鹿茸多肽对缺血动物模型心肌细胞线粒体凋亡相关基因蛋白Bc-l2/Bax的影响

目的:探讨鹿茸多肽对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bc-l 2/Bax表达蛋白的影响。方法:采用冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠心肌缺血模型。随机分为假手术组,模型组,维生素C阳性对照组和鹿茸多肽高、中、低剂量组,每组10只。造模后灌胃给药21 d,用Bc-l 2及Bax表达蛋白包被的酶联免疫试剂盒测定大鼠心肌细胞线粒体中Bc-l 2、Bax蛋白的表达量。结果:鹿茸多肽组与模型组比较,Bc-l 2蛋白的表达量增加,而Bax蛋白的表达量减少,Bc-l 2/Bax比值升高。结论:鹿茸多肽对心肌缺血大鼠有一定的保护作用,其抗心肌凋亡机制可能与上调Bc-l 2蛋白和下调Bax蛋白的表达有关。

Edaravone对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究Edaravone对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischem ia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜神经节细胞Bc-l2和Bax表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只随机分为3组:空白对照组、模型组和Edaravone治疗组。空白对照组不做任何处理,模型组和Edaravone治疗组均采用前房加压法建立大鼠RIRI模型,Edaravone治疗组于缺血前30min行腹腔注射Edaravone(3mg.kg-1),恢复灌注30min后再行腹腔注射Edaravone(3mg.kg-1)。免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜缺血-再灌注后24h视网膜神经节细胞Bc-l2和Bax的表达情况。结果空白对照组未见Bc-l2和Bax表达。再灌注后24h,模型组Bc-l2表达为0.406±0.022,Bax表达为0.661±0.034,Bc-l2/Bax为0.609±0.015;Edaravone治疗组Bc-l2表达为0.581±0.031,Bax表达为0.491±0.017,Bc-l2/Bax为1.104±0.094。与模型组比较,Edaravone治疗组Bc-l2表达明显增强(P<0.05),Bax表达明显减弱(P<0.05),Bc-l2/Bax比值升高(P<0.05)。结论 Edaravone对RIRI大鼠视网膜神经节细胞有明显的保护作用。

Bcl-2过度表达对全脑缺血再灌注后大鼠海马回P53蛋白表达的影响

目的：研究过度表达Bc-l2的大鼠全脑缺血再灌注后P53在海马回的表达,探讨Bc-l2的抗凋亡作用及机制。方法：雄性健康SD大鼠随机分为3组（n=30）。缺血再灌注组（IR组）,采用4-血管法建立全脑缺血再灌注模型,6 min缺血后给予再灌注;假手术组（SO组）,只暴露血管而不夹闭;Bc-l2过度表达组（Bc-l2组）,Bc-l2过度表达大鼠模型造模成功后处理同IR组。所有动物于6、12、24、48、72及96 h行4%多聚甲醛灌注处理,将脑组织切片行免疫组化染色、原位末端标记法和HE染色,光镜下观察P53在海马回CA1和CA3区的表达、神经元形态及结构的变化以及凋亡神经细胞数,结果行统计学分析。结果：①全脑缺血再灌注后24 h,IR组CA1区P53蛋白开始表达,程度较弱,随后逐渐增加,于72 h达高峰后下降,主要位于胞核;CA3区于再灌注后48 h才出现P53蛋白的表达,72 h达高峰,但表达强度较CA1区弱（P〈0.05）。Bc-l2组CA1和CA3区P53蛋白表达强度均弱于IR组（P〈0.05）,主要位于胞浆。②HE染色：全脑缺血再灌注后72 h,IR组CA1区有明显组织水肿,神经元数目降低,排列紊乱,核膜不清晰,未见核仁;CA3区神经元损伤程度较CA1区轻（P〈0.05）;Bc-l 2组神经元损伤较IR组轻（P〈0.05）。③原位末端标记法染色：与SO组比较,IR组海马CA1区全脑缺血再灌注后24~48 h凋亡细胞数最多（P〈0.01）,再灌注后72 h海马CA1区凋亡细胞数开始减少;与IR组比较,Bc-l2组凋亡细胞均较少（P〈0.05）。结论：Bc-l2过度表达可抑制大鼠全脑缺血再灌注后P53在海马回的表达。

内毒素血症大鼠膈肌iNOS活性和凋亡相关基因表达的变化

目的:观察内毒素血症大鼠膈肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性及凋亡相关基因Bc-l 2、Bax和caspase-3mRNA表达的变化,探讨内毒素血症大鼠膈肌损伤的细胞凋亡机制。方法:32只雄性SD大鼠随机分成4组(n=8):生理盐水对照组和内毒素24 h、48 h和96 h组,即内毒素12 mg/kg腹腔注射,分别于注射内毒素后24 h、48 h、96h处死大鼠,测定大鼠体重和膈肌重/体重比值,检测膈肌组织结构型NOS(cNOS)、iNOS和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性,RT-PCR检测大鼠膈肌凋亡相关基因Bc-l 2、Bax和caspase-3 mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,内毒素血症96 h组大鼠体重和膈肌重/体重比值明显降低(P<0.05);膈肌组织cNOS和iNOS活性明显增强,96 h组较48 h、24 h组显著升高(P<0.01);SDH活性明显降低,96 h组较48 h、24 h组明显降低(P<0.01);Bax mRNA表达明显增强,48 h、96 h组较24 h组明显增强;Bc-l 2mRNA表达及Bc-l 2/Bax比值明显降低,48 h、96 h组较24 h组明显降低(P<0.01);caspase-3 mRNA表达显著增强,48 h、96 h组较24 h组明显增强(P<0.01)。结论:内毒素血症大鼠膈肌组织iNOS的激活,损伤线粒体,上调促凋亡基因Bax,下调抑凋亡基因Bc-l 2,启动经caspase-3细胞凋亡途径,导致膈肌损伤和萎缩。