骨肉瘤组织中自噬标志分子Beclin1的mRNA、蛋白表达量及其与病理特征的相关性

目的:探讨骨肉瘤组织中自噬标志分子Beclin1的mRNA、蛋白表达量及其与病理特征的相关性。方法:2012年4月~2016年1月间在本院进行手术治疗的骨肉瘤患者60例,术中取骨肉瘤组织及瘤旁正常组织标本。采用荧光定量PCR法检测标本组织中Beclin1 mRNA及增殖、侵袭基因表达量,采用western-blot法检测标本组织中Beclin1蛋白表达量。根据骨肉瘤组织中Beclin1的mRNA、蛋白表达量中位数,将其二次分组成为Beclin1mRNA高表达组、Beclin1mRNA低表达组各30例,Beclin1蛋白高表达组、Beclin1蛋白低表达组各30例。对比骨肉瘤组织中不同Beclin1mRNA、Beclin1蛋白表达者增殖、侵袭基因表达量的差异。结果:骨肉瘤组织中Beclin1mRNA、Beclin1蛋白的表达量低于瘤旁正常组织;Beclin1mRNA低表达组骨肉瘤组织中,增殖基因KISS-1 mRNA的表达量低于Beclin1mRNA高表达组,Six1、FoxM1、RIPK4、STIM1mRNA的表达量高于Beclin1 mRNA高表达组,侵袭基因DLX1mRNA的表达量低于Beclin1 mRNA高表达组,EFEMP1、MTA1、Notch1、HES1、LEF-1mRNA的表达量高于Beclin1mRNA高表达组;Beclin1蛋白低表达组骨肉瘤组织中,增殖基因KISS-1mRNA的表达量低于Beclin1蛋白高表达组,Six1、FoxM1、RIPK4、STIM1mRNA的表达量高于Beclin1蛋白高表达组;侵袭基因DLX1 mRNA的表达量低于Beclin1蛋白高表达组,EFEMP1、MTA1、Notch1、HES1、LEF-1mRNA的表达量高于Beclin1蛋白高表达组。结论:骨肉瘤组织中自噬标志分子Beclin1的mRNA、蛋白表达量均下降,且其表达量与肿瘤细胞的增殖侵袭活性直接相关。

TRPM3表达上调通过调控Beclin1的表达促进卵巢癌细胞自噬

目的:探讨瞬时受体电位离子通道3(TRPM3)和Beclin1在卵巢癌中的表达和对卵巢癌细胞自噬的影响。方法:收集6例正常卵巢组织标本和20例卵巢癌组织标本,应用免疫组织化学染色法检测TRPM3和Beclin1在卵巢癌组织中的表达,采用western blotting法检测TRPM3和Beclin1在正常卵巢上皮细胞Moody和卵巢癌细胞Hey、ES-2中的表达差异。用TRPM3-siRNA瞬时转染细胞Hey和ES-2,通过western blotting法检测TRPM3基因沉默情况及Beclin1、p62和LC3的蛋白表达变化。结果:在正常卵巢组织和卵巢癌组织中,TRPM3的阳性表达率分别为33.3%、80.0%(P<0.05),而Beclin1的阳性表达率分别为33.3%、65.0%(P>0.05)。与正常卵巢上皮细胞Moody相比,卵巢癌细胞Hey和ES-2中TRPM3、Beclin1蛋白表达水平明显较高(P<0.05)。沉默TRPM3基因表达的卵巢癌细胞中Beclin1和LC3蛋白表达与对照组相比明显降低,而p62表达升高(P<0.05)。结论:卵巢癌组织和细胞中TRPM3蛋白呈高表达,可能通过调控Beclin1促进卵巢癌细胞的自噬。