益气明目丸对视网膜色素变性大鼠视网膜BaxmRNA、Caspase-3mRNA表达的影响

目的:观察益气明目丸对RCS大鼠视网膜BaxmRNA、Caspase-3mRNA表达的影响。方法:24只RCS大鼠随机分为3组,分别为:空白组、模型组、益气明目丸组。空白组:RCS(rdy+/+,p+/+)大鼠共8只,雌雄各4只,灌胃生理盐水;模型组:RCS(rdy-/,p-/-)大鼠共8只,雌雄各4只,灌胃生理盐水;益气明目丸组:RCS(rdy-/,p-/-)大鼠共8只,雌雄各4只,灌胃益气明目丸悬浊溶液。灌胃30天后,HE染色观察视网膜各层结构,RT-qPCR法及Western Blot法分别测定各组视网膜组织中BaxmRNA、Caspase-3mRNA的表达水平。结果:HE染色显示:益气明目丸组大鼠视网膜厚度明显较模型组大鼠视网膜增厚,视网膜色素上皮条带部分可见,部分外核层光感受器感觉纤毛层部分可见,光感受器细胞核数目较模型组多,外从状层、外核层、视杆视锥层较模型组结构清晰且增厚,RT-qPCR检测显示:益气明目丸组BaxmRNA、Caspase-3mRNA相对表达量明显低于模型组,差异有显著统计学意义(P <0.01),WB检测显示:益气明目丸组Bax蛋白、Caspase-3蛋白相对表达量明显低于模型组,差异有统计学意义(P <0.01)。结论:益气明目丸对RP视网膜的超微结构具有保护作用;益气明目丸可抑制视网膜上BaxmRNA、Caspase-3mRNA的表达,进而减轻视网膜感光细胞的凋亡,达到保护视细胞的目的。

抗阻训练对衰老大鼠腓肠肌Bcl-2BaxmRNA及线粒体膜电位的影响

目的:探讨抗阻训练对衰老大鼠腓肠肌Bcl-2、Bax mRNA表达及线粒体膜电位(ΔΨmt)的影响。方法:以雄性SD大鼠为研究对象,饲养至18月龄后通过8周抗阻训练干预,分别以0%、30%、50%、70%最大负重进行间歇跑台运动,坡度为35°,跑速15 m/min,隔天一次。8周末检测腓肠肌Bcl-2、Bax mRNA表达水平,JC-1脂质荧光染料法检测线粒体膜电位。结果:与衰老安静组相比,训练组衰老大鼠腓肠肌Bcl-2/Bax mRNA比值升高,线粒体膜电位(ΔΨmt)下降的细胞百分率减少。其中,30%、50%最大负重抗阻训练组的Bcl-2/Bax mRNA比值升高,且具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);0%、30%、50%最大负重抗阻训练组衰老大鼠线粒体膜电位下降的细胞百分率的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:低、中等负重抗阻训练能上调衰老过程中腓肠肌Bcl-2/Bax mRNA比值,减少线粒体膜电位(ΔΨmt)下降的细胞百分率,对腓肠肌细胞凋亡的发生有明显的调控作用。

针灸预处理对缺血再灌注大鼠心肌Bcl-2mRNA和BaxmRNA基因表达的影响

目的:为探求针灸预处理与缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2mRNA及BaxmRNA的影响,丰富治未病理论。方法:采用针灸预处理组间,针灸预处理与缺血预处理比较,利用大鼠心肌缺血再灌注模型观察,分正常对照组,假手术组,缺血再灌注组,缺血预处理组,手针预处理日1次组,电针预处理日1次组,艾灸预处理日1次组,手针预处理日2次组,电针预处理日2次组,艾灸预处理日2次组。结果:表明针灸预处理与缺血预处理使bcl-2mRNA增多,使baxmRNA减少,且针灸预处理日2次组比日1次组和缺血预处理更有效,进一步证明了中医针灸"治未病"理论科学价值。

坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关因子Bax及BaxmRNA的影响

目的观察中成药坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法将雌性13～15月龄大鼠50只随机分为模型组、坤宁安高、低剂量组、西药对照组、中药对照组,每组10只,另选5月龄雌性大鼠10只作青年对照组。建立围绝经期大鼠的模型,应用免疫组化检测方法观察不同研究组大鼠卵巢颗粒细胞中Bax蛋白的阳性表达,用原位末端标记法检测BaxmRNA的表达。结果Bax及BaxmRNA在模型组均呈强阳性表达,在青年对照组呈弱阳性表达,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);而坤宁安高、低剂量及西药对照组,Bax及Baxm-RNA均呈弱阳性表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01);中药对照组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论①选用13～15月龄的wister雌性大鼠连续阴道涂片10d,选用持续动情大鼠作为围绝经期综合征的动物模型。实验证明此种造模方式可成功复制。②围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡受凋亡促进基因Bax的影响,与Bax基因蛋白的阳性表达呈正相关。

八珍汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞BaxmRNA的影响

目的:观察八珍汤对骨髓抑制小鼠造血功能的影响,探讨其造血调控作用机制。方法:将实验小鼠分为正常对照组、模型组和八珍汤低、中、高剂量组,除正常组外,其它四组采用Co60γ照射和注射环磷酰胺复合制备骨髓抑制小鼠模型。造模完成的第2天开始给药,正常对照组和模型组每只小鼠灌胃0.2ml/d的生理盐水;八珍汤低、中、高剂量组分别给予5、10、15mg/kg,给药7d后采用原位杂交技术测定骨髓细胞凋亡相关蛋白BaxmRNA表达的影响。结果:八珍汤各组均能降低骨髓细胞中BaxmRNA的表达,而以中剂量组效果最为显著。结论:八珍汤能拮抗骨髓细胞凋亡、促进骨髓造血功能的恢复。

大豆异黄酮对去卵巢大鼠阴道上皮细胞凋亡及BaxmRNA表达的影响

目的探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠阴道上皮细胞凋亡及BaxmRNA表达的影响。方法Wistar大鼠50只,随机分为假手术组、模型组、雌二醇对照组、大豆异黄酮3.0g/(kg·d)组和大豆异黄酮0.6g/(kg·d)组,每组10只,给药6周后处死大鼠,分离摘取阴道称其湿质量,应用TURNEL染色及原位杂交方法检测阴道上皮细胞凋亡及BaxmRNA,并应用图像分析系统进行BaxmRNA表达量测定。结果假手术组未见凋亡上皮细胞;大豆异黄酮0.6g/(kg·d)组、大豆异黄酮3.0g/(kg·d)组、雌二醇对照组凋亡上皮细胞数分别为(43.56±7.04)个、(48.21±5.30)个和(27.19±2.56)个,均低于模型组〔(125.09±9.12)个〕,差异有显著性(P<0.01)。大豆异黄酮0.6g/(kg·d)组、大豆异黄酮3.0g/(kg·d)组和雌二醇对照组细胞BaxmRNA灰度值分别为64.37±8.96、69.10±9.75和97.43±10.31,均明显低于模型组(167.42±9.40)和假手术组(12.33±6.84,P<0.01)。结论大豆异黄酮可通过下调BaxmRNA的表达而减少阴道上皮细胞的凋亡。

脑通灵对大鼠脑缺血再灌注BaxmRNA表达变化的影响

目的:观察脑通灵对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法:应用动脉栓线法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型,采用BaxmRNA原位杂交技术,观察阳性细胞,经图像分析,并测定脑组织超氧化物歧化酶活性(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果:脑通灵治疗组与模型对照组比较,阳性细胞表达减弱,SOD活性高,MDA含量减低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑通灵通过抑制促凋亡基因BaxmRNA和清除自由基,对脑缺血再灌注损伤有保护作用。

茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后凋亡相关基因Bcl-2mRNA,BaxmRNA表达的影响

目的:探讨茅莓总皂苷对缺血性再灌注后凋亡相关基因Bcl-2mRNA,BaxmRNA表达的影响。方法:采用大鼠大脑中动脉阻塞造成局灶性脑缺血再灌注模型,以原位杂交技术观察脑缺血再灌注不同时间点茅莓总皂苷5,10,20 mg.kg-1对凋亡相关基因Bcl-2 mRNA,Bax mRNA的表达。结果:3个剂量的茅莓总皂苷治疗组增加Bcl-2 mRNA阳性细胞的表达,降低Bax mRNA阳性细胞的表达。结论:茅莓总皂苷有明显的抗凋亡作用可能与增加Bcl-2 mRNA阳性细胞的表达,降低BaxmRNA阳性细胞的表达有关。

升清降糖合剂对1型糖尿病小鼠胰岛细胞形态功能及凋亡相关基因的影响

目的:探讨升清降糖合剂(简称SQ)对1型糖尿病小鼠胰岛细胞形态功能及凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA表达的影响。方法:小剂量连续多次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立1型糖尿病小鼠模型。根据不同的干预方式将1型糖尿病小鼠分为模型组、SQ低剂量组、SQ高剂量组。每周测小鼠体质量和血糖,于干预第6周末,各组小鼠麻醉后心脏取血,ELISA法测定血清C肽水平,取胰腺组织HE染色观察病理学改变,免疫组化法观察胰岛素表达情况,RT-QPCR法检测胰腺组织凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达。结果:平均体质量:正常对照组(26.32±0.91)>SQ高剂量组(24.40±1.42)>SQ低剂量组(23.01±1.70)>模型组(22.81±1.61),SQ高剂量组与模型组相比,差异具有显著性(P<0.01)。空腹血糖:模型组(18.69±2.21)>SQ低剂量组(15.92±3.35)>SQ高剂量组(14.13±4.19)>正常对照组(6.51±0.70),SQ低、高剂量组相较于模型组血糖明显降低,差异有显著性(P<0.05、P<0.01)。血清C肽:正常对照组(0.72±0.09)>SQ高剂量组(0.69±0.07)>SQ低剂量组(0.60±0.06)>模型组(0.33±0.08),SQ低、高剂量组血清C肽与模型组相比均明显升高,差异有显著性(P<0.01)。Bcl-2mRNA、BaxmRNA、Bcl-2/Bax比值:Bcl-2mRNA正常对照组(1.03±0.28)>SQ高剂量组(0.66±0.20)>SQ低剂量组(0.39±0.17)>模型组(0.29±0.05);BaxmRNA模型组(5.73±0.80)>SQ低剂量组(2.80±1.11)>SQ高剂量组(1.68±0.90)>正常对照组(1.04±0.31);Bcl-2/Bax比值正常对照组(1.09±0.56)>SQ高剂量组(0.50±0.26)>SQ低剂量组(0.15±0.08)>模型组(0.05±0.01),与模型组相比,SQ低、高剂量组Bcl-2mRNA、Bcl-2/Bax比值均显著升高,BaxmRNA均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。胰岛病理切片HE染色形态学观察发现:模型组小鼠胰岛明显萎缩,轮廓不规则,胰岛细胞数量明显减少,排列紊乱,分布稀疏,胞质染色浅呈空泡状,部分胞核固缩,伴有炎症细胞浸润,SQ低、高剂量组小鼠胰岛细胞受损程度较轻。胰岛素免疫组化染色:模型组小鼠胰岛素染色阳性面积仅占胰岛较小部分,SQ低、高剂量组染色较深,在胰岛内分布较广泛均匀。结论:SQ能明显增加糖尿病小鼠的体质量,降低空腹血糖水平,提高血清C肽水平,具有保护胰岛细胞功能,促进胰岛素分泌的作用。其机制可能与其上调1型糖尿病模型小鼠胰腺组织Bcl-2mRNA表达、抑制BaxmRNA表达,调节Bcl-2/Bax比值,抗胰岛细胞凋亡有关。

更年汤对围绝经期模型大鼠雌激素受体及细胞凋亡相关因子的影响及作用机理研究

目的:探讨更年汤对围绝经期模型大鼠下丘脑ER及卵巢颗粒细胞凋亡因子Bax及BaxmRNA的影响。方法:将雌性11-14月龄SD大鼠经阴道脱落细胞筛选,符合自然老化型围绝经期大鼠模型要求的大鼠随机分为生理盐水组、教材方组、更年汤组,另选4月龄雌性大鼠为青年对照组,18月龄雌性大鼠为老年对照组。相应药物灌胃成功后,采用病理切片了解大鼠卵巢形态学变化,免疫组化及原位杂交检测方法观察大鼠下丘脑ER、Bax及BaxmRNA的阳性表达情况。结果:生理盐水组的ER阳性表达与教材方组、更年汤组比较均有统计学意义(P<0.05),更年汤组与教材方组ER阳性表达比较无统计学意义(P>0.05);更年汤组与生理盐水组比较,卵泡发育、闭锁及扩张观察有统计学意义或有显著统计学意义(P<0.05或P<0.01);与教材方组比较,卵泡发育及闭锁观察比较有显著统计学意义或有统计学意义(P<0.01或P<0.05),卵泡扩张观察无统计学意义(P>0.05);更年汤组的Bax及BaxmRNA阳性表达与生理盐水组及教材方组的比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:更年汤能改善围绝经期模型大鼠下丘脑ER阳性表达,有促进卵巢内卵泡发育,抑制卵巢颗粒细胞凋亡因子Bax及BaxmRNA阳性表达的作用,并且作用较教材方显著。

Bcl-2、Bax和Caspase-8在大运动量大鼠心肌组织中表达及壳寡糖的干预作用

目的:研究Bcl-2、Bax和Caspase-8mRNA在大运动量大鼠心肌组织中表达变化及壳寡糖的调节作用。方法:用健康3月龄SPF级SD雄性大鼠48只,按体重完全随机设计分为正常对照组、运动组、阳性对照组和壳寡糖组。运动组、阳性对照组和壳寡糖组进行为期6周的跑台训练。训练结束24h后处死大鼠,迅速取出心脏,运用荧光实时定量PCR技术检测心肌组织Bcl-2、Bax和Caspase-8mRNA表达水平;同时利用透射电镜观察大鼠心肌组织形态结构。结果:运动组Bcl-2mRNA的表达水平显著降低,而Bax和Caspase-8 mRNA的表达水平显著增高,与其他3组比较呈显著差异(P<0.05)。壳寡糖组Bcl-2、Bax和Caspase-8 mRNA的表达水平与阳性对照组和正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。电镜观察,运动组心肌组织可见凋亡细胞,心肌细胞损伤明显,肌原纤维模糊、断裂甚至坏死,线粒体肿胀等形态学改变。壳寡糖组与阳性对照组和正常对照组比较心肌组织形态结构无明显变化。结论:大运动量训练能导致大鼠心肌组织的基因表达异常,造成心肌组织损伤。壳寡糖可调节大运动量训练大鼠心肌组织Bcl-2、Bax和Caspase-8mRNA表达水平,维持心肌组织的正常形态结构。

中药异位宁对子宫内膜异位症模型大鼠相关凋亡基因作用的实验研究

本文通过研究异位宁对bcl-2mRNA、baxmRNA及其蛋白表达的影响来阐述异位宁治疗子宫内膜异位症的作用机制。实验表明:异位宁具有促进异位内膜细胞凋亡的作用,以高剂量组效果明显。异位宁高剂量组bcl-2蛋白,bcl-2mRNA阳性表达率显著降低,同模型对照组比较有显著差异(P<0.01);而bax蛋白,baxmRNA的阳性表达率显著升高,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。说明在异位宁的作用下,异位内膜细胞通过bcl-2基因的低表达,bax基因的高表达,而增强了异位内膜细胞的凋亡能力,使得异位内膜细胞在宫腔外的种殖与存活受到限制进而使病灶萎缩,从而达到治疗的目的。

血清Bax、Caspase-3、MDA、8-OHdG水平与癫痫发作及认知损害的关系

目的探讨血清BaxmRNA、Caspase-3mRNA、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧尿苷酸(8-OHdG)与癫痫发作、病情及认知损害的关系。方法选取我院收治的确诊的癫痫患者90例(病例组)、同期健康体检对象60例(对照组),收集时间2015年1月至2017年6月,采用实时荧光定量PCR技术检测两组外周血中BaxmRNA、Caspase-3mRNA,检测两组血清MDA、8-OHdG水平,按照患者癫痫发作情况、病情程度进行亚组分析。结果研究组患者的BaxmRNA、Caspase-3mRNA、MDA、8-OHdG水平、MoCA评分均显著的高于对照组(P<0.05);发作组患者的BaxmRNA、Caspase-3mRNA、MDA、8-OHdG水平、MoCA评分均显著的高于非发作组(P<0.05);癫痫发作组患者的BaxmRNA、Caspase-3mRNA、MDA、8-OHdG水平与NHS3评分均呈显著的正相关关系(P<0.05);90例癫痫患者的BaxmRNA、Caspase-3mRNA、MDA、8-OHdG水平与MoCA评分均呈显著的负相关关系(P<0.05)。结论癫痫患者的BaxmRNA、Caspase-3mRNA、MDA、8-OHdG水平较正常人群显著的升高,并且与患者病情严重程度、认知损害具有显著的相关性。

bcl-2 mRNA、bax mRNA表达在三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡中的意义

目的 分析三氧化二砷 (As2 O3 )诱导肝癌细胞凋亡中凋亡相关基因bcl 2mRNA、baxmRNA表达的意义。方法 采用电镜、流式细胞仪、电泳及半定量RT PCR方法检测不同剂量三氧化二砷诱导人肝癌细胞株bel 74 0 2后凋亡的出现及bcl 2mRNA、baxmRNA的表达。结果 0 5 μmol/LAs2 O3 处理肝癌细胞未见凋亡 ,8μmol/LAs2 O3 诱导肝癌细胞出现明显凋亡。对照组和药物组未检测到bcl 2mRNA的表达 ,随浓度增加 ,baxmRNA的表达上调。结论 As2 O3 通过诱导凋亡抑制肝癌细胞株bel 74 0 2的增殖 ,凋亡诱导基因baxmRNA的表达上调与此过程有关。bcl 2mRNA表达与此过程无关。

香连丸对溃疡性结肠炎大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax mRNA表达的影响

目的通过研究溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织Bcl-2、Bax m RNA的变化,探讨香连丸对UC大鼠细胞凋亡的影响。方法将50只7周龄Wistar大鼠随机分为正常组、模型组(UC模型)、中药组(香连丸)、抑制剂组、中药+抑制剂组。采用经典三硝基苯磺酸灌肠法复制UC模型大鼠;造模成功后光学显微镜下观察各组大鼠结肠黏膜组织损伤程度并评分,逆转录聚合酶链反应检测Bcl-2、Bax m RNA表达变化,原位末端凋亡法检测细胞凋亡情况。结果 UC模型大鼠肉眼及镜下可见结肠溃疡形成,可伴有炎症、充血、水肿等病理改变;与正常组相比,模型组Bcl-2 m RNA表达降低,Bax m RNA表达增高;香连丸干预后可改善结肠上皮细胞凋亡,降低Bax m RNA表达,Bcl-2 m RNA表达增加。结论 UC模型大鼠结肠黏膜损伤,与细胞凋亡因子Bcl-2、Bax的变化有关;香连丸可提高Bcl-2 m RNA、减少Bax m RNA的表达,改善结肠黏膜损伤,减少上皮细胞凋亡,改善细胞凋亡情况。

金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染细胞早期凋亡调控基因mRNA影响的研究

目的:探讨金欣口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染细胞早期凋亡及Bcl-2和BaxmRNA表达的影响。方法:采用细胞培养、血清药理学、流式细胞术和RT-PCR等实验技术检测金欣口服液含药血清抗RSV,影响细胞早期凋亡作用途径的变化。结果:RSV感染人胚肺成纤维细胞(HELF)12和24 h后细胞凋亡率均低于未感染细胞对照组(P<0.05),RSV攻击宿主细胞24 h后,Bcl-2 mRNA表达量下降,Bax mRNA表达量上升,但不足2倍增长。金欣口服液作用后,凋亡率明显高于病毒组(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达量下降,Bax mRNA表达量上升≤0.5。结论:金欣口服液在RSV感染早期,可能通过调控凋亡相关基因拮抗其抑制细胞凋亡的作用,从而影响进入细胞内的病毒复制增殖的过程,阻止病毒的扩散。

甘草配伍甘遂对大鼠肾脏Bcl-2、Bax表达的影响

目的:以Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达水平为指标,观察甘草与甘遂反药对配伍对大鼠肾脏功能的影响及与甘草比例的关系。方法:大鼠50只,随机分为甘遂组、甘遂配伍甘草1:0.25组、甘遂配伍甘草1:0.5组、甘遂配伍甘草1:1组和正常对照组,各组均ig给予相应药物,给药剂量依次为2、2.5、3、4g/kg,连续给药28天。采用免疫组化法检测大鼠肾脏中Bcl-2及Bax蛋白水平;采用RT-PCR法检测其肾脏中Bcl-2及Bax mRNA水平。结果:各给药组2、2.5、3、4g/kg Bcl-2在蛋白及mRNA表达水平均显著低于正常对照组;各比例甘草配伍甘遂组2.5、3、4g/kg Bcl-2在蛋白及mRNA表达水平显著高于甘隧组4g/kg,且与甘草比例呈正相关。各给药组2、2.5、3、4g/kg Bax在蛋白及mRNA表达水平均显著高于正常对照组;各比例甘草配伍甘隧组2.5、3、4g/kg Bax在蛋白及mRNA表达水平均显著低于甘隧组4g/kg,且与甘草比例呈负相关。结论:长期应用甘遂可加速大鼠肾脏细胞的凋亡,影响肾脏功能。甘草可抑制甘遂对肾脏的损害,且有明显的剂量依赖关系。