓度的HPLC法,并研究其药动学行为。方法 2组大鼠分别灌胃给予龙须藤总黄酮（给药剂量为60 mg/kg）和5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮（给药剂量为113 mg/kg）,采用高效液相色谱法测定血浆中5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮的浓度,以软件DAS2.0计算药动学参数。结果大鼠灌胃5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮和龙须藤总黄酮后,5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮的体内过程均符合单室模型,主要药动学参数如下：AUC0~∞分别为（5.502±1.302）、（4.192±0.232）（mg·h）/L,Cmax分别为（0.689±0.065）、（0.758±0.157）mg/L,Tmax分别为（3.111±0.434）、（1.430±0.365）h,T1/2分别为（2.444±0.287）、（2.700±0.890）h。结论以小剂量龙须藤总黄酮给药较单体给药时5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮血药浓度峰值高,吸收速率常数大,达峰时间短,龙须藤总黄酮中共存的其他成分可能有促进5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮吸收的作用。

基于PGC-1α-Sirt3通路探讨九龙藤总黄酮对氧糖剥夺诱导HT22细胞损伤的保护作用

目的:基于PGC-1α-Sirt3信号通路探讨九龙藤总黄酮(BCF)对氧糖剥夺(OGD)诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞损伤的保护作用。方法:25,50,100,200,400,600μg·ml^-1的BCF预处理HT22细胞24 h后,OGD诱导HT22细胞损伤12 h,MTT法检测HT22细胞存活率,筛选BCF作用OGD诱导HT22细胞的最佳浓度。HT22细胞分为空白对照组、OGD组、OGD+BCF(200μg·ml^-1)组、OGD+BCF(200μg·ml^-1)组+过氧化物酶体增殖物受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)抑制剂(SR-18292)组、OGD+SR-18292组。TUNEL法检测HT22细胞凋亡,试剂盒检测HT22细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Rt-PCR和Western Blot分别检测HT22细胞PGC-1α、沉默信息调节因子3(Sirt3)mRNA和蛋白表达。结果:200μg·ml-1的BCF作用OGD诱导的HT22细胞存活率最大。OGD诱导后,HT22细胞凋亡指数、LDH漏出量和MDA含量升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活力、PGC-1α和Sirt3 mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05)。BCF作用后,OGD诱导的HT22细胞凋亡指数、LDH漏出量和MDA含量降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活力、PGC-1α和Sirt3 mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。而加入PGC-1α抑制剂SR-18292后,BCF对OGD损伤的HT22细胞各项检测指标均无显著影响(P>0.05)。结论:BCF通过激活PGC-1α-Sirt3信号通路发挥对OGD诱导损伤的HT22细胞的保护作用。

微波消解-ICP-MS法同时测定壮药九龙藤中6种重金属元素的含量

目的:建立一种同时测定九龙藤药材中铬、铜、砷、镉、汞、铅元素含量的方法。方法:样品通过硝酸-过氧化氢溶样,微波消解法处理,选取锗、铑、铟、铼作为内标元素,采用电感耦合等离子体质谱法同时测定上述6种重金属元素的含量。结果:各元素标准曲线的相关系数为0.9999~1.0000,加标回收率为90.1%~98.9%,测定值的相对标准偏差(RSD)在2.39%~6.19%之间。结论:该方法快速、简便、重现性好、准确度高,可用于九龙藤中重金属元素含量分析测定研究,其测定结果可为九龙藤的质量标准提供参考。