Bcl-6共抑制因子样蛋白及E钙黏蛋白在胃癌中的表达及相关性分析

目的检测Bcl-6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)及E钙黏蛋白(E-cadherin)在胃癌及对应的癌旁组织中的表达情况,分析二者表达的相关性。方法收集58例胃癌及对应癌旁组织,运用免疫组织化学技术检测BCORL1及E-cadherin的表达情况,分析二者表达的相关性。结果 BCORL1在胃癌组织中的表达显著高于对应的癌旁组织(60.3%vs.17.2%,P=0.000),而E-cadherin在胃癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织(27.6%vs.63.8%,P=0.000);BCORL1及E-cadherin表达与肿瘤组织病理分化、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05);胃癌组织中BCORL1与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.571,P=0.002)。结论胃癌组织中BCORL1高表达与恶性临床病理参数相关,并与E-cadherin表达呈负相关,提示BCORL1可能通过转录抑制E-cadherin,促进胃癌进展和转移。

BCL6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的观察BCL6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,并通过下调肺癌A549细胞中BCORL1的水平观察对A549细胞侵袭和迁移能力的影响。方法收集68例NSCLC组织及对应的癌旁组织,应用免疫组织化学染色分析BCORL1和E钙黏素(E-cadherin)在NSCLC及对应癌旁组织中的表达;采用小干涉RNA(siRNA)下调肺癌A549细胞中BCORL1的水平,TranswellTM小室法检测A549肺癌细胞迁移和侵袭能力。结果 BCORL1蛋白在NSCLC组织中表达水平显著高于对应癌旁组织,而E-cadherin蛋白在NSCLC组织中表达水平则显著低于对应癌旁组织;相关性分析证实BCORL1蛋白与E-cadherin蛋白在NSCLC组织中的表达呈显著负相关;临床相关分析发现BCORL1蛋白表达与淋巴结转移和TNM分期具有显著的相关性;特异性siRNA下调BCORL1水平后,E-cadherin蛋白上调;敲低BCORL1后,明显抑制A549肺癌细胞侵袭和迁移。结论 BCORL1在NSCLC组织中高表达且与E-cadherin表达呈显著负相关,其高表达与NSCLC恶性临床病理特征相关。敲低BCORL1,上调E-cadherin表达并抑制肺癌细胞侵袭和迁移能力。

BCL6共抑制因子样蛋白1在老年非小细胞肺癌患者组织中表达及其对远期预后的影响

目的探讨BCL6共抑制因子样蛋白(BCORL)1在老年非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织中的表达及其对远期预后的影响。方法 79例手术后NSCLC癌组织标本及其癌旁组织标本,采用免疫组化染色检测BCORL1蛋白表达,并采用Cox比例风险回归模型分析BCORL1蛋白表达对老年患者远期预后的影响。结果 NSCLC老年患者癌组织BCORL1蛋白表达率(70.89%)显著高于癌旁组织(25.32%,P<0.05);癌组织BCORL1蛋白阳性表达率与老年患者年龄、性别、病灶直径、病理学类型无关(P>0.05),与TNM分期、淋巴结转移有相关性(P<0.05);79例接受了12～36个月的随访观察,BCORL1蛋白阳性表达者3年生存率[21.42%(14/56)]显著低于阴性表达者[47.83%(11/23);χ~2=5.505,P=0.019]。分化程度减低、淋巴结转移、BCORL1蛋白阳性表达是NSCLC老年患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 BCORL1在NSCLC组织中表达水平上调,并且与临床病理学特征及预后有相关性。

普兰林肽对5×FAD小鼠和WT小鼠认知行为及脑和视网膜β淀粉样蛋白6E10、炎症因子和神经细胞形态的影响

目的 探讨普兰林肽对5×FAD小鼠和WT小鼠认知行为及脑和视网膜的β淀粉样蛋白(Aβ)6E10、炎症因子和神经细胞形态的影响。方法 实验选取5×FAD小鼠32只、WT小鼠16只,均为雌性。随机将5×FAD小鼠分为空白组、治疗组;WT组不进行任何处理;空白组腹腔注射PBS溶液;治疗组每天腹腔注射1次普兰林肽[200μg/(μ·d)],治疗8周。Morris水迷宫实验测定其认知行为的变化;采用免疫组织化学检测小鼠海马组织细胞、视网膜中Aβ6E10蛋白的表达;ELISA测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)炎症因子的含量。HE染色测定小鼠海马组织中神经细胞的排列和形态。结果 治疗组的潜伏时间短于5×FAD组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的穿越平台次数和目标象限停留百分比高于5×FAD组,差异有统计学意义(P<0.05);5×FAD组脑内和视网膜内的Aβ6E10面积高于治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05);视网膜和脑内的Aβ6E10具有正相关(P<0.05)。治疗组与5×FAD组脑中和视网膜中的TNF-α和IL-1β比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组较5×FAD组神经细胞排列规则,边界清晰。结论 普兰林肽可以改善小鼠的认知能力;使神经细胞排列较为规整,形态规则边界清晰;神经胶质细胞分布集中;周围间隙减小;脑内和视网膜内Aβ6E10具有同步性。

肠内营养对老年慢性心衰患者营养状态及胰岛素样生长因子1、C反应蛋白及白介素6的影响

目的探讨肠内营养对老年慢性心衰(CHF)患者营养状态及IGF-1、C反应蛋白及白介素6的影响。方法将老年CHF患者134例,随机单盲取法分为研究组与对照组,每组67例,研究组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予肠内营养支持治疗,对照组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予自愿饮食,观察两组治疗前后营养状态、炎性指标、血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、心功能指标、治疗期间不良事件及并发症发生情况。结果研究组治疗后营养状况评分低于同组治疗前及对照组同期(P <0.05),治疗后体质量指数(BMI)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、三头肌皮褶厚度(TSF)、上臀肌围(AMC)均高于同组治疗前及对照组同期(P <0.05);总IGF-1、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)均低于同组治疗前及对照组同期(P <0.05),研究组治疗后心室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO)及6 min步行距离均高于对照组同期(P <0.05),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)均低于对照组同期(P <0.05)。治疗期间两组均未见不良事件发生,研究组并发症发生率低于对照组(P <0.05)。结论肠内营养支持可改善老年慢性心衰患者营养状态,提高心功能,降低IGF-1、CRP、IL-6水平,达到提高治疗效果目的。

肠内营养对老年慢性心力衰竭患者营养状态及胰岛素样生长因子-1、C反应蛋白、白细胞介素-6的影响

目的探讨肠内营养对老年慢性心力衰竭(CHF)患者营养状态及胰岛素样生长因子(IGF)-1、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6的影响。方法老年CHF患者134例随机分为研究组与对照组,每组67例,研究组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予肠内营养支持治疗,对照组在常规纠正心力衰竭治疗基础上给予自愿饮食,观察两组治疗前后营养状态、炎症指标、血清中IGF-1、心功能指标、治疗期间不良事件及并发症发生情况。结果研究组治疗后营养状况评分显著低于治疗前及对照组同期(P<0.05),体重指数(BMI)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、三头肌皮褶厚度(TSF)、上臀肌围(AMC)显著高于治疗前及对照组同期(P<0.05),总IGF-1、IL-6、CRP显著低于治疗前及对照组同期(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO)及6min步行距离显著高于对照组(P<0.05),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)显著低于对照组(P<0.05)。治疗期间两组均无不良事件发生,研究组并发症发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论肠内营养支持可改善老年CHF患者营养状态,提高心功能,降低IGF-1、CRP、IL-6水平,达到提高治疗效果的目的。

胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白-1抑制视网膜血管新生的机制研究

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白-1(IGFBP-rP1)抑制血管内皮细胞生长因子(VEGF)体外诱导视网膜新生血管形成的机制。方法猕猴视网膜/脉络膜血管内皮细胞株(RF/6A)扩增培养、血清饥饿培养24 h后,分为对照组及50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1干预组进行干预,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;分为对照组,10 ng/mL VEGF干预组,50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1+10 ng/mL VEGF干预组进行干预,免疫细胞化学染色检测细胞中B-Raf蛋白表达,分光光度法检测细胞中Caspase 3活性的变化。结果流式细胞仪检测显示,50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1干预组RF/6A细胞凋亡率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫细胞化学染色检测与Caspase 3活性检测显示,与对照组比较,10 ng/mL VEGF干预组RF/6A细胞细胞质平均吸光度显著升高、D405值显著降低(均P<0.05);与10 ng/mL VEGF干预组比较,50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1+10 ng/mL VEGF干预组RF/6A细胞细胞质平均吸光度显著降低、D405值显著升高(均P<0.05),且各组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 IGFBP-rP1通过干预B-Raf蛋白表达,上调细胞Caspase 3活性,对抗VEGF的促视网膜血管新生效应,发挥抑血管新生因子的负向调节作用。

胰岛素样生长因子-1对痴呆模型大鼠额叶、海马Caspase-3 P20活性片段及Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对痴呆模型大鼠额叶、海马caspase-3 P20活性片段及Bcl-2蛋白表达的影响。方法本研究采用切断成年Wistar大鼠双侧穹隆海马伞,建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。分为正常对照组、假手术组、痴呆组、小剂量胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组、大剂量IGF-1组。痴呆模型制备1d后开始侧脑室给药,连续21d。正常对照组不给予任何处置。利用免疫组织化学染色结合图像分析方法观察各组大鼠额叶、海马胆碱能神经元caspase-3 P20活性片段、Bcl-2蛋白的表达,并进行光密度值(IOD)测定。结果小剂量IGF-1组和大剂量IGF-1组与痴呆组相比,caspase-3 P20阳性神经元IOD值明显降低,具有显著差异(P<0.001)。小剂量IGF-1组与大剂量IGF-1组比较,caspase-3 P20阳性神经元IOD值明显降低,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。小剂量IGF-1组和大剂量IGF-1组与痴呆组相比,额叶、海马Bcl-2阳性神经元明显增多,IOD值明显增加,具有显著差异(P<0.001)。小剂量IGF-1组与大剂量IGF-1组比较,Bcl-2阳性细胞增多,IOD值明显增高,差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论 IGF-1能够通过抑制caspase-3的活化并增加Bcl-2的表达量,减少细胞凋亡。

基于NOD样受体热蛋白结构域3/胱天蛋白酶-1通路探讨鱼腥草注射液缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺炎肺损伤的作用机制

目的探究鱼腥草注射液(HHI)对急性肺炎小鼠的保护作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(caspase-1)通路的调控作用。方法2019年7月至2020年6月,将购自广东省医学实验动物中心的90只BALB/c雄性小鼠分为正常对照组、模型组、HHI低(10 mL/kg)及高(30 mL/kg)剂量组、NLRP3激动剂(DDC)组(300 mg/kg)、HHI+DDC组(30 mL/kg+300 mg/kg),每组15只。除正常对照组外,其余各组均通过雾化吸入脂多糖(LPS)2.5 g/L建立急性肺炎模型。末次给药后检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平、中性粒细胞数目;取右肺,检测右肺湿重/干重(W/D);左肺组织病理损伤情况,肺组织凋亡相关斑点样蛋白(ASC)mRNA及蛋白、NLRP3 mRNA及蛋白、TNF-α、IL-6、caspase-1蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠出现肺泡破坏及炎性细胞浸润等病理损伤现象,W/D、IL-6[(1692.06±95.26)µg/L比(569.91±50.89)µg/L]、TNF-α[(1846.24±99.26)µg/L比(506.99±55.48)µg/L]水平及中性粒细胞数目[(66.24±2.56)×10^(6)个/毫升比(5.09±1.98)×10^(6)个/毫升]、肺组织NLRP3 mRNA及蛋白(1.01±0.13比0.22±0.12)、ASC mRNA及蛋白(1.03±0.13比0.29±0.11)、caspase-1(1.06±0.14比0.25±0.12)、TNF-α、IL-6蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,HHI低、高剂量组肺泡破坏及炎性细胞浸润等现象缓解,W/D、小鼠BALF中炎性因子IL-6[(1069.13±75.12)µg/L、(889.02±65.13)µg/L比(1692.06±95.26)µg/L]、TNF-α[(1225.33±84.02)µg/L、(806.63±69.12)µg/L比(1846.24±99.26)µg/L]含量及中性粒细胞数目[(45.33±2.22)×10^(6)个/毫升、(22.63±2.02)×10^(6)个/毫升比(66.24±2.56)×10^(6)个/毫升]、肺组织中NLRP3 mRNA及蛋白(0.83±0.11、0.52±0.12比1.01±0.13)、ASC mRNA及蛋白(0.82±0.12、0.54±0.11比1.03±0.13)、caspase-1(0.80±0.15、0.59±0.12比1.06±0.14)、TNF-α、IL-6蛋白表达降低(P<0.05);DDC组小鼠上述指标与HHI低、高剂量组相反(P<0.05)。结论HHI可通过抑制NLRP3/caspase-1通路激活,改善肺炎小鼠炎症反应,缓解肺损伤。

ADP核糖基化因子样6相互作用蛋白1(ARL6IP1)低表达对电离辐射所致小鼠小肠上皮细胞损伤的影响

目的探讨ADP核糖基化因子样6相互作用蛋白1(ARL6IP1)对电离辐射后小肠上皮细胞损伤的影响。方法①动物实验:C57BL/6N小鼠进行^(60)Co源γ射线全腹部单次照射,剂量15 Gy,制备小鼠放射性肠损伤模型,Western印迹法测定正常对照组及照射后1,3,7和14 d小鼠空肠组织ARL6IP1蛋白表达。②细胞实验:设计3条不同序列的Arl6ip1-小干扰RNA(siRNA)(Arl6ip1-siRNA-132,Arl6ip1-siRNA-249和Arl6ip1-siRNA-565),以慢病毒LV5(EF-1aF/GFP&Puro)为载体,构建Arl6ip1敲低的小肠上皮IEC-6细胞。用流式细胞术测定上述慢病毒转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率。分别用CCK-8法和免疫荧光法测定细胞存活率和磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达水平。结果①动物实验:与正常对照组相比,小鼠腹部照射15 Gy后1和3 d,空肠组织中ARL6IP1蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01);照射后7和14 d,ARL6IP1蛋白表达无显著差异。②细胞实验:阴性对照siRNA组和Arl6ip1-siRNA-565组慢病毒的转染效率均>80%,Arl6ip1-siRNA-132和Arl6ip1-siRNA-249组慢病毒转染效率<80%。与阴性对照siRNA组相比,转染Arl6ip1-siRNA-565慢病毒的IEC-6细胞中ARL6IP1蛋白表达显著降低(P<0.05)。照射15 Gy后,与阴性对照siRNA细胞相比,Arl6ip1-siRNA-565转染后Arl6ip1敲低细胞存活率显著下降(P<0.01),γH2AX表达显著升高(P<0.01)。结论ARL6IP1低表达可促进照射后细胞DNA损伤,抑制细胞存活,从而加重电离辐射所致小鼠小肠上皮细胞损伤。

EDEM1通过稳定ATF6促进颅内动脉瘤发展的作用研究

目的:探究内质网降解增强α-甘露糖苷酶样蛋白1(EDEM1)和激活转录因子6(ATF6)在颅内动脉瘤(IA)发展中的作用。方法:纳入40例颅内动脉瘤患者和40例健康受试者,收集两组人群血清,通过ELISA检测ATF6水平。根据Hunt-Hess分级和Fisher分级将IA患者分为:轻度疾病组、中度疾病组和重度疾病组,比较3组患者血清中ATF6水平。将si-EDEM1和si-NC转染至HCAECs细胞,分组为si-EDEM1组和si-NC组,采用western blot检测两组细胞EDEM1和ATF6蛋白表达水平,CCK-8法检测两组细胞增殖水平。通过免疫共沉淀检测EDEM1和ATF6的相互作用情况。将si-ATF6和si-NC转染至HCAECs细胞,分组为si-ATF6组和si-NC组,采用Western blot检测两组细胞EDEM1和ATF6蛋白表达水平,CCK-8法检测两组细胞增殖水平。结果:与健康受试者相比,颅内动脉瘤患者血清中ATF6水平升高(P<0.05)。ATF6水平在轻度疾病组、中度疾病组和重度疾病组中依次递增(P<0.05)。与si-NC组相比,si-EDEM1组细胞EDEM1和ATF6蛋白表达水平降低,细胞增殖水平降低(P<0.05)。EDEM1和ATF6存在相互作用。与si-NC组相比,si-ATF6组细胞ATF6蛋白表达水平降低,细胞增殖水平降低(P<0.05)。结论:EDEM1通过稳定ATF6促进动脉内皮细胞增殖,与IA的恶化相关。

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)介导庆大霉素所致大鼠急性肾损伤

目的探讨抗炎细胞因子C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)在庆大霉素所致急性肾损伤(AKI)中的作用。方法SD大鼠分为5组,对照组、模型组和3个实验组。模型组和实验组皮下注射庆大霉素400 mg/(kg·d),连续注射2 d,建立庆大霉素中毒性AKI动物模型;3个实验组大鼠在注射庆大霉素前2 d,分别给予(0.5、5、50)mg/kg的CTRP6腺病毒表达载体。苦味酸比色法检测肌酐(Cr)含量,紫外分光光度法检测血清尿素氮(BUN)含量,ELISA检测血清CTRP6的水平以及肾组织匀浆中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。Western blot法检测肾脏组织中CTRP6、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)和caspase-1的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠AKI指标血清BUN和Cr水平较对照组显著增高,炎症因子IL-1β和TNF-α的分泌量以及NLRP3和caspase-1蛋白表达水平也显著增加。与模型组相比,实验组大鼠血清BUN和Cr水平降低,IL-1β和TNF-α的分泌减少,NLRP3和caspase-1的表达水平下降。随着注射CTRP6腺病毒表达载体注射剂量的增加,抑制效果逐渐增强。结论 CTRP6以剂量依赖的方式减弱庆大霉素所致的大鼠急性肾功能损伤。

EDEM1通过稳定ATF6促进颅内动脉瘤发展的作用

目的 探究内质网降解增强α-甘露糖苷酶样蛋白1 (EDEM1)和激活转录因子6 (ATF6)在颅内动脉瘤(IA)发展中的作用。方法 纳入40例IA患者和40例健康受试者,收集两组人群血清,通过ELISA检测ATF6水平。根据Hunt-Hess分级和Fisher分级将IA患者分为:轻度疾病组、中度疾病组和重度疾病组,比较3组患者血清中ATF6水平。将si-EDEM1和si-NC转染至HCAECs细胞,分组为si-EDEM1组和si-NC组,采用Western blot检测两组细胞EDEM1和ATF6蛋白表达水平,CCK-8法检测两组细胞增殖水平。通过免疫共沉淀检测EDEM1和ATF6的相互作用情况。将si-ATF6和si-NC转染至HCAECs细胞,分组为si-ATF6组和si-NC组,采用Western blot检测两组细胞EDEM1和ATF6蛋白表达水平,CCK-8法检测两组细胞增殖水平。结果 与健康受试者相比,IA患者血清中ATF6水平升高(P<0.05)。ATF6水平在轻度疾病组、中度疾病组和重度疾病组中依次递增(P<0.05)。与si-NC组相比,si-EDEM1组细胞EDEM1和ATF6蛋白表达水平降低,细胞增殖水平降低,(P <0.05)。EDEM1和ATF6存在相互作用。与si-NC组相比,si-ATF6组细胞ATF6蛋白表达水平降低,细胞增殖水平降低(P<0.05)。结论 EDEM1通过稳定ATF6促进动脉内皮细胞增殖,与IA疾病恶化相关。

ATF6调控生殖相关基因HSPA1L表达的分子机制

目的探究内质网应激活化转录因子6(ATF6)对生殖相关基因热休克蛋白A1样蛋白(HSPA1L)表达的影响并初步阐明其调控分子机制。方法在人胚肾细胞系HEK-293T中转染ATF6过表达质粒,RT-qPCR和Western blot验证过表达效率;利用雄性ATF6敲除小鼠睾丸组织转录物组测序信息,筛选ATF6下游5个生殖相关基因;双荧光素酶报告基因实验选择启动子活性较高的下游基因并检测过表达ATF6对其启动子活性的影响;通过gene-regulation预测ATF6和下游基因启动子可能的结合位点;RT-qPCR和Western blot检测在HEK-293T细胞中过表达ATF6对于下游基因表达的影响;利用凝胶迁移实验(EMSA)确定ATF6与下游基因启动子是否结合。结果转染后HEK-293T细胞中ATF6的mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.05)表达水平明显升高。转录物组测序及双荧光素酶报告基因实验筛选出ATF6下游的生殖相关基因HSPA1L。ATF6能够促进HSPA1L的截短启动子活性(P<0.001)。过表达ATF6后,HSPA1L的表达量明显升高(P<0.001)。差异均有统计学意义。ATF6蛋白能与HSPA1L的启动子DNA序列aagtcgtcac相结合。结论内质网应激的关键分子ATF6通过结合生殖相关基因HSPA1L的启动子调控后者表达水平,这将为预防或治疗与内质网应激(ERS)有关的男性不育的深入研究奠定基础。

不同剂量非奈利酮治疗早期2型糖尿病肾病的疗效及对血清IGF-1、IL-6水平的影响

目的 探讨不同剂量非奈利酮治疗早期2型糖尿病肾病(DKD)患者的临床疗效及对血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白介素-6(IL-6)水平的影响。方法 选取2023年1月至2023年8月荆州市中心医院就诊的76例早期DKD患者为研究对象,随机分为小剂量组(10 mg/d,n=38)和大剂量组(20 mg/d,n=38),比较两组治疗前及治疗12周后肾功能指标[尿白蛋白/肌酐比值(UACR)、血清肌酐(Scr)、肾小球滤过率(eGFR)]、血钾、血压及血清IGF-1、IL-6水平的变化。结果 治疗后,两组UACR、Scr、IGF-1、IL-6均低于治疗前(P<0.05),eGFR、血钾均高于治疗前,且大剂量组上述指标改善效果优于小剂量组(P<0.05);两组治疗后SBP、DBP与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,治疗前UACR与血清IGF-1、IL-6水平呈正相关;治疗后,大剂量组UACR与血清IGF-1、IL-6水平呈正相关,小剂量组UACR与血清IGF-1、IL-6水平无相关性。结论 与小剂量非奈利酮相比,大剂量非奈利酮能减少早期DKD患者的尿蛋白,降低血清IGF-1与IL-6水平,进一步改善肾功能,但可能有一定的血钾升高风险,临床应用时需关注。

内质网应激通路相关蛋白IRE1、PERK、ATF6在舌鳞癌中的表达及其功能的生物信息学分析

目的:本研究旨在通过生物信息学方法系统分析肌醇需求酶1(Inositol-Requiring Enzyme 1,IRE1)、蛋白激酶R样内质网激酶(Protein Kinase R-like Endoplasmic Reticulum Kinase,PERK)、激活转录因子6(Activating Transcription Factor 6,ATF6)在舌鳞癌中的表达及意义。方法:使用GEO、Kaplan-Meier Plotter、GeneMANIA、DAVID等多个数据库对IRE1、PERK、ATF6在舌鳞癌中的表达与预后价值、相互蛋白作用网络及功能富集进行综合分析。结果:ATF6在舌鳞癌组织中表达高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P <0.05)。IRE1及PERK高表达组患者总生存率(OS)高于低表达组,ATF6高表达组患者OS低于低表达组,差异均具有统计学意义(P <0.05)。本研究筛选出与IRE1、PERK、ATF6相互作用的蛋白质各20个并进行GO富集分析。IRE1及相关蛋白富集于内质网、线粒体等细胞组分中,具有蛋白质结合、蛋白磷酸酶结合等分子功能,参与内质网应激反应、泛素依赖性ERAD途径等生物学过程。PERK及相关蛋白富集于胞液、细胞膜等细胞组分中,具有翻译起始因子活性、RNA结合等分子功能,参与内质网未折叠蛋白反应、细胞对葡萄糖饥饿的反应等生物学过程。ATF6及其相关蛋白富集于内质网、细胞核等细胞组分中,具有转录调控区序列特异性DNA结合、蛋白质异二聚化活性等分子功能,参与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、内质网未折叠蛋白反应等生物学过程。结论:ATF6在舌鳞癌组织中呈现高表达,同IRE1、PERK与舌鳞癌患者不良预后相关。在未来抗肿瘤治疗中,IRE1、PERK、ATF6可能成为舌鳞癌的诊断和治疗的新选择。

CMTM6和PD-L1在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨CMTM6和PD-L1在宫颈鳞癌(CSCC)组织中的表达、相互关系及临床意义。方法采用免疫组化法检测20例正常子宫颈、26例子宫颈癌前病变和46例早期宫颈鳞癌组织中CMTM6和PD-L1表达,分析CMTM6和PD-L1表达与早期宫颈鳞癌临床病理特征及预后的关系。结果CMTM6在正常宫颈、宫颈癌前病变、宫颈鳞癌组织中高表达分别为0%(0/20)、11.54%(3/26)、60.87%(28/46),三者差异有统计学意义(χ^(2)=31.08,P<0.01);PD-L1在3组中高表达分别为10%(2/20)、15.38%(4/26)、71.74%(33/46),差异有统计学意义(χ^(2)=32.58,P<0.01)。McNemar检验CMTM6、PD-L1表达在早期宫颈鳞癌中差异无统计学意义(P>0.05);Kappa检验CMTM6和PD-L1在早期宫颈鳞癌中的表达呈一致性且密切相关(P<0.01,Kappa值0.472)。CMTM6高表达的早期宫颈鳞癌患者脉管癌栓、宮旁浸润和淋巴转移发生率增高(P<0.01),PD-L1表达则对其无明显影响(P>0.05);通过Kaplan-Meier分析,CMTM6高表达的早期宫颈鳞癌患者5年无病生存期下降,而PD-L1高表达的早期宫颈鳞癌患者5年无病生存期无明显改变。结论CMTM6和PD-L1在早期宫颈鳞癌患者中表达增高且两者呈一致性,CMTM6可能是早期宫颈鳞癌浸润、转移预警及生存预后评估的指标。

CMTM6和PD-L1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其对临床病理特征和预后的影响

目的检测CMTM6和PD-L1蛋白在乳腺癌组织中的表达情况及对患者临床病理特征和预后的影响。方法收集2017年6月-2019年1月接受乳腺癌根治术的原发性乳腺癌患者88例。免疫组织化学检测乳腺癌组织和癌旁组织中CMTM6和PD-L1蛋白表达,分析其与临床病理特征和术后3 a生存率的影响。Cox单因素和多因素分析影响乳腺癌患者术后3 a死亡的危险因素,受试者工作曲线评估CMTM6阳性、PD-L1阳性以及CMTM6和PD-L1双阳性对乳腺癌患者术后3 a死亡的临床预测价值。结果CMTM6和PD-L1在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为51.1%和70.5%,均高于癌旁组织中的阳性表达率6.8%和9.1%(χ^(2)=41.992、69.167,P<0.001)。CMTM6和PD-L1阳性表达与乳腺癌的分子分型、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移、脉管侵犯有关(P<0.05)。CMTM6阳性组和PD-L1阳性组术后3 a生存率分别为55.6%和62.9%,低于CMTM6阴性组和PD-L1阴性组的生存率(88.4%和92.3%),差别有统计学意义,CMTM6和PD-L1双阳性组、单阳性组和双阴性组的生存率分别为39.3%、86.3%和88.9%,组间比较差别有统计学意义(χ^(2)=21.098,P<0.001),其中CMTM6和PD-L1双阳性组生存率最低。经Cox单因素和多因素回归分析显示,三阴性乳腺癌、中低分化程度、TNM分期Ⅲ期、CMTM6阳性、PD-L1阳性以及CMTM6和PD-L1双阳性是影响乳腺癌患者术后3 a生存率的独立危险因素。CMTM6和PD-L1双阳性预测乳腺癌术后3 a死亡的曲线下面积为0.956,大于CMTM6阳性组和PD-L1阳性组的0.815和0.754(Z=3.215、4.521,P=0.024、0.006)。结论CMTM6和PD-L1在乳腺癌中的阳性表达率增加,影响乳腺癌患者术后3 a的生存率;CMTM6和PD-L1双阳性对乳腺癌患者术后预后不良具有较强的临床预测价值。

青藤碱抑制NLRP3和下游致炎因子表达改善佐剂性关节炎大鼠关节炎症状

目的探讨青藤碱对佐剂性关节炎(AA)大鼠的抗炎作用及含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)的变化。方法Wistar大鼠随机分为对照组、AA模型组、(100、200、400)mg/kg青藤碱组和100 mg/kg雷公藤组,每组10只。除对照组外,其余均采用Freund完全佐剂建立AA模型。建模后12 d,对照组和模型组给予等量生理盐水,其余各组分别灌胃给予相应药物,每天1次,连续16 d。通过多发性关节炎和关节肿胀度评价AA大鼠关节情况,Western blot法检测滑膜组织NLRP3蛋白水平,免疫组织化学染色法检测滑膜组织NLRP3表达和分布;ELISA检测大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果与对照组比较,模型组多发性关节炎明显,关节肿胀度增加,青藤碱各治疗组和雷公藤组大鼠多发性关节炎和关节肿胀度明显降低;青藤碱各治疗组滑膜组织NLRP3蛋白表达减弱,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著下降。结论青藤碱通过抑制NLRP3和下游致炎因子表达改善AA大鼠关节炎症。

妊娠糖尿病患者NLRP3、CTRP6和IL-1β检测的临床意义

目的探讨血清NOD样受体蛋白3(NLRP3)、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)、白细胞介素1β(IL-1β)在妊娠糖尿病(GDM)中的变化,及其判断不良妊娠结局的价值。方法选取2018年1月—2020年12月南通市妇幼保健院GDM患者145例(GDM组),以正常妊娠女性145例作为对照组。检测所有研究对象NLRP3、CTRP6、IL-1β、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG),计算胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。根据GDM患者妊娠结局分为不良妊娠组和正常妊娠组。采用Pearson相关分析评估GDM组各项指标之间的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标判断不良妊娠结局的效能。结果与对照组比较,GDM组CTRP6、NLRP3、IL-1β、FINS、HbA1c、FPG、HOMA-IR显著升高(P<0.05),HOMA-β显著降低(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,CTRP6、NLRP3、IL-1β与FINS、HbA1c、FPG、HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与HOMA-β呈负相关(P<0.05)。与正常妊娠组比较,不良妊娠组CTRP6、NLRP3、IL-1β、FINS、HbA1c、FPG、HOMA-IR显著升高(P<0.05),HOMA-β显著降低(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,FINS、HbA1c、FPG、HOMA-β、HOMA-IR判断不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)均<0.7,CTRP6、NLRP3和IL-1β判断不良妊娠结局的AUC分别为0.846、0.802、0.871,三者联合检测的AUC为0.931。结论GDM患者CTRP6、NLRP3、IL-1β水平升高,且与胰岛素抵抗和血糖水平密切相关。CTRP6、NLRP3、IL-1β联合检测在判断不良妊娠结局中有较高的临床价值。