PI3K在BCR/ABL阳性细胞中促进细胞周期进程和抗凋亡的作用

BCR/ABL阳性细胞中,磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)途径是BCR/ABL激活的一条重要途径,它对于BCR/ABL阳性细胞恶性表型的维持是必不可少的。现对PI3K在BCR/ABL阳性细胞中促进细胞周期进程和抗凋亡的作用和机制作一综述。

罕见的慢淋伴Ph^1阳性、bcr/abl融合基因阳性

临床上 ,Ph1阳性、bcr/abl阳性见于慢性粒细胞白血病的病人 .本病例则在外周血淋巴细胞绝对值、骨髓淋巴细胞形态和数值异常、免疫学B细胞表型的高表达以及临床表现等方面均符合慢性淋巴B细胞型白血病诊断的病人 ,染色体检查发现细胞Ph染色体阳性 ,即t (9;2 2 ) ,经RTPCR检测 。

bcr/abl融合转录子阳性的B细胞型急性淋巴细胞白血病免疫表型特点

为探讨B细胞型急性淋巴细胞白血病 (B ALL)中bcr/abl融合转录子阳性白血病细胞的生物学特征 ,用流式细胞术检测 2 6例bcr/abl阳性及 32例bcr/abl阴性B ALL病例的免疫表型 ,用PCR法检测免疫球蛋白重链(IgH)基因重排。结果表明 :所有的病例均为CD19阳性。bcr/abl阳性与bcr/abl阴性B ALL表面分子有显著统计学差异 (P <0 .0 5 )的是CD34(96 .2 %与 6 5 .6 % ) ,CD10 (96 .2 %与 71.8% )及CD38(43.8%与 95 .4 % )。在 2 6例bcr/abl阳性病例中 ,原始细胞共表达CD10 + /CD19+ /CD34+ ,CD10 + /CD34+ /HLA DR+ 和CD10 + /CD34+ /CD38-分别为 92 .3% (2 4 / 2 6 ) ,73 1% (19/ 2 6 )和 5 6 .2 % (9/ 16 )。对bcr/abl阳性组的 17例进行了IgH基因重排检测 ,10例阳性 (5 8.8% )。 14例bcr/abl阴性组中 12例 (85 .7% )阳性。在 32例bcr/abl阴性病例中 ,原始细胞共表达CD10 + /CD19+ /CD34+ 和CD10 + /CD34+ /HLA DR+ 分别为 4 3.8% (14 / 32 )和 37.5 % (12 / 32 ) ,无 1例表型为CD10 + /CD34+ /CD38-。结论 :bcr/abl阳性B ALL患者CD34和CD10阳性率较高 ,而CD38阳性率较低 ,且IgH基因重排检出率较低 ,其独特的免疫表型特征是CD10 + /CD34+ /CD38-。

新型Bcr／Abl和Src双靶点抑制剂FB2治疗慢性髓系白血病的作用及机理研究

目的：临床研究表明，酪氨酸激酶抑制剂imatinib能有效地控制gcr／Abl阳性的慢性髓系白血病（chronic myelogenous leukemia，CML），但随着临床用药，imatinib逐渐出现耐药。FB2属噻唑嘧啶胺化合物，是一种新型Ber／Abl和Src双靶点抑制剂。本研究旨在探讨FB2对慢性髓系白血病的治疗作用及作用机理。方法：采用MTT法观察FB2在体外对人慢性髓系白血病细胞K562及K562的imatinib耐药株（K562R／5．0）细胞增殖的抑制作用；采用流式细胞技术观察FB2对K562及K562R／5．0细胞的周期阻滞作用；western blot分析方法检测FB2对K562及K562R／5．0细胞的总Bcr／Abl、c-Src和Lyn的蛋白表达及其磷酸化水平的影响；在体内采用荷人慢性髓系白血病K562细胞的重症联合免疫缺陷小鼠模型，观察FB2对其治疗作用。结果：FB2在体外抑制K562及K562R／5．0细胞增殖的IC50分别为0．03nM和0．43nM;在体内FB2明显降低白血病小鼠脾脏指数，降低白细胞总数及中性粒细胞数。作用机理研究表明，FB2阻滞慢性髓系白血病细胞于Gl期；明显降低Bcr／Abl、c-Src和Lyn的磷酸化水平；与阳性对照药dasatinib相当。结论：FB2在体内外均可明显抑制人慢性髓系白血病细胞的增殖，其抗慢性髓系白血病的作用与抑制Bcr／Abl、c-Src和Lyn的磷酸化水平直接相关，提示FB2很可能成为新型的治疗Bcr／Abl阳性白血病且克服imatinib耐药的双重靶点药物。

CD34阳性慢性粒细胞白血病细胞生物学特征及其意义

慢性粒细胞白血病是源于骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病。其CD34抗原阳性伴bcr／ ab(?)融合基因阳性的白血病细胞具有独特的生物学特征,并与病情进展及转归相关。清除CD34阳性慢性粒细胞白血病细胞有助于防止疾病复发。本文就其近年来的研究进展作一综述。

STI571治疗BCR/ABL融合基因阳性白血病观察

目的 :观察酪氨酸激酶抑制剂STI5 71在BCR/ABL融合基因阳性表达白血病的治疗效果和副作用。方法 :已确诊BCR/ABL+ 的 8例慢性粒细胞性白血病 (CML)和 1例急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者采用STI5 71+Ara -C治疗。结果 :2例CML -慢性期患者均CR至今 ,6例CML -急粒变患者有 2例CR ,其中 1例CR至今已 3 7周 ,1例ALL在第三次血液学CR后经治疗维持CR2 8周后复发。结论 :STI5 71可诱导BCR/ABL+ 白血病患者完全缓解 ,降低骨髓BCR/ABL+ 白血病细胞 ,延长CR期 ,药物副作用轻微易耐受 。

伊马替尼体外对c-kit阳性急性髓系白血病患者骨髓细胞增殖和凋亡的影响

伊马替尼是一种2-苯胺嘧啶衍生物，除对bcr／abl融合基因阳性的慢性粒细胞白血病（CML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞有明显的作用外，还可以抑制c—kit酪氨酸激酶。在急性髓系白血病（AML）中c-kit被异常磷酸化。我们用不同浓度的伊马替尼对c—kit^＋AML患者骨髓细胞进行体外处理，采用MTT法、RT—PCR法及流式细胞术探讨其对骨髓细胞凋亡的影响，旨在为临床应用伊马替尼治疗AML提供理论依据。

Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病发生Ph染色体阴性急性淋巴细胞白血病变一例

患者，女，17岁。2000年10月因疲乏、反复鼻出血就诊，查体：肝肋缘下3cm，脾肿大：AB线4cm，AC线5cm，DE线5．5cm。血常规检查：WBC179×10^9／L，Hb102g／L，BPC917×10^9／L。骨髓检查结果为慢性粒细胞白血病（CML）慢性期。骨髓荧光原位杂交（FISH）检查示bcr／abl融合基因阳性（95％）。羟基脲诱导缓解后予以IFN—α治疗（300万U皮下注射，隔日1次），其间多次FISH复查bcr／abl融合基因均为阳性（90％～100％）。2005年5月将IFN—α剂量增加至600万U（隔日1次），因白细胞降低（1×10^9／L）而停用3个月，

去磷酸化抑制CHEK1可破坏S期限制点并诱导CML细胞凋亡

目的:探讨细胞周期检测点激酶1(checkpoint kinase 1,CHEK1)参与拮抗慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)细胞凋亡的分子机制。方法:通过GEO(Gene Expression Omnibus)数据库内置的R语言程序进行CML细胞的基因表达数据分析,选取差异表达的靶基因。采用实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测8例CML患者外周血中CHEK1 mRNA和蛋白的表达水平,并分析其与CML病情进展的关系。用针对CHEK1的抑制剂SCH900776抑制CHEK1磷酸化后,采用FCM法检测K562和Ku812细胞周期及凋亡的变化,并用蛋白质印迹法检测下游相关分子的表达水平变化。结果:通过对GEO数据库中3项CML基因表达数据进行分析,得到共同的差异表达基因共21个,其中12个为表达上调,9个为表达下调;选取CHEK1作为研究对象。CML患者外周血中CHEK1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于健康体检者(P值均<0.05),且急变期CHEK1 mRNA表达水平明显高于慢性期(P<0.05)。CHEK1及其磷酸化蛋白的表达水平随病情进展亦有增高的趋势,且在伊马替尼处理后未有明显变化。抑制CHEK1磷酸化可激活caspase-3,并显著诱导K562和Ku812细胞凋亡(P值均<0.01)。抑制CHEK1磷酸化后,S期细胞减少,G2/M期细胞增多,S期相关蛋白细胞周期蛋白E(cyclin E)表达水平下调,而DNA损伤标志物γ-H2XA 表达水平升高,同时p53家族成员中p53和p73的表达均明显上调(P值均<0.05)。结论:CHEK1去磷酸化失活可逆转细胞S期阻滞,破环DNA损伤修复,进而导致P73升高,诱导细胞凋亡。