海带多糖对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究海带多糖诱导血管平滑肌细胞凋亡及其调控机制。方法:在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导血管平滑肌细胞增殖模型基础上,运用MTT法考察海带多糖对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用;利用荧光倒置显微镜观察VSMC细胞形态学的变化;通过流式细胞术分析VSMC细胞周期的分布;采用Western blotting免疫印迹法探讨VSMC细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:海带多糖抑制VSMC细胞增殖抑制。细胞形态学观察结果及流式、Western blotting免疫印迹分析结果表明海带多糖可诱导VSMC细胞凋亡。其凋亡机制与其诱导细胞周期阻滞于S期以及提高Bax/Bcl-2比率有关。结论:海带多糖可诱导VSMC细胞凋亡。

黄芪当归合剂对大鼠缺血性急性肾损伤的保护研究

目的:探讨黄芪当归合剂对实验性缺血性肾损伤大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用。方法:建立大鼠实验性缺血性急性肾损伤模型,在缺血30 m in再灌注不同时间点检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SC r)和尿液中N乙酰βD氨基葡萄糖酐酶(NAG)。同时取肾组织,苏木素伊红(HE)染色,光镜下观察细胞形态学变化。免疫组织化学方法检测B cl 2和B ax基因的蛋白表达,观察黄芪当归合剂对上述表达的影响。结果:缺血性急性肾损伤时肾脏存在明显的细胞凋亡;B cl 2和B ax基因的蛋白表达主要在近曲肾小管和远曲肾小管,肾小球很少;肾脏缺血性损伤时B cl 2基因表达增加,B ax基因表达中量增加,B cl 2/B ax比率升高。与缺血/再灌注组比较,黄芪当归合剂组B ax表达明显增加,B cl 2/B ax比率降低,肾脏损伤亦减轻。结论:黄芪当归合剂对急性肾损伤具有显著的保护作用,其机制可能与其降低B cl 2/B ax比率有关。

尿多酸肽对人非小细胞肺癌细胞生长与凋亡的影响

目的:初步探讨尿多酸肽(CDA-2)体外诱导非小细胞肺癌细胞凋亡作用及其可能的分子机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)试验检测CDA-2对正常人呼吸道上皮细胞HBE细胞及肺癌细胞系A549和H157细胞增殖的抑制效应;采用流式细胞仪检测细胞凋亡;采用Western印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达。结果:CDA-2显著抑制A549和H157细胞增殖,且具有浓度依赖性,其对正常人呼吸道上皮HBE细胞无影响。流式细胞DNA分布宽度检测显示,CDA-2处理组A549细胞亚G1期凋亡峰明显高于对照组(P<0.01);而HBE细胞给药前后比较无统计学意义(P>0.05);流式细胞仪An-nexinV和PI检测结果显示,CDA-2处理组A549细胞凋亡率和死亡率均明显高于对照组(P<0.01),而HBE细胞给药前后比较无统计学意义(P>0.05)。Western印迹分析显示,CDA-2处理组A549细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达强而快速的下调而促凋亡蛋白Bax表达显著上调,Bcl-2/Bax蛋白比率下降。结论:CDA-2可抑制非小细胞肺癌A549和H157细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能是改变Bcl-2/Bax比率,通过线粒体途径诱导肺癌细胞凋亡。