二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x_1表达的影响

目的观察二烯丙基三硫化物涂层支架对犬冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x1表达的影响。方法犬进行冠状动脉左回旋支支架植入术,将二烯丙基三硫化物涂层支架和对照支架分别植入左回旋支的远端和近端,术后28d处死,进行细胞凋亡检测、Bcl-x1免疫组化和蛋白质印迹杂交。结果术后28d,二烯丙基三硫化物涂层支架组细胞凋亡率为(9.18±3.41)%高于对照支架组的(3.28±1.74)%,P<0.01。对照支架组血管壁内Bcl-x1蛋白表达为,12.17±5.02,显著高于二烯丙基三硫化物涂层支架组的5.46±2.50,P<0.05。蛋白质印迹杂交也显示对照支架组有高水平Bcl-x1蛋白表达(37.52±6.15),明显高于二烯丙基三硫化物涂层支架组(10.48±2.75),P<0.01。结论二烯丙基三硫化物可逆转血管损伤后内膜中Bcl-x1的高表达,促进细胞凋亡,可能是二烯丙基三硫化物涂层支架抑制内膜增生的机制之一。

用显微注射法建立转bcl-x_l基因小鼠

建立转bcl xl基因小鼠 ,继而传代建系 ,用于缺血性脑血管疾病的研究。采用显微注射法 ,将人bcl xl基因注入昆明小白鼠受精卵获得子代鼠 ,然后作PCR ,Southern blot ,mRNA ,Western blot检测以获得阳性鼠。实验中注射受精卵 16 5 4枚 ,移植卵数 14 4 8枚 ,受体鼠 4 9只 ,怀孕鼠 7只 ,子代鼠 13只 ,整合数 4只并均有表达 ,植入受精卵的存活率 83% ,受精卵的总存活率 0 .78% ,移植鼠的怀孕率 14 .3% ,整合效率 30 .7% ,总有效率为 0 .2 4 %。初步获得了转bcl

白花蛇舌草对人肝癌Bel7402细胞凋亡的影响

目的从基因水平研究白花蛇舌草对体外培养的人肝癌Bel7402细胞诱导凋亡的作用及其可能的作用机制。方法采用人肝癌Bel7402细胞常规体外培养,随机设定空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照组、白花蛇舌草组。倒置显微镜直接观察细胞形态变化。HE染色法光镜下观察细胞形态改变,计算凋亡指数。采用MTT法检测白花蛇舌草对癌细胞的生长抑制作用。RT-PCR半定量法检测Bcl-xl、p53基因mRNA表达的变化。结果光镜下观察到白花蛇舌草组肿瘤细胞脱壁,有细胞出芽现象等凋亡形态改变;凋亡指数略低于5-Fu阳性对照组,但与空白对照组比较有显著差异(P<0.01);细胞抑制率略低于5-Fu阳性对照组,与空白对照组相比有显著差异(P<0.01);上调p53基因mRNA表达,降低Bcl-xl基因mRNA表达,与空白对照组比较均有显著差异。结论白花蛇舌草抑制人肝癌Bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因Bcl-xl基因表达有关。