癫痫持续状态大鼠海马Bim与Caspase-3的表达

目的:探讨在匹罗卡品致痫的癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)大鼠模型中,Bcl-2-相互作用细胞死亡介导因子(Bim)与Caspase-3在大鼠海马组织中的表达。方法:雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,应用匹罗卡品产生SE 60 min后终止发作,24 h后取材,行HE染色及TUNEL染色,观察海马神经元的损伤及凋亡情况,Western Blot测定海马组织中Bim的表达,免疫组化检测Caspase-3的表达。采用Pearson相关分析法分析Bim与Caspase-3表达的相关性。结果:SE后24 h,海马组织HE染色见神经元数量减少,TUNEL染色阳性细胞数明显增加,Western Blot中Bim出现相对分子量26kD的条带,免疫组化染色可见大量Caspase-3阳性神经元。结论:大鼠SE后24 h,Bim与Caspase-3在海马组织神经元表达增加,且二者的表达呈正相关(r=0.901,P=0.001),海马神经元出现凋亡。

补肺健脾方对香烟烟雾提取物诱导大鼠成肌细胞AKT/FOXO3a/Bim信号通路的影响

目的:探讨补肺健脾方对香烟烟雾提取物(CSE)诱导大鼠成肌细胞(L6细胞)蛋白激酶B(AKT)/叉头转录因子O亚型3a(FOXO3a)/Bcl-2相互作用的死亡介质(Bim)信号通路的影响。方法:正常培养的L6细胞随机分为正常对照组、CSE组、补肺健脾方(FP)组,分别给予10%空白血清、10%空白血清+10%CSE、10%补肺健脾方血清+10%CSE培养基培养24h后,采用荧光定量PCR技术检测AKT、FOXO3a、Bim mRNA表达的变化;采用Western Blot技术检测AKT、p-AKT、FOXO3a、p-FOXO3a和Bim蛋白表达的变化。结果:与正常对照组比较,CSE组L6细胞FOXO3a和Bim mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),p-AKT、p-FOXO3a蛋白表达显著下降(P<0.05);与CSE组比较,FP组FOXO3a mRNA表达显著下降(P<0.05),p-AKT、p-FOXO3a蛋白表达显著增加(P<0.05),Bim mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论:补肺健脾方能够调控L6细胞AKT/FOXO3a/Bim信号通路,从而减少骨骼肌细胞凋亡,改善骨骼肌功能障碍。