胃癌及癌前病变细胞增殖和凋亡与bcl-2/bax表达的关系

目的：观察细胞凋亡和增殖及其调控基因在胃癌及癌前病变发生发展过程中的异常变化 ,探讨细胞凋亡在胃癌演变中的作用。方法：对 128例胃癌及癌前病变患者和正常人 ,采用原位末端标记法 (terminal deoxynucleotidly transferase mediated labelling， TUNEL)及免疫组化技术检测胃粘膜上皮细胞凋亡、增殖及 bcl- 2/bax表达。结果：正常人、浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生、胃癌的细胞凋亡指数分别依次为 (4.58± 1.92)％、 (10.14± 2.56)％、 (24.6± 35.19)％、 (26.26± 9.34)％、 (19.35± 4.04)％、 (19.81± 4.66)％ ;PCNA指数分别为 (3.93± 1.02)％、 (13.58± 4.65)％、 (20.16± 4.89)％、 (24.30± 4.44)％、 (39.79± 6.37)％、 (54.79± 10.6)％ ; bcl- 2蛋白表达分别为： 0％、 18.6％、 20％、 38.5％、 44.4％、 58.3％ ;bax蛋白表达分别为 20％、 51.2％、 55％、 30.85％、 27.8％、 16.7％。结论：胃粘膜癌变过程中 ,起初三个阶段细胞凋亡和 PCNA同时增加 ,而至肠化生后 ,细胞凋亡指数显著减少， PCNA指数显著增加 ;凋亡调控基因 bcl- 2和 bax的比值逐渐增加 ,尤其肠化生阶段后增加显著 ,说明在胃癌演变过程中它们起重要作用 ,临床防治胃癌发生应从肠化生之前着手。

As_2O_3对大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax表达的变化

目的;观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax表达的变化。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375,0.75,1.5 mg.kg-13个染毒组和正常正常组,灌胃法连续给药16周后处死,对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量(DSP)。采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2/Bax的表达。结果:①与正常组相比,中剂量组(0.75 mg.kg-1)和高剂量组(1.5 mg.kg-1)睾丸精子头计数和DSP均显著降低(P<0.01),生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P<0.01),生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低(P<0.01),Bax表达明显升高(P<0.01);②DSP与生精细胞AI呈负相关(r=-0.563,P<0.01);③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关(r=-0.825,P<0.01),与Bax表达呈正相关(r=0.710,P<0.01)。结论:一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的表达,诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少,产生雄性生殖毒性。

环烯醚萜苷对大鼠脑梗死后NF-κB与凋亡调节因子Bcl-2/Bax表达变化的影响

目的观察光化学法诱导大鼠脑梗死形成过程中核转录因子(Nuc lear factor-kappa B,NF-κB)与凋亡调节因子Bax和Bc l-2表达的变化,并探讨山茱萸环烯醚萜苷(iridoid gly-coside,IG)对这一过程的影响。方法大鼠预先灌胃给药7d后,制作光化学致脑梗死模型,采用免疫组织化学法检测脑组织中NF-κB表达的变化,W estern b lot技术检测凋亡调节因子Bax和Bc l-2表达的变化。结果模型组与对照组相比,脑皮层内NF-κB和Bax蛋白表达增多,Bc l-2蛋白表达减少。与模型组相比,IG能够明显的减少NF-κB和Bax蛋白表达,增高Bc l-2蛋白的表达。结论IG可通过影响脑内NF-κB和凋亡调节基因的表达而发挥对脑梗死的治疗作用。

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi Chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响及作用机制.腔注射制备大鼠肝纤维化模型,造模的同时,TFL干预组分别以高、低剂量的TFL灌胃6wk进行干预治疗,空白对照组、秋水仙碱组分别以生理盐水、秋水仙碱灌胃作为阴阳性对照.HE及Masson染色观察肝纤维化程度;免疫组织化学二步法检测Bcl-2、Bax的表达;测定血清ALT、AST的水平.结果:模型组大鼠肝组织中Bcl-2、Bax的表达较正常组显著升高(P=0.000),TFL高、低剂量给药组及秋水仙碱组Bcl-2的表达较模型组升高(P=0.000,0.047,0.021),Bax的表达较模型组降低(P=0.000,0.014,0.007),TFL高剂量组与低剂量组比较Bcl-2的表达升高(P=0.018),Bax的表达显著降低(P=0.002).Bcl-2、Bax在秋水仙碱组与TFL低剂量组中的表达无显著性差异(P=0.726,0.767).肝纤维化严重程度与Bax的表达显著正相关(P=0.000);与Bcl-2的表达负相关(P=0.000).空白对照组、TFL高低剂量给药组及秋水仙碱组血清ALT、AST均明显低于模型组,具有显著性差异(P=0.000).低剂量组与秋水仙碱组无显著性差异(P=0.597,0.669).结论:TFL具有较好的抗肝纤维化和改善肝功能的作用,并推测这种作用可能与上调Bcl-2、下调Bax的表达,抑制肝细胞的凋亡有关.

电针对PTSD样大鼠学习记忆及海马CA1区Bcl-2/Bax表达的影响

目的探讨电针对创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠学习记忆及海马CA1区Bcl-2/Bax表达的影响。方法将48只健康清洁级雄性SD大鼠随机均分为4组:正常对照组、模型组、电针组和电针对照组,采用国际认定的单次延长应激(SPS)方法制作大鼠PTSD模型,在造模6 h后给予电针组和电针对照组针刺治疗,通过旷场实验和Morris水迷宫实验测试大鼠的情绪唤醒水平和学习记忆能力,采用HE染色观察大鼠海马组织CA1区组织形态变化,Western blot实验检测大鼠海马组织CA1区Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果与模型组大鼠比较,正常对照组和电针组大鼠站立与跨格次数均增多,平均上台潜伏期和穿台潜伏期缩短,穿台次数增加,差异均有统计学意义(P<0.05);HE染色结果表明,与正常对照组比较,模型组大鼠海马组织CA1区海马经元排列紊乱,结构异常,电针组CA1区海马神经元排列较整齐,结构趋于正常;与正常对照组比较,模型组大鼠海马组织CA1区Bcl-2/Bax蛋白表达升高,与模型组比较,电针组大鼠海马组织CA1区Bcl-2/Bax蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针治疗可改善PTSD样大鼠的学习记忆能力,可能与下调海马组织CA1区Bcl-2/Bax蛋白表达有关。

TIEG1对HL-60细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响

本研究旨在观察TIEG1对HL-60细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响。用不同浓度的TIEG1处理HL-60细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率。用12.03 ng/ml TIEG1处理HL-60细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡,以RT-PCR方法检测Bcl-2及Bax的表达变化。结果表明,TIEG1对HL-60细胞具有增殖抑制作用,其抑制效应呈时间及剂量依赖性。TIEG1 12.03 ng/ml增殖抑制作用较为明显。在细胞凋亡过程中,Bax表达呈升高趋势,而Bcl-2呈下降趋势(P<0.05)。结论:TIEG1可以抑制HL-60细胞增殖,进而诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。在TIEG1诱导HL-60细胞凋亡的过程中,Bcl-2/Bax与TIEG1诱导HL-60细胞凋亡相关。

泻肺汤通过Bcl-2/Bax表达调控肺纤维化大鼠自由基代谢的实验研究

目的:探讨敦煌医方泻肺汤治疗特发性肺纤维化的作用机制。方法:采用Szapiel法复制大鼠肺纤维化模型以泻肺汤进行干预;肺功能测定仪检测吸气时间(inspiratory time,TI)、呼气时间(expiratory time,TE)、潮气量(tidal volume,TV)、肺泡通气量(alveolar ventilation,AV),ELISA法检测转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)和肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)含量,比色分析法测定一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,RT-PCR法和Western-blot法测定bcl-2/bax基因表达及Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠TE、TV和AV等指标下降, bcl-2基因和蛋白表达均降低,TNF-α含量、TGF-β_1含量、NOS活性、NO含量、bax基因和蛋白表达均升高。与模型组比较,泻肺汤各干预组大鼠TV和AV升高,高剂量组大鼠TE显著升高;泻肺汤中、高剂量组bcl-2基因和蛋白表达均升高,TNF-α含量、TGF-β_1含量、NOS活性、NO含量、bax基因和蛋白表达均降低。结论:泻肺汤通过下调Bax和上调Bcl-2表达调控氧化应激反应,从而发挥抗肺纤维化作用。

胆管癌组织中自发性细胞凋亡和bcl-2/bax表达的状况及意义

目的 研究胆管癌组织中自发性细胞凋亡和bcl 2 bax基因表达的状况及意义。方法 TUNEL法原位检测凋亡细胞 ,免疫组化检测bcl 2和bax蛋白表达。结果 40例胆管癌标本自发性细胞凋亡指数 (AI)的中位值为 7.89% ,高 中分化和无淋巴结转移胆管癌AI分别高于低分化和淋巴结转移者 (P <0 .0 1) ;胆管癌组织bcl 2和bax蛋白表达率分别为 72 .5 % ( 2 9 40 )和 5 7.5 % ( 2 3 40 ) ,与癌旁正常胆管壁组织比较差异显著 (P <0 .0 1) ,高 中分化胆管癌bcl 2蛋白表达率高于低分化胆管癌 (P <0 .0 1) ;bcl 2表达阳性胆管癌AI低于阴性、bax阳性高于阴性 (P <0 .0 1)。结论 胆管癌细胞仍保留有调亡机制 ,bcl 2调亡途径参与了胆管癌的发生、发展过程 ,AI和bcl 2蛋白表达可作为判断胆管癌恶性程度的指标。

维拉帕米对肝星状细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究维拉帕米对人肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)凋亡的影响以及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达的变化。方法:CCK-8法检测不同浓度的维拉帕米处理48 h对HSCs细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测HSCs细胞的凋亡率;免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax表达的变化。结果:一定浓度范围的维拉帕米对HSCs细胞的增殖有抑制作用,随浓度增加,抑制作用增强,其IC50值为(0.15±0.01)mol/L;AnnexinV/PI双染法检测显示,不同浓度的维拉帕米均可诱导HSCs细胞凋亡,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化检测显示,与对照组比较,维拉帕米组Bcl-2表达减少,而Bax表达增强,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维拉帕米可抑制HSCs细胞的增殖,诱导其凋亡,作用机制可能与抑制Bcl-2、增强Bax的表达有关。

蛇葡萄素改变Bcl-2/Bax表达和激活caspase-3诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡

目的探讨蛇葡萄素在体外诱导人肝癌细胞株Bel-7402的凋亡作用及其可能机制。方法以不同浓度的蛇葡萄素作用于体外培养的人肝癌细胞株Bel-7402,应用MTT法检测培养24、48和72h的细胞生长情况;荧光染色观察细胞核的形态学改变;琼脂糖凝胶电泳分析细胞DNA变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞caspase-3、Bcl-2和Bax的表达情况。结果蛇葡萄素对Bel-7402细胞的生长有明显的增殖抑制作用,呈浓度和时间依赖性。24、48、72h的IC50值分别是89.6±16.1、36.2±6.5和15.3±3.0mg·L-1。经荧光染色后可观察到典型的凋亡小体。细胞DNA电泳后呈现出凋亡细胞典型的DNAl adder。流式细胞术检测细胞凋亡率呈时间和浓度依赖性。caspase-3和Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,Bax蛋白表达量逐渐增加,呈明显的浓度依赖性。结论蛇葡萄素能诱导体外培养的人肝癌Bel-7402细胞凋亡,其作用具有时间和浓度依赖性。下调Bcl-2、上调Bax表达,活化caspase-3是蛇葡萄素诱导Bel-7402细胞凋亡的可能机制之一。

金樱子通过增加Bcl-2/Bax表达比抑制大鼠糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的凋亡

目的探讨金樱子对糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡的影响及机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组各20只。对照组常规饲料喂养,采用链脲佐菌素(60 mg·kg-1)诱发建立糖尿病性白内障模型,治疗组在糖尿病性白内障建立的同时按400 mg·kg-1体质量给予金樱子灌胃。STZ注射后4周、8周、12周时观察晶状体混浊度的变化情况,同时采用TUNEL检测LEC凋亡,免疫组织化学染色检测LEC Bcl-2、Bax蛋白的表达,RT-PCR检测Bcl-2、Bax基因的表达。结果 STZ注射后12周时,模型组、治疗组和对照组大鼠体质量分别为(151.90±2.38)g、(412.99±2.17)g和(464.01±2.47)g,模型组明显低于治疗组和对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。STZ注射后4周时,治疗组、对照组、模型组血糖分别为(9.11±2.32)mmol·L-1、(3.83±0.79)mmol·L-1、(20.31±3.23)mmol·L-1,对照组与模型组、治疗组与模型组间差异均有统计学意义(均为P<0.05);12周时,治疗组和对照组血糖分别为(5.62±1.25)mmol·L-1、(4.12±1.09)mmol·L-1,较模型组(25.02±2.27)mmol·L-1明显下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。在STZ注射后4周、8周、12周时,治疗组大鼠晶状体混浊程度均高于对照组,但明显低于模型组,组间两两比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。STZ注射后4周、8周、12周时,模型组LEC凋亡率分别为(8.35±1.20)%、(13.05±1.39)%、(23.69±1.88)%,而治疗组分别为(4.78±1.41)%、(6.08±0.95)%、(10.06±1.66)%,对照组分别为(1.18±0.16)%、(2.15±0.25)%、(3.53±0.65)%,组间两两比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,模型组LEC的Bcl-2蛋白和基因表达降低,Bax蛋白和基因表达上调,Bcl-2/Bax mRNA比值下降,两组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与模型组比较,治疗组LEC的Bcl-2蛋白和基因表达增加,Bax蛋白和基因表达下调,Bcl-2/Bax mRNA比值明显增加,两组间比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,治疗组Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05);而Bcl-2基因、Bax基因、Bcl-2/Bax mRNA比值差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论金樱子通过增加Bcl-2/Bax表达比抑制大鼠糖尿病性白内障LEC的凋亡,延缓糖尿病性白内障的发生和发展。

补肾活血方对老年肾虚血瘀证患者CD11b/CD18、Bcl-2/Bax表达的影响

目的通过测定外周血粒细胞CD11b/CD18、Bcl-2/Bax等表达的变化,探讨补肾活血方治疗老年肾虚血瘀证患者的作用机制。方法60例老年肾虚血瘀证患者被随机分为两组,30例使用补肾活血方治疗,30例为对照组,通过流式细胞仪和图象分析系统,观察外周血粒细胞粘附分子CD11b/CD18、凋亡相关基因Bcl-2/Bax、血小板聚集率、D-二聚体、CD62p、PAC-1的表达变化。结果补肾活血方可使老年肾虚血瘀证患者CD11b/CD18表达下降(P<0.01),Bcl-2/Bax表达提升(P<0.01),血小板聚集率、D-二聚体、CD62p、PAC-1表达下降(P<0.05)。结论补肾活血方对老年肾虚血瘀证患者的粘附分子CD11b/CD18、凋亡基因Bcl-2/Bax有调节作用,对微循环状态具有一定的改善作用,这可能是其作用机制之一。

Ghrelin对CKD大鼠十二指肠消化间期移行性复合运动和Bcl-2/Bax表达的影响

目的观察ghrelin对慢性肾功能不全(CKD)大鼠十二指肠消化间期移行性复合运动变化和Bcl-2/Bax表达的影响。方法 SD大鼠18只,体重(180±20)g,雌雄不拘,随机分为对照组(CKD+生理盐水)、ghrelin 1组(CKD+ghrelin 10μg/kg)和ghrelin 2组(CKD+ghrelin 50μg/kg),每组6只。采用5/6肾切除法建立CKD大鼠模型。模型建立成功后分别采用多道生理记录仪和免疫组织化学方法观察十二指肠消化间期移行性复合运动变化和凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达。结果 CKD大鼠普遍存在十二指肠运动功能障碍;ghrelin可以明显增加CKD大鼠十二指肠消化间期移行性复合运动出现的频率,包括呈剂量依赖性增加Ⅲ相出现的时间、频率和振幅,各参数在对照组、ghrelin 1组和ghrelin 2组分别为:Ⅲ相出现的时间[(0.81±0.12)minvs.(0.84±0.13)minvs.(0.99±0.17)min];频率[(22.68±1.00)次/minvs.(23.55±1.08)次/minvs.(29.31±1.51)次/min];振幅[(249.71±13.98)μVvs.(258.49±13.12)μVvs.(318.85±20.10)μV](P<0.05)。同时ghrelin可以明显减少Bcl-2和Bax的表达,其中以Bax的减少更明显(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增加(P<0.05)。结论 ghrelin可以明显改善CKD大鼠十二指肠的运动功能,有可能成为一种新型胃肠动力药物。

不同强度运动对大鼠肾脏皮质区NOS、Bcl-2/Bax表达的影响

采用跑台训练方式,建立了大鼠有氧运动和疲劳运动模型,运用免疫组织化学SABC法研究不同运动强度对大鼠肾脏皮质区nNOSi、NOS、eNOS和Bcl-2/Bax表达的影响.结果显示,与对照组比较,有氧训练组nNOSi、NOS、eNOS分别升高了9.1%、11.1%(P<0.05)、33.3%(P<0.05);疲劳训练组分别升高了18.2%、22.2%(P<0.05)、66.7%(P<0.05);Bcl-2/Bax的表达在有氧运动组明显升高(升高了135.0%),在疲劳运动组略有降低(降低了8.8%).不同强度运动大鼠肾脏皮质区NOS的表达均有升高,显示运动诱导NO的生成增加;Bcl-2/Bax在肾脏皮质区的表达受运动强度的影响显著,大强度运动可引起Bax显著表达,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2的比率增加,表明大强度运动可促进大鼠肾脏皮质区的细胞凋亡,且与NO大量生成有关.

bcl-2/bax表达在左向右分流型肺动脉高压肺血管重构中的作用

目的研究bcl-2、bax蛋白表达与左向右分流型肺动脉高压肺血管重构的关系。方法建立左向右分流肺动脉高压大鼠模型。比较肺血管重构指标,原位杂交和Western blot检测bcl-2和bax分布及表达,TUNEL法检测肺血管细胞的凋亡。结果分流12周和16周组大鼠的平均肺动脉压力(mPAP)、右室肥大指数(RVHI)、肺小动脉中膜厚度百分比(MT%)明显高于正常大鼠(P<0.05),肺小动脉新生内膜比率显著增加(P<0.01)。bcl-2蛋白表达在分流12周后明显增强,分流至16周时表达最高峰(P<0.01),而bax蛋白表达显著降低(P<0.01)。bcl-2/bax呈上升趋势。结论bcl-2和bax在肺动脉上均有表达,随着bcl-2和bax比值的上调,肺血管发生重构,bcl-2/bax比值失衡可能是大鼠左向右分流PAH形成的机制之一。

辣椒素对人结肠癌SW-480生长及Bcl-2/Bax表达的影响

目的探讨辣椒素对人结肠癌SW-480细胞的作用及机制。方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法检测SW-480细胞生长情况;透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪分析细胞凋亡;蛋白印迹法(Western blot)检测细胞内Bcl-2、Bax蛋白表达。结果辣椒素对SW-480细胞有明显生长抑制及诱导凋亡作用,并呈剂量、时间依赖性;光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞;琼脂糖凝胶电泳显示出特征性凋亡梯状带,随着作用时间延长,细胞内Bax蛋白表达逐渐增高、Bcl-2蛋白表达逐渐降低。结论辣椒素能明显抑制人结肠癌SW-480细胞生长,诱导细胞凋亡可能是其主要作用机制,调节Bcl-2、Bax蛋白表达是其诱导细胞凋亡的作用机制之一。

佐剂性关节炎模型大鼠滑膜组织凋亡因子Fas/FasL及Bcl-2/Bax表达与青蒿琥酯的干预(英文)

背景:类风湿关节炎的发病与细胞凋亡过程异常密切相关,其滑膜细胞过度增生源于滑膜细胞凋亡的相对不足,诱导滑膜细胞凋亡对治疗类风湿关节炎有积极意义。青蒿素及其衍生物可诱导多种细胞凋亡。目的:观察青蒿琥酯对佐剂性关节炎滑膜组织中凋亡因子Fas/FasL及Bcl-2/Bax表达的影响。设计:随机对照观察。单位:三峡大学第一临床医学院。材料:实验于2005-09/2005-11在三峡大学免疫实验室及形态动物学实验室完成,选用50只生后8周雄性Wistar大鼠,体质量(150±21)g,清洁级,由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供。完全Freud佐剂为美国SIGMA公司产品,青蒿琥酯注射液购自桂林南药股份有限公司。兔抗鼠Fas(SC-716)、兔抗鼠FasL多抗(SC-834)、山羊抗小鼠IgG抗体-HRP多聚体、兔抗鼠P53(M3566)多抗、Bcl-2(sc-7382)多抗、兔抗鼠Bax(sc-7480)多抗以及ABC复合物试剂盒和DAB显色试剂盒均为美国SantaCruz公司产品;甲氨蝶呤由上海华联制药有限公司生产;德国Leica生物应用显微镜及图象分析系统;德国Leica切片机。方法:摸球法随机将大鼠分为6组:空白组(n=8),模型组(n=8),青蒿琥酯高剂量组(n=10),青蒿琥酯低剂量组(n=8),青蒿琥酯加甲氨蝶呤组(n=8),甲氨蝶呤组(n=8)。①实验干预:按照文献叙述的模型构建方法,除空白组外,余5组每只右足跖处给予注射0.1mL完全Freud佐剂,致炎成佐剂性关节炎模型,空白组注射生理盐水0.1mL。致炎后第13天开始给药,青蒿琥酯高剂量组、青蒿琥酯低剂量组分别注射40,20mg/(kg·d)青蒿琥酯注射液,青蒿琥酯加甲氨蝶呤组注射20mg/(kg·d)青蒿琥酯注射液,0.4mg/(kg·3d)甲氨蝶呤注射液。甲氨蝶呤组给予注射0.4mg/(kg·3d)甲氨蝶呤注射液,模型组腹腔注射1mL/d生理盐水。各组给药方式均为腹腔注射。②实验评估:给药前及给药后13d分别评价大鼠关节肿胀指数;免疫组织化学法检测给药后13d大鼠滑膜组织中Fas/FasL、Bcl-2及Bax的表达情况。主要观察指标:各组关节肿胀指数及滑膜组织中凋亡相关因子Fas/FasL,Bcl-2/Bax的表达。结果:纳入大鼠50只均进入结果分析。①给药后13d,各实验组关节肿胀指数明显低于给药前,差异有统计学意义(P<0.01),各实验组关节肿胀指数均明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。②青蒿琥酯高剂量组、青蒿琥酯低剂量组和青蒿琥酯加甲氨蝶呤组滑膜组织中FasL及Fas均上调,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),甲氨蝶呤组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);青蒿琥酯高剂量组、青蒿琥酯低剂量组、青蒿琥酯加甲氨蝶呤组及甲氨蝶呤组Bcl-2表达下调,Bax上调,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:实验证实青蒿琥酯具有诱导佐剂性关节炎病情缓解的作用,上调滑膜组织中Fas/FasL及Bax,下调Bcl-2的表达而诱导滑膜细胞凋亡可能是其机制之一。

大鼠视神经横断伤后视网膜形态学改变及Bcl-2/Bax表达

目的观察大鼠视神经横断伤后,视网膜细胞(RGCs)形态学变化、Bcl-2/Bax蛋白不同时间的表达变化,并探讨其与视神经损伤经过时间的关系。方法采用大鼠球后视神经横断伤动物模型,用Bcl-2和Bax免疫组织化学和HE染色方法观察伤后不同时间RGCs的动态变化。应用图像分析技术,对Bcl-2及Bax免疫反应阳性细胞进行统计学分析。结果视神经横断伤后RGCs数目严重下降,2周内RGCs快速减少,2周以后缓慢减少;伤后Bcl-2、Bax表达随时间不同程度的增加,Bax对损伤反应较Bcl-2稍晚,两者表达均呈现先升后降的趋势,并维持一定的时间。Bcl-2/Bax蛋白表达比率与RGCs存活数目有一定的相关性。结论视神经横断伤后Bcl-2和Bax的表达在伤后不同时间呈现一定的规律性变化,可为损伤时间的推断提供一定依据。

缬沙坦治疗免疫性肝纤维化大鼠及其对Bcl-2/Bax表达的影响

目的评价缬沙坦对免疫性大鼠肝纤维化的治疗作用,并观察其对免疫性肝纤维化大鼠肝组织中凋亡相关因子Bcl-2/Bax表达的影响。方法36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和治疗组。治疗组在造模第6周开始予以缬沙坦干预;第10周实验结束后,观察三组在肝组织纤维化程度、血清透明质酸(HA)、羟脯氨酸(Hyp)水平的变化,免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Bcl-2、Bax的表达。结果治疗组大鼠肝纤维化程度、炎症活动度均较模型组明显减轻。模型组和治疗组肝胶原面积分别为(12.5±2.15)%和(5.21±1.21)%(P<0.05)。与模型组比较,治疗组血清HA、Hyp水平均降低(P<0.05)。模型组肝组织α-SMA、Bcl-2和Bax的表达较空白对照组明显增强(P<0.05);而治疗组α-SMA表达明显低于模型组(P<0.05)。治疗组Bcl-2表达较模型组显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论缬沙坦能明显减轻猪血清诱导的肝纤维化大鼠的肝纤维化程度、炎症活动度,其机制可能与下调Bcl-2的表达及降低Bcl-2/Bax比值有关。