肺癌组织中耐药相关蛋白和p53 bcl-2表达及其意义

目的:探讨肺癌组织中耐药相关蛋白和p53、bcl-2表达及其意义。方法:应用免疫组化技术检测治疗前73例肺癌组织标本中P-gp、MRP、LRP、GST-π、p53和bcl-2表达。结果:非小细胞肺癌组P-gp、LRP、MRP+LRP、P-gp+p53的蛋白表达明显高于小细胞肺癌组(P<0.05)。腺癌组MRP、LRP、MRP+LRP、MRP+LRP+GST-π、MRP+LRP+P-gp+GST-π蛋白阳性表达高于鳞状细胞癌组、小细胞肺癌组(P<0.05),MRP+GST-π共表达者高于鳞状细胞癌组(P<0.01),P-gp+p53共表达者高于小细胞肺癌组(P<0.05),bcl-2蛋白阳性表达低于鳞状细胞癌组、小细胞肺癌组(P<0.05)。鳞状细胞癌组P-gp、P-gp+p53、P-gp+bcl-2的蛋白表达明显高于小细胞肺癌组(P<0.05)。P-gp与p53、bcl-2蛋白阳性表达呈正相关(P<0.05)。p53与bcl-2蛋白阳性表达呈正相关(P<0.01)。MRP与GST-π蛋白阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论:肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程,P-gp、LRP、MRP、GST-π、p53、bcl-2表达及其共表达可作为监测肺癌细胞原发性耐药的指标。

固始鸡免疫器官内细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的动态表达

应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统,对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2在固始鸡免疫器官内的动态表达进行了研究。结果:Bax蛋白在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量不同;Bax蛋白表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核;Bax蛋白表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布:脾脏内不同部位均有分布,主要在动脉周围淋巴鞘、红髓、淋巴小结边缘、边缘区,很少出现在淋巴小结内;胸腺内主要分布于胸腺小叶的皮质与髓质交界处,其次是胸腺小叶髓质,极少出现于皮质;法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴滤泡间的区域,在淋巴滤泡边缘的少量淋巴细胞也有Bax蛋白表达,淋巴滤泡内极少有阳性细胞。Bcl-2蛋白在固始鸡免疫器官内的表达与Bax相似,但表达量与Bax相比较少。以上结果表明,细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。

老年急性心肌梗死猝死者心肌细胞凋亡与p53和Bcl-2蛋白表达的相关性研究

目的 探讨 p53和 Bcl- 2蛋白在老年急性心肌梗死 (AMI)猝死者心肌细胞凋亡中的作用。方法 用 TUNEL法检测 1 5例猝死者和1 0例心脏正常的车祸死亡者的心肌细胞凋亡 ,用免疫组化法检测 p53和 Bcl- 2蛋白在心肌中的表达水平 ,并探讨它们之间的相互关系。结果 TUNEL法发现 ,猝死者梗死区的心肌细胞凋亡千分数老年组 (663.0 0± 1 1 7.1 2‰ )明显高于正常对照 (34.30± 2 0 .68‰ ) (P=0 .0 0 ) ;p53蛋白表达阳性千分率 (462 .1 2± 2 37.58‰ )明显高于正常对照者 (39.45± 2 4 .67‰ ) (P=0 .0 0 0 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的正相关性 (r为 0 .70 1 ,P<0 .0 0 5) ;Bcl- 2蛋白表达阳性率 (40 .83± 31 .2 9‰ )明显低于正常对照 (1 2 0 .76± 66.67‰ ) (P=0 .0 0 37) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的负相关性 (r为 - 0 .840 ,P<0 .0 0 1 ) ;梗死区心肌细胞内 p53和 Bcl- 2蛋白表达数之间呈明显的负相关性 (r=- 0 .82 9,P<0 .0 0 1 )。结论 AMI猝死者梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象 ,且受 p53蛋白上调、Bcl- 2蛋白下调 ,两者相反调节其凋亡。

芹菜素对人肺癌A549细胞凋亡及相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响

目的研究芹菜素对人肺癌A549细胞增殖抑制和凋亡诱导作用与Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法 10～80μmol/L不同浓度芹菜素作用A549细胞,采用MTT法检测芹菜素对A549细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258细胞核染色法观察芹菜素诱导细胞凋亡形态学的变化;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;Westernblot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的变化。结果 MTT法显示,芹菜素对A549细胞有显著的增殖抑制作用(P<0.01),且具浓度和时间依赖性;荧光显微镜下观察到芹菜素处理组细胞出现典型的凋亡形态学改变:细胞核固缩、染色质凝集和核碎片化等;流式细胞仪分析结果显示,芹菜素呈浓度依赖性诱导A549细胞凋亡;Westernblot结果显示,促凋亡蛋白Bax随着芹菜素浓度升高表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2随着芹菜素浓度升高表达减少。结论芹菜素具有抑制人肺癌A549细胞增殖,诱导其凋亡的作用,其机制可能与上调Bax蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关。

人脑挫裂伤后神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2/Bax的蛋白质表达

目的研究挫伤脑组织中神经细胞凋亡现象及凋亡相关基因Bcl-2Bax蛋白质表达的变化,探讨创伤后脑组织中是否存在凋亡以及凋亡在脑外伤病理过程中所起的作用。方法采用流式细胞仪检测凋亡,采用免疫组化法检测脑组织中凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达。结果脑组织中神经细胞凋亡与患者的病情严重程度犤格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分≥6者凋亡百分数为(1.2±2.1)%,GCS评分<6者为(4.7±2.5)%,t=3.77P=0.001犦及受伤时间犤受伤时间≥24h者凋亡百分数为(5.2±3.5)%受伤时间<24h者为(1.9±2.1)%,t=2.34,P=0.007犦有关,而与患者预后无关(χ2=0.69,P=0.50)。Bcl-2阳性表达与预后有关(Bcl-2阳性表达者15例中死亡1例,阴性表达者11例中死亡6例,χ2=5.161,P=0.023),与患者性别、年龄、GCS评分、受伤时间无关(P>0.05)。凋亡百分数与Bcl-2阳性表达间无相关性(t=0.584,P=0.564)。所有患者Ba均表达阳性。结论创伤后脑组织中存在凋亡,在病理过程中起一定作用,严重程度与患者病情及受伤时间有关,Bcl-2的蛋白表达与预后相关Bcl-2/Bax在神经细胞凋亡的信号传导中起重要作用。

肝硬变和肝癌组织bcl-2及相关蛋白bax的表达及意义

为了探讨凋亡基因ｂｃｌ２及相关蛋白ｂａｘ与肝脏病变的关系，采用免疫组化ＳＰ法观察１５例肝硬变和４０例肝细胞癌组织中ｂｃｌ２及相关蛋白ｂａｘ的表达。结果发现肝硬变和正常肝组织中ｂｃｌ２表达较低，明显低于ｂａｘ的表达（Ｐ＜０．０５）；肝癌组织中ｂａｘ表达较正常肝组织、肝硬变及癌旁组织明显低（Ｐ＜０．０５），而ｂｃｌ２无明显变化，ｂｃｌ２和ｂａｘ阳性率无显著差异（Ｐ＞０．０５）。提示肝硬变至肝癌发展过程中ｂｃｌ２和ｂａｘ的比例发生了变化，这种变化可能影响了肝细胞的凋亡状态。

非小细胞肺癌COX-2蛋白表达及与bcl-2相关性

目的 探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)环氧化酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )蛋白表达的临床意义及与bcl 2的关系。方法 免疫组织化学法检测 5 3例NSCLC癌组织及配对癌旁正常组织COX 2蛋白的表达及定位 ,Western印迹法半定量检测COX 2蛋白表达水平 ;免疫组织化学法检测癌组织bcl 2蛋白表达。结果 肺癌组织COX 2蛋白表达高于癌旁正常组织 (P <0 .0 1) ,腺癌高于鳞癌 (P <0 .0 5 ) ,但与患者的年龄、性别、TNM分期及肿瘤组织的分化程度无明显相关 (P >0 .0 5 )。COX 2与bcl 2蛋白表达相关 (P <0 .0 5 )。结论 COX 2在肺癌组织尤其是肺腺癌中表达上调 ,COX 2与bcl 2在NSCLC发展中可能起协同作用。

bcl-2相关蛋白与细胞凋亡和脑缺血再灌注损伤

原癌基因bcl-2家族是最重要的抗细胞凋亡基因,本文主要叙述bcl-2的生物学特性,及其在脑缺血再灌注损伤 和脑缺血耐受中的表达、作用机制和应用前景。

凋亡调节蛋白Bcl-2相关死亡因子Bad在正常人眼视神经组织中的表达

目的 探讨促凋亡蛋白 Bcl- 2相关死亡因子 Bad在正常人眼视神经组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学 SP法观察 8例正常人眼视神经组织中 Bad蛋白的表达情况。结果 Bad蛋白表达在正常人眼视神经髓鞘部位 ,在无髓鞘组织即筛板前视神经及束间隔处未见表达。结论

大肠癌组织中凋亡相关蛋白Fas、FasL和bcl-2的表达及其意义

目的 探讨凋亡相关蛋白Fas、FasL和bcl -2在大肠癌组织中的表达及其意义。方法 应用S -P免疫组化法检测80例大肠癌组织及 2 0例正常大肠黏膜组织中Fas、FasL和bcl-2蛋白的表达情况。结果 大肠癌组织Fas蛋白阳性表达率显著低于正常大肠黏膜组织 ,淋巴结转移和肝转移者Fas蛋白阳性表达率低于无转移者 ,Ⅱ、Ⅲ级者低于Ⅰ级者 (P <0 .0 5 ) ,其表达与临床分期、组织学类型及病理分级相关 (P <0 .0 5 )。大肠癌组织中FasL、bcl -2蛋白阳性表达率均显著高于正常大肠黏膜组织 ,其表达与临床分期、组织学类型及病理分级均无关 (P >0 .0 5 )。大肠癌组织中Fas、FasL蛋白表达与bcl -2蛋白表达无关 (P >0 .0 5 )。结论 细胞凋亡是多因素共同调控的结果 ,在大肠癌发生、发展中 ,Fas FasL系统与bcl -2可能起协调抑制肿瘤细胞凋亡的作用。

大黄素对人宫颈癌裸鼠移植瘤Bcl-2蛋白及其相关X蛋白表达的影响

目的观察大黄素对人宫颈癌siha、Hela和C33A细胞株裸鼠移植瘤Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,探讨其对宫颈癌的作用机制。方法建立人宫颈癌siha、Hela和C33A裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、大黄素低剂量组和大黄素高剂量组,分别经灌胃给予0.1%二甲基亚砜(DMSO)0.2mL/只、大黄素20mg/kg和大黄素40mg/kg,1次/d,共14d。给药结束后处死裸鼠并取瘤组织,采用免疫组织化学法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与相应对照组相比较,随着大黄素剂量增加Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达逐渐增高。其中大黄素对siha、Hela两种细胞移植瘤Bcl-2和Bax蛋白表达的调控作用优于C33A细胞移植瘤。结论大黄素可能通过下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,诱导肿瘤细胞凋亡,从而起到抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用。

Bcl-2蛋白 血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及其与预后相关性的研究

目的探讨凋亡抑制基因bcl-2蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)表达在乳腺癌中的意义,及其与影响乳腺癌预后因素的相关性,探讨二者在细胞癌变过程中的作用及意义。方法应用免疫组织化学的方法,对64例随访5年以上的乳腺癌、19例良性乳腺组织、12例乳腺不典型增生的bcl-2蛋白、VEGF、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及C-erbB-2进行检测。结果64例乳腺癌组织中,bcl-2蛋白表达的总阳性率为65.6%(42/64),bcl-2高表达的病例,组织学分级高,易出现腋淋巴结转移;VEGF在乳腺癌组织中总的阳性表达率为62.5%(40/64),与肿瘤体积大、TNM分期晚、高组织学分级、腋淋巴结转移、ER阴性、C-erbB-2阳性等预示预后差等因素有显著相关性;乳腺癌中bcl-2与VEGF表达呈正相关(r=0.4172,P=0.0001)。在正常乳腺组织、乳腺不典型增生组织中bcl-2蛋白、VEGF表达的阳性率均低于乳腺癌组织,差异有显著性(P<0.01)。结论Bcl-2表达失调可导致乳腺癌细胞凋亡调控紊乱,bcl-2基因影响肿瘤的生物学行为;VEGF参与了乳腺癌的侵袭与转移调节,VEGF高表达常提示预后差;bcl-2基因可能通过调节细胞的凋亡而参与乳腺癌的发生发展;VEGF与bcl-2的表达呈正相关,VEGF是否能上调bcl-2蛋白有待进一步研究证实。

胃癌及癌前病变中的细胞凋亡与Bcl-2蛋白、P糖蛋白的表达及相关性研究

目的 探讨胃癌及癌前病变中细胞凋亡及Bcl-2蛋白与P糖蛋白 (P -glycoprotein,P -gp)表达的变化规律及相互关系。方法 采用末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)介导的dUTP缺口原位末端标记法 (TUNEL)与免疫组织化学S-P法 ,分别检测细胞凋亡指数 (ApoptoticIndex,AI)及Bcl-2蛋白和P糖蛋白的表达。结果 AI和Bcl-2蛋白、P -gp的表达在 30例慢性浅表性胃炎 (CSG)、1 1例慢性萎缩性胃炎 (CAG)、1 2例重度肠上皮化生 (IM)三组中的比较差异无显著性(P >0 .0 5 ) ,而在 1 2例IM、1 3例中重度不典型增生 (Dys)、32例胃癌 (GC)三组中的比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,AI依次减少 ,Bcl-2蛋白与P -糖蛋白表达依次增加。AI与Bcl-2蛋白、P糖蛋白表达呈负相关 (P <0 .0 5 ) ,Bcl-2蛋白与P糖蛋白呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 癌前病变转化为胃癌与细胞凋亡和Bcl-2蛋白、P -gp的表达变化有关 ,同时P -gp、Bcl-2蛋白具有抗凋亡、耐药的双重作用 ,P-gp与Bcl-2蛋白可能存在协同作用。

Yes相关蛋白、p63和Bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤的表达及意义

目的探讨Yes相关蛋白、p63和Bcl-2蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中表达的意义及相互关系。方法应用免疫组化GTVision二步法检测45例DLBCL和25例反应性淋巴组织增生(RHL)中Yes相关蛋白、p63和Bcl-2蛋白的表达。结果 Yes相关蛋白在DLBCL中的表达阳性率为60.0%,在RHL中的表达阳性率为100%,差异具有统计学意义(P<0.05)。在DLBCL中,p63、Bcl-2蛋白的表达阳性率分别为44.4%和82.2%;在RHL中,p63的表达阳性率为0,而Bcl-2蛋白阳性细胞主要分布于套区和副皮质区,滤泡生发中心为阴性,均为正常表达模式,未见异常表达,p63、Bcl-2蛋白在DLBCL和RHL两组间表达差异具有统计学意义(P<0.05)。在DLBCL中,Yes相关蛋白、p63和Bcl-2蛋白表达之间两两比较均无相关性(P>0.05),且与年龄、性别、发病部位和免疫分型等临床病理特征无关(P>0.05)。结论 Yes相关蛋白、p63和Bcl-2蛋白与DLBCL的发生发展有关,其中Yes相关蛋白可能扮演抑癌基因的角色。

缺氧诱导因子-1α和BCL-2/腺病毒E1B19 kDa相关蛋白3在中耳胆脂瘤表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)和BCL-2/腺病毒E1B19KDa相关蛋白3(Bcl2/adenovirus E1B 19 kD interacting protein 3,BNIP3)在中耳胆脂瘤中的表达及胆脂瘤上皮的凋亡情况。方法采用免疫组织化学方法检测30例中耳胆脂瘤标本与18例外耳道皮肤标本中HIF-1α和BNIP3蛋白的表达情况,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,Tunel)检测20例中耳胆脂瘤标本和18例外耳道皮肤标本的凋亡情况。使用Pearson相关分析检验HIF-1α和BNIP3蛋白之间的相关性。结果 HIF-1α在胆脂瘤组和对照组的平均光密度分别为0.16±0.07和0.08±0.03,两组比较差异有统计学意义(t=4.279,P<0.01);BNIP3在胆脂瘤组和对照组的平均光密度分别为0.16±0.08和0.11±0.06,两组比较差异有统计学意义(t=2.463,P=0.0185);经pearson相关分析,在胆脂瘤上皮中,HIF-1α和BNIP3之间呈正相关(r=0.418,P=0.003);Tunel染色中,凋亡指数在胆脂瘤组和对照组分别为(52.8±12.5)%和(9.99±2.97)%,两组比较差异有统计学意义(t=14.166,P<0.01)。结论 HIF-1α和BNIP3在中耳胆脂瘤中的异常表达可能与胆脂瘤的高凋亡特性有关。

胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤bcl-2、p53蛋白和PCNA表达的临床意义

目的 研究胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤 (MALTL)bcl -2、p5 3蛋白和PCNA的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化的方法检测 2 6例胃MALTL组织中bcl -2、p5 3和PCNA蛋白表达情况。结果 胃MALTL主要为B淋巴细胞来源 ,胃MALTLbcl -2阳性率为 42 % ,与组织学分级、临床分期等无关 ;p5 3阳性率为 3 8% ,与病理组织学分级呈正相关 (P =0 .0 0 1) ,与临床分期无关 ;PCNA的阳性细胞百分数为 10 %～ 95 % [(66± 2 8) % ] ,其百分数与病理组织学分级、临床分期无关。结论 p5 3蛋白的表达与胃MALTL的组织学分级有密切关系 ,而bcl -2蛋白和PCNA与病理组织学分级。

类风湿关节炎患者PBMC中凋亡相关蛋白Bcl-2与c-FLIP的表达及其意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中凋亡相关蛋白Bcl-2与c-FLIP的表达水平及其临床意义。方法 60例类风湿关节炎患者外周血标本按RA疾病活动指数(DAS28)分为低度活动期(DAS28 <3. 2)、中度活动期(DAS28 3. 2～5. 1)与高度活动期(DAS28> 5. 1),以同期25例健康体检者外周血作为健康对照组(N组)。实时荧光定量PCR法检测RA患者PBMC中Bcl-2、c-FLIP、caspase-8凋亡相关蛋白的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测PBMC中cFLIP、caspase-8蛋白表达水平。结果 Bcl-2的低活动组mRNA相对表达量为1. 02±0. 35,高于健康对照组(0. 32±0. 18,P<0. 05),而中、高活动组分别为0. 08±0. 01,0. 05±0. 02,低于健康对照组(均P <0. 05)。c-FLIP的低、中、高三个活动组mRNA相对表达量分别为1. 27±0. 28,1. 32±0. 34,1. 93±0. 40,均高于健康对照组(1. 08±0. 12,均P <0. 05); caspase-8的低、中、高组mRNA相对表达量分别为2. 77±0. 97,4. 52±0. 85,2. 13±0. 44,也均高于健康对照组(均P <0. 05)。中活动组cFLIP蛋白表达明显高于健康对照组(P <0. 05),而低、高活动组与对照组差异无统计学意义(P> 0. 05);中、高活动组caspase-8蛋白表达明显高于健康对照组(P <0. 05),而低活动组表达差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 PBMC中凋亡相关蛋白c-FLIP mRNA表达水平随着RA疾病的进程增高,而Bcl-2只有低活动组有明显增高,此可为类风湿关节炎发病机制的后续研究提供参考。

矢车菊色素对高龄糖尿病大鼠B细胞淋巴瘤基因2及Bcl-2相关X蛋白基因表达的影响

目的了解矢车菊色素对高龄2型糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki rats,GK大鼠)肾损害时B细胞淋巴瘤伯血病基因-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciated X protem,Bax)基因表达的影响。方法 25周龄雄性GK大鼠24只随机分为矢车菊组和对照组,每组12只。矢车菊组饲喂含10%葡萄糖的矢车菊色素-3-葡萄糖苷溶液600 mg/L8周,对照组饲喂10%葡萄糖溶液8周。每周测量体重及空腹血糖,8周后处死。RT-qPCR检测大鼠左肾Bcl-2、Bax mRNA表达,同时检测左肾脏器指数、血清糖化血红蛋白(glycated hemoglobin A1c,GHbA1c)并观察右肾病理损害。结果矢车菊组肾Bcl-2 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。矢车菊组Bax基因与对照组比,mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。矢车菊组GK大鼠的体重、空腹血糖、血清GHbA1c和左肾脏器指数较对照组均降低(P<0.05)。与对照组比较,矢车菊组肾脏病理损害明显减轻。结论矢车菊色素可降低GK大鼠的体重、空腹血糖和血清GHbA1c水平,减轻糖尿病的肾损伤,可能与促进Bcl-2基因表达有关。

喉鳞癌蛋白激酶C与Bcl-2基因表达的相关性

目的 探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)及Bcl-2基因在喉鳞癌组织表达及细胞凋亡中的意义。方法 采用免疫组化SP法检测28例喉癌手术切除的组织标本中PKC 、Bcl - 2 基因的表达情况,25例声带息肉作为对照。结果 喉鳞癌组织中Bcl - 2基因的阳性细胞表达率显著高于对照组(P < 0.01), PKC蛋白的阳性细胞表达率显著高于对照组(P < 0.01), 且PKC与Bcl - 2基因的表达呈明显正相关(r = 0.0875)。结论 喉癌组织细胞中PKC表达增多与凋亡抑制密切相关,推测喉癌组织细胞凋亡抑制可能是通过PKC这一信号转导途径实现的。