bcl-xl、bcl-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中bclxl和bcl2表达情况及其意义。方法采用免疫组化SP法,检测10例正常肺组织,49例NSCLC组织和9例配对淋巴结转移癌组织中的bclxl及bcl2表达强度。结果NSCLC组织中,bclxl表达强度显著高于正常肺组织(P<0.05)。伴淋巴结转移的NSCLC组织bclxl和bcl2表达强度均高于不伴淋巴结转移的NSCLC组织(P<0.01)。NSCLC中bclxl与bcl2表达强度无相关性(P>0.05)。结论bclxl表达增强可能与NSCLC发生有关。bclxl和bcl2表达增强在NSCLC的淋巴结转移方面可能起着重要作用。在NSCLC组织中,bcl-xl与bcl-2表达无相关性。

超声微泡介导bcl-xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡作用的实验研究

目的评价超声微泡介导bclxl基因抗视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用。方法体外混合培养LongEvans大鼠RGCs,并建立N甲基D天冬氨酸(NMDA)损伤的RGCs凋亡模型。将体外培养的RGCs分为A组(正常对照组),B组(NMDA组),C组(bclxl转染+NMDA组);其中C组在加入NMDA前48h用超声微泡介导bclxl转染RGCs。转染48h后采用免疫组化分析转染细胞和未转染细胞的bclxl蛋白水平;加入NMDA36h后采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色检测细胞凋亡的形态特征,琼脂糖电泳检测细胞凋亡DNA片断。结果免疫组化检测表明转染细胞与未转染细胞的bclxl蛋白表达水平有差异,AO/EB检测发现B组可见大量凋亡小体,C组可见少许凋亡细胞。琼脂糖电泳检测亦发现B组呈典型的DNA“梯度”条带,而A组和C组无明显的DNA“梯度”条带。结论超声微泡介导bc1xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡有一定作用,有可能为视网膜视神经疾病的基因治疗提供一种新的方法。

BI-1蛋白及其相关调控因子在非小细胞肺癌细胞系中的表达研究

目的研究凋亡抑制因子BI-1及其相关调控因子Bcl-2、Bcl-XL在非小细胞肺癌细胞系中的表达差异,分析BI-1与Bcl-2、Bcl-XL的相互作用关系。方法以9种非小细胞肺癌细胞系(NSCLC)为实验材料,采用RT-PCR和Western印迹技术在cDNA和蛋白水平检测3种基因的表达。结果发现BI-1在NSCLC中高表达,Bcl-2表达较低(在A549、PAa、GLC-82和SPC-1-A几乎检测不到),Bcl-XL表达较稳定,且明显高于Bcl-2。结论在NSCLC细胞中,BI-1主要与Bcl-XL形成蛋白复合体作用于凋亡通路。

重组腺病毒介导的BCL-X1基因过表达治疗急性肝衰竭大鼠的研究

目的明确肝细胞凋亡与急性大鼠肝衰竭模型肝组织损伤程度的关系；明确BCL—X1过表达对急性肝衰竭大鼠肝脏的治疗保护作用。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、处理组三组。正常对照组及模型组给予门静脉注射生理盐水，处理组予门静脉注射重组BCL-Xl腺病毒。预处理7d后模型组及处理组予D-氨基半乳糖＋脂多糖建立肝衰竭模型，观察各组大鼠的BCL-X1蛋白的表达、ALT、AST水平、肝细胞凋亡率及死亡率。结果BCL．XI基因在处理组的表达高于在模型组中的表达；建立大鼠肝衰竭后6h，处理组的血清ALT、AST水平低于模型组（P〈0．05）。处理组的肝细胞凋亡率低于模型组（P〈0．05）。处理组的大鼠死亡率低于模型组（P〈0．05）。结论在急性肝衰竭大鼠中，肝细胞的凋亡率与大鼠的死亡率呈正相关；BCL-XI在肝组织中的过表达能减少急性肝衰竭模型大鼠的肝细胞凋亡率，降低急性肝衰竭大鼠的死亡率。

Bcl-xl在乳腺癌中的表达及其临床病理相关性研究

目的探讨凋亡抑制因子Bcl-xl在乳腺癌中的表达及与临床病理特征、雌孕激素受体表达的关系。方法用S-P免疫组织化学技术检测39例浸润性乳腺癌组织、35例癌周组织及30例正常、30例增生乳腺组织中凋亡抑制因子Bcl-xl的表达。结果与癌周组织、增生及正常的乳腺组织相比,乳腺癌组织中Bcl-xl呈过表达(P<0.05);乳腺癌组织中Bcl-xl表达随临床分期的升高而升高(P<0.05),随组织分级的增高而升高(P<0.05);乳腺癌组织中Bcl-xl表达和雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达呈负相关(P<0.05);同时也与乳腺癌患者有无腋窝淋巴结转移有关,其在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论乳腺癌组织中Bcl-xl表达与肿瘤分期,细胞学分级,有无腋窝淋巴结转移,ER、PR表达有相关性,在乳腺癌的发生发展过程中有不可忽视的作用。

四逆汤在过氧化氢引起的心肌细胞氧化应激性损伤中的保护效应

目的:观察四逆汤对乳鼠心肌细胞在过氧化氢损伤中的保护效应,探讨Bcl- xL/xSmRNA在四逆汤抗过氧化氢损伤保护心肌细胞中的作用。方法:采用过氧化氢诱导损伤制备乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含不同浓度的四逆汤含药血清DMME培养基培养细胞,应用流式细胞仪检测培养细胞的存活率,筛选合适的四逆汤含药血清培养细胞的浓度;用1mmol/L过氧化氢处理心肌细胞,分别在处理0. 5h, 1h, 2h, 3h, 4h, 8h后检测细胞内丙二醛(MDA)和过氧化物歧化酶(SOD)的活性,并用流式细胞仪检测不同作用时间的细胞凋亡率和坏死率;在过氧化氢处理心肌细胞1h和8h后,收获细胞,检测细胞胞浆Bcl- xL和Bcl- xSmRNA的表达情况。结果:采用含15%四逆汤含药血清的DMEM培养基是心肌细胞生长的合适浓度;过氧化氢对心肌细胞的损伤程度与处理时间成正相关;与单纯过氧化氢处理组相比,四逆汤含药血清组细胞内MDA的含量降低,SOD的活性增加,细胞的凋亡率和坏死率降低,Bcl- xLmRNA表达增加,Bcl- xSmRNA表达减少。结论:四逆汤含药血清有较好的抗氧化应激性损伤保护心肌细胞的作用,这种保护作用可能通过增加Bcl- xLmRNA的表达,降低Bcl- xSmRNA的表达来实现。

白花蛇舌草对人肝癌Bel7402细胞凋亡的影响

目的从基因水平研究白花蛇舌草对体外培养的人肝癌Bel7402细胞诱导凋亡的作用及其可能的作用机制。方法采用人肝癌Bel7402细胞常规体外培养,随机设定空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照组、白花蛇舌草组。倒置显微镜直接观察细胞形态变化。HE染色法光镜下观察细胞形态改变,计算凋亡指数。采用MTT法检测白花蛇舌草对癌细胞的生长抑制作用。RT-PCR半定量法检测Bcl-xl、p53基因mRNA表达的变化。结果光镜下观察到白花蛇舌草组肿瘤细胞脱壁,有细胞出芽现象等凋亡形态改变;凋亡指数略低于5-Fu阳性对照组,但与空白对照组比较有显著差异(P<0.01);细胞抑制率略低于5-Fu阳性对照组,与空白对照组相比有显著差异(P<0.01);上调p53基因mRNA表达,降低Bcl-xl基因mRNA表达,与空白对照组比较均有显著差异。结论白花蛇舌草抑制人肝癌Bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因Bcl-xl基因表达有关。

基底细胞癌Bcl-2、Bax、Bcl-xl蛋白免疫组化表达的定量研究

目的 通过对基底细胞癌 Bcl-2、 Bax、 Bcl-xl蛋白表达的研究，探讨 3种蛋白在基底细胞癌发生、发展中的作用。 方法 按病理亚型将 46例基底细胞癌分为非侵袭组（ 21例）和侵袭组（ 25例），采用免疫组化 SP法检测 Bcl-2、 Bax、 Bcl-xl蛋白在石蜡切片上的表达，并对组化结果进行图像分析以获得平均光密度和 Bcl-2/Bax的比值。结果 非侵袭性基底细胞癌组 Bcl-2蛋白表达水平和 Bcl-2/Bax的比值高于侵袭性基底细胞癌组， P值分别为 0.005和 0.044;两组间 Bcl-xl、 Bax蛋白表达水平的差异无显著性， P值分别为 0.097和 0.979。结论 Bcl-2、 Bcl-xl、 Bax蛋白可能参与了基底细胞癌的发生、发展。

Mcl-1 mediates cytokine deprivation induced apoptosis of human myeloma cell line XG-7

OBJECTIVE: To investigate apoptosis in XG-7, a human myeloma cell line, induced by IL-6 deprivation and the function of three anti-apoptotic Bcl-2 proteins (Bcl-2, Bcl-kappa(L), Mcl-1) in the apoptotic process. METHODS: Apoptosis in XG-7 myeloma cells induced by IL-6 withdrawal was determined by flow cytometry with propidium iodide (PI) nuclear staining. Expressions of three Bcl-2 proteins in XG-7 cells were monitored by immunoblotting assay. RESULTS: In the absence of IL-6 for a certain time, a significant percentage of apoptiotic XG-7 cells can be observed, as well as down-regulated expression of one of the three anti-apoptotic proteins (Mcl-1) in XG-7 cells. IL-6 re-stimulation in XG-7 cells following cytokine removal up-regulated the expression of Mcl-1 and inhibited cell apoptosis. CONCLUSION: Mcl-1,instead of Bcl-2 and Bcl-kappa(L), plays an important role in IL-6 deprivation induced apoptosis in XG-7 human myeloma cells.