血清Beclin1水平与糖尿病病人颈动脉粥样硬化和颈动脉内中膜厚度的相关性

目的探讨血清自噬相关蛋白Beclin1水平与糖尿病病人颈动脉粥样硬化和颈动脉内中膜厚度(CIMT)的相关性。方法前瞻性选取2017年3月至2020年12月于济南市妇幼保健院就诊的126例糖尿病病人为研究对象,就诊时测量病人血清Beclin1水平及CIMT水平,记录病人颈动脉粥样硬化情况,并根据病人血清Beclin1水平的中位数分为高水平组和低水平组;分析血清Beclin1水平与糖尿病颈动脉粥样硬化和CIMT水平的相关性;采用逐步回归评估CIMT的独立危险因子,构建受试者操作特征曲线以确定灵敏度和特异度。结果血清Beclin1水平的中位数为2.16μg/L,根据病人血清Beclin1水平的中位数分为高水平组和低水平组,每组63例。高水平组病人空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白、CTMT[(5.89±0.95)mm比(7.46±1.10)mm]、颈动脉粥样硬化发生率[17.46%(11/63)比33.33%(21/63)]均低于低水平组,高密度脂蛋白高于低水平组(P<0.05);Pearson相关分析法分析显示血清Beclin1水平与糖尿病颈动脉粥样硬化和CIMT水平呈负相关(r=-0.42,P<0.001;r=-0.54,P<0.001),并与三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白也呈负相关(r=-0.42,P<0.001;r=-0.34,P<0.001;r=-0.52,P<0.001),与空腹血糖、糖化血红蛋白水平呈弱负相关(r=-0.31,P<0.001;r=-0.25,P=0.005);与高密度脂蛋白呈正相关(r=0.38,P<0.001);logistic回归分析显示血清Beclin1水平升高(OR=0.32)是CIMT>5 mm的独立保护因素,最佳截断值为2.35μg/L,曲线下面积为0.88,灵敏度和特异度分别为98.00%、70.00%。结论血清Beclin1水平与糖尿病病人颈动脉粥样硬化和CIMT水平呈负相关,CIMT>5 mm的最佳血清Beclin1截断值为2.35μg/L。

外周血HMGB1Beclin1表达对多发性硬化急性发作期的诊断价值

目的探究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Beclin1表达对急性发作期多发性硬化(MS)的诊断价值,分析其表达与病情严重程度的相关性。方法回顾性选取2020-01—2022-12邯郸市中心医院收治的86例急性发作期MS患者为研究组,根据Kurtzke扩展残疾状态评估量表(EDSS)对患者病情进行评估,选取同期健康体检者95例为对照组,收集2组患者一般资料,采集外周血以酶联免疫吸附法进行HMGB1和Beclin1检测,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HMGB1和Beclin1表达对急性发作期MS的诊断价值,同时采用Pearson相关性分析其表达水平与疾病严重程度的关系。结果2组患者性别、年龄、体重指数(BMI)、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞数量差异均无统计学意义(P>0.05),研究组患者白细胞和中性粒细胞均多于对照组(P<0.05)。研究组患者外周血中HMGB1表达水平高于对照组,Beclin1表达水平低于对照组(P<0.05)。经ROC曲线分析,HMGB1和Beclin1诊断急性发作期MS的AUC分别为0.798和0.809,两者联合预测效能最高,灵敏度和特异度分别为78.7%、93.7%。研究组患者EDSS评分为(3.38±1.02)分,随着EDSS评分的上升,HMGB1表达水平上升,Beclin1表达水平下降。经Pearson相关分析,急性发作期MS患者EDSS评分与HMGB1表达呈正相关,与Beclin1表达呈负相关(P<0.05)。结论HMGB1和Beclin1表达对急性发作期MS具有一定的诊断价值,两者联合诊断效能最佳,患者病情严重程度与HMGB1表达水平呈正相关,与Beclin1呈负相关。

子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性分析

目的分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Beclin1关联X蛋白(Bax)及周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月在联勤保障部队第九〇〇医院就诊的42例子宫内膜癌患者作为恶性组,58例癌前病变患者作为良性组。两组患者均给予超声造影成像检查并测定造影剂平均渡越时间(MMT)、达峰时间(TTP)及峰值强度(Peak),均进行子宫切除术并采集病灶组织,检测Beclin1、Bax、CDK4及周期素依赖性激酶6(CDK6)表达水平。采用Pearson相关分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性。结果恶性组病灶Peak高于良性组,MMT长于良性组,TTP短于良性组,Beclin1、Bax表达水平低于良性组,CDK4、CDK6表达水平高于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者病灶Peak高于Ⅰ~Ⅱ期患者,MMT长于Ⅰ~Ⅱ期患者,TTP短于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者病灶组织Beclin1、Bax表达水平低于Ⅰ~Ⅱ期患者,CDK4、CDK6表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,子宫内膜癌病灶Peak、MTT与CDK4及CDK6表达水平呈正相关(P<0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈负相关(P<0.05),TTP与病灶组织CDK4及CDK6表达水平呈负相关(P<0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈正相关(P<0.05)。结论子宫内膜癌患者MTT长于癌前病变患者,以及Peak、CDK4、CDK6表达水平均高于癌前病变患者,子宫内膜癌患者病灶超声造影参数MTT、TTP及Peak与Beclin1、Bax及CDK4表达水平相关,超声造影检查有助于辅助临床判断子宫内膜癌患者细胞凋亡相关蛋白表达情况。

有氧运动通过AMPK/ULK1/Beclin1通路调节模拟失重导致的心脏功能变化的研究

目的探讨模拟航天飞行失重引起心肌损伤以及有氧运动干预促进大鼠心肌恢复的可能机制。方法8周龄雄性SD大鼠40只,体重180~210 g,随机分为对照组和实验组,对照组随机分为对照组C1和对照组C2,实验组随机分为悬吊组T1、有氧运动组A和自然恢复组R,每组8只;采用电子天平称量大鼠体重相关指标;采用超声心动图和离体心脏灌流检测各组大鼠心脏功能指标;采用Western Blot法检测各组大鼠心肌组织中AMPK/ULK1/Beclin1通路相关蛋白的表达。结果(1)相较于对照组C1,悬吊组T1体重无显著性差异(P>0.05),比目鱼肌的湿重、比目鱼肌湿重体重比和心脏重量均显著下降(P<0.01)。(2)尾部悬吊4周和有氧运动4周后,心脏功能相关指标发生显著性变化,悬吊组T1AMPK和p-ULK1的表达水平显著上升(P<0.01),p-AMPK的表达量显著上升(P<0.05)。有氧运动4周后,相较于对照组C2,自然恢复组R的AMPK和ULK1的表达量显著上升(P<0.05);有氧运动组A的p-AMPK的表达量显著下降(P<0.05),p-ULK1的表达量显著下降(P<0.01)。相较于自然恢复组R,对照组C2的心肌蛋白AMPK的表达量显著下降(P<0.05),ULK1的表达量显著下降(P<0.01);有氧运动组A的AMPK、ULK1的表达量显著下降(P<0.01);p-ULK1的表达量显著下降(P<0.05)。结论(1)尾部悬吊4周后,发现大鼠的比目鱼肌湿重、以及湿重体重比显著降低,心脏的重量和心脏功能相关指标也显著降低,AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1、Beclin1表达量上升;(2)有氧运动4周后,发现尾部悬吊大鼠的心肌形态,心肌超微结构和心脏功能相关指标上升,心脏功能得到一定的改善,AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1、Beclin1表达量下降;(3)心脏功能的损伤和改善与通过AMPK/ULK1/Beclin1通路调控相关蛋白AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1、Beclin1表达有关。

三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响

目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃,经腹主动脉采血制备含药血清。体外培养AGS细胞,设置空白对照组(空白组)、三物白散低剂量含药血清组(低剂量组)、三物白散中剂量含药血清组(中剂量组)、三物白散高剂量含药血清组(高剂量组)。采用CCK-8法检测不同浓度(5%、10%、15%、20%)三物白散含药血清对AGS细胞活性的影响;倒置显微镜下观察三物白散含药血清对AGS细胞形态的影响;RT-qPCR法检测Beclin1 mRNA、LC3 mRNA、p62 mRNA表达;Western blotting法检测Beclin1、LC3、p62蛋白表达。结果:与空白组比较,5%、10%、15%、20%三物白散高剂量含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制AGS细胞活性;随着含药血清浓度升高,细胞形态逐渐不规则,细胞数量逐渐减少;中、高剂量组Beclin1 mRNA、LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量均高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01);低剂量组LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01)。高剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均高于空白组,p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01);中剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于空白组(P<0.05或P<0.01),p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01)。结论:三物白散对胃癌细胞的增殖有抑制作用,上调Beclin1、LC3表达、下调p62的表达、诱导胃癌细胞自噬可能是其抗胃癌作用机制之一。

血Beclin1、SFRP5、ACTH和皮质醇水平在糖尿病肾脏疾病中的变化及与蛋白尿的相关性

糖尿病是临床常见的慢性疾病,可引起酮症酸中毒、高渗性昏迷等代谢紊乱综合征[1]。调查显示,糖尿病人群发病率达12.2%,是威胁全球人类健康的三大疾病之一[2]。糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病患者主要的并发症之一,长期血糖升高会加重肾脏对葡萄糖代谢负荷,使肾小球灌注异常升高,从而损伤肾脏滤过组织,出现蛋白尿和肾功能下降等表现[3]。

过表达Beclin1基因对横纹肌肉瘤RD细胞生物学行为的影响

目的 本研究旨在探究Beclin1基因调控横纹肌肉瘤RD细胞的机制。方法 通过转染技术使Beclin1基因在RD细胞中过表达,将其分为实验组和阴性对照组。运用RT-qPCR及Western Blot分别从mRNA水平和蛋白水平检测Beclin1基因在RD细胞中的表达情况。采用CCK-8实验、细胞划痕愈合实验、Transwell实验以及TUNEL实验分别检测转染前后细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况。结果 实验组Beclin1基因的mRNA表达量为(4.06±0.46),显著高于阴性对照组(P=0.008,P<0.01),蛋白表达量为(1.84±0.30),显著高于阴性对照组(P=0.032,P<0.05);根据吸光度值绘制出实验组和阴性对照组的生长曲线,实验组细胞生长水平显著低于阴性对照组(P<0.05);实验组细胞迁移能力明显弱于阴性对照组(P<0.01),侵袭能力显著弱于阴性对照组(P<0.01),细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P<0.01)。结论 自噬调节基因Beclin1过表达可显著促进RD细胞凋亡,抑制RD细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

Bcl-2/Beclin1复合物对细胞凋亡与自噬的调节作用

细胞凋亡(apoptosis)和细胞自噬(autophagy)是细胞自我销毁的两种主要机制。凋亡,又称为I型程序性细胞死亡,表现为细胞皱缩、染色质浓缩、D NA降解和片段化,细胞分裂成凋亡小体,随后被吞噬细胞吞噬、降解[1]。自噬,又称为Ⅱ型程序性死亡,是一个高度保守的细胞内进化过程。具有双层膜结构的自噬体包裹长寿蛋白和受损细胞器,并与溶酶体融合,通过溶酶体途径移除,在溶解长寿蛋白和受损细胞器的过程中释放能量,从而为细胞供能[2-3]。

微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

背景与目的:有研究表明自噬活性的改变与肿瘤的发生、发展有关。诱导自噬性细胞死亡已经成为杀死肿瘤细胞的新策略。本研究检测微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在不同卵巢肿瘤组织中的表达情况,探讨其与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性及意义。方法:用免疫组化法检测25例良性卵巢肿瘤、25例交界性卵巢肿瘤及75例上皮性卵巢癌组织的LC3和Beclin1表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:良性肿瘤组LC3和Beclin1的阳性率(100%、100%)和交界性卵巢肿瘤组LC3和Beclin1的阳性率(96%、84%)都明显高于上皮性卵巢癌组(57%、57%),且差异具有统计学意义(P均<0.001)。LC3在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期和肿瘤分化程度相关(P=0.017;0.001)。Beclin1表达与上皮性卵巢癌患者FIGO分期相关(P=0.04)。LC3和Beclin1在卵巢上皮癌中的表达无相关性(P=0.875)。结论:LC3和Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与上皮性卵巢癌的发生、发展相关。

自噬基因Beclin1与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性研究

背景与目的:有研究表明自噬的抑制与肿瘤的发生有关,沉默自噬基因Beclin1可导致多种恶性肿瘤的发生。本研究探讨Beclin1基因在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用,并分析其过表达对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法:用免疫组化检测25例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤、19例交界性上皮性卵巢肿瘤及69例上皮性卵巢癌组织的Beclin1表达;构建真核表达载体pcDNA3.1/Beclin1,脂质体法分别将质粒pcDNA3.1/Beclin1、pcDNA3.1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,并用流式细胞仪检测凋亡情况。结果:正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织中Beclin1表达的积分光密度(integrated optical density,IOD)值均较高,两者之间的差异无显著性(P>0.05);交界性卵巢肿瘤组织中Beclin1的表达降低,而在上皮性卵巢癌中Beclin1表达的IOD值最低,与正常卵巢组织比较差异有显著性(P<0.05)。pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后细胞生长抑制率为(68.75±5.10)%,而pcDNA3.1转染组为(10.91±4.20)%,两者之间差异有显著性(P<0.05)。pcDNA3.1/Beclin1转染后72h SKOV3细胞的凋亡率为19.07%,高于pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P<0.05)。结论:Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达下调,可能与上皮性卵巢癌的发生、发展有关;自噬基因Beclin1的过表达可抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖,并诱导其凋亡。

自噬相关基因Beclin1和MAPLC3在肺癌组织中的表达及其意义

背景与目的:研究发现自噬相关基因表达的下调与肿瘤的发生关系密切。本研究检测人非小细胞肺癌标本中自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein1light chain3,MAPLC3)的表达,并探讨其意义。方法:采用免疫荧光染色、逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot方法检测肺癌组织、癌旁组织和非癌组织中Beclin1、MAPLC3mRNA和蛋白的表达。结果:免疫荧光染色显示Beclin1在肺癌组织中表达较低,阳性率为8.3%,而在癌旁组织和非癌组织阳性率均为100%(χ2=199.40,P<0.01);MAPLC3在肺癌组织中阳性率为13.9%,而在癌旁组织和非癌组织中阳性率均为100%(χ2=182.75,P<0.01)。Beclin1mRNA在肺癌组织中的相对表达量为1.30±0.44,与在癌旁组织(1.69±0.59)及非癌组织(1.67±0.48)中的相对表达量比较差异有统计学意义(F=6.6,P<0.01);MAPLC3mRNA在肺癌组织中相对表达量为4.55±1.23,与在癌旁组织(6.73±1.31)及非癌组织(6.90±1.87)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=14.1,P<0.01)。Westernblot检测Beclin1蛋白在肺癌组织中的相对表达量为3.49±0.72,与癌旁组织(5.31±1.16)和非癌组织(6.33±1.58)中的相对表达量比较差异有统计学意义(F=9.73,P<0.01);MAPLC3蛋白在肺癌组织中的相对表达量为2.43±0.35,与癌旁组织(3.12±0.73)和非癌组织(3.41±0.90)中的相对表达量比较差异也有统计学意义(F=3.22,P=0.04)。结论:自噬相关基因在肺癌组织中表达下调,这可能与肺癌的发生、发展相关。

Beclin1与自噬及肿瘤的关系

细胞自噬控制着细胞内蛋白质和细胞器的降解,对于细胞生长及维持稳态发挥着重要作用。自噬的调节是一个复杂过程,这其中涉及到许多分子的调控。Beclin1是酵母自噬基因Atg6/Vps30的同系物,也是哺乳动物参与自噬的特异性基因,它通过对自噬的调节,在肿瘤的发生、发展中起着重要作用。Beclin1对自噬和肿瘤的调节不是孤立的,相反,它能与多种分子相互作用,形成不同复合体而发挥作用。越来越多的研究不断揭示出Beclin1新的作用机制,本文将对Beclin1的研究进展做一综述。

Beclin1表达在胃癌发生和演进中的临床病理意义及作用机制

目的阐明胃癌发生和演进过程中Beclin 1表达的临床病理意义和分子作用机制。方法胃癌细胞MKN28转染Beclin 1表达质粒,利用CCK-8试剂盒和碘化丙啶染色检测细胞增殖和周期。利用原位杂交和免疫组化检测组织芯片上胃癌、癌旁黏膜和淋巴结转移灶中Beclin 1 m RNA和蛋白的表达,比较其与胃癌发生、临床病理特征和预后的关系。结果 Beclin 1过表达可以抑制胃癌细胞MKN28增殖并导致细胞周期G2期阻滞,胃癌中Beclin 1 m RNA表达高于癌旁黏膜(P<0.05),Beclin 1蛋白表达与胃癌远处转移呈负相关(P<0.05),Beclin 1表达病例多见于老年男性(P<0.05),弥漫型胃癌中Beclin 1表达低于肠型和混合型(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,Beclin 1表达与胃癌良好预后呈正相关(P<0.05)。结论 Beclin 1表达与胃癌发生、转移和分化关系密切,可以作为胃癌患者的预后因素和基因治疗的靶标。

沉默beclin1基因对缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞凋亡的影响

目的探讨beclin1基因对缺氧缺糖/复氧复糖小鼠海马神经元细胞系HT22细胞凋亡的影响。方法取对数生长期的HT22细胞,随机分为4组:正常组(normal)、缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)模型组(model)、beclin1基因沉默组(beclin1^-/-)、转染对照组(control)。除normal组外,其余各组细胞均在缺氧缺糖6 h后进行复氧复糖。利用RNAi技术,针对小鼠c DNA序列设计beclin1干扰序列,用脂质体Lipo2000包裹后转染至HT22细胞。于转染48 h后用荧光显微镜观察转染效率,Western blotting检测细胞beclin1表达情况。各组细胞均于复氧复糖24 h后采用CCK-8法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤情况,免疫荧光染色检测Bax、Bcl-2表达及比值变化,Western blotting检测LC3、P62及Caspase-3表达。SPSS 19. 0统计学软件进行数据分析。结果与normal组相比,model组细胞活力及P62蛋白表达显著降低(P<0. 01),乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Caspase-3表达及Bax/Bcl-2均显著升高(P<0. 01)。与model组相比,beclin1^-/-组细胞活力及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著降低(P<0. 01),LDH漏出率、Bax/Bcl-2及P62、Caspase-3表达显著升高(P<0. 01);control组与model组比较差异无显著性。结论沉默beclin1抑制细胞自噬可使缺氧缺糖/复氧复糖处理的HT22细胞损伤加重,细胞凋亡进一步增加。

自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测64例胰腺癌组织及相应癌旁正常组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62的表达情况;分析自噬蛋白表达水平与胰腺癌临床病理特征的关系.结果:免疫组织化学法检测提示Beclin1蛋白在胰腺癌组织及癌旁正常组织中阳性表达率分别为28.1%(18/64)、90.6%(58/64),LC3蛋白阳性表达率分别为34.4%(22/64)、75%(48/64)P 6 2蛋白表达阳性率分别为7 5%(4 8/6 4)、4 6.9%(3 0/6 4),均P<0.0 5;胰腺癌组织中Beclin1与LC3的表达水平呈正相关(r=0.572P<0.05),Beclin1、LC3的表达与肿瘤分化、TNM分期相关(P<0.05),Beclin1、LC3和P62的表达均与性别、年龄、有无门脉浸润、淋巴结转移无明显相关(P>0.05).结论:自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在胰腺癌组织中的异常表达及Beclin 1与LC3两者表达呈正相关提示自噬活动下降可能参与了进展期胰腺癌的发展.

大肠癌中Beclin1、LC3和mTOR的表达及意义

目的探讨Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达及意义。方法采用免疫组化En Vision法、Western blot和RT-PCR技术检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的阳性率分别为90.50%、87.19%和46.28%,均明显高于癌旁组织(P<0.05),且LC3蛋白在中+低分化大肠癌中的表达(91.34%、89.58%)高于高分化大肠癌(77.61%),在有淋巴结转移组的表达(95.41%)高于无淋巴结转移组(80.45%),m TOR在有淋巴结转移组的表达(57.80%)高于无淋巴结转移组(35.33%)(P<0.05),Beclin1过表达与大肠癌分化程度和淋巴结转移均无关(P>0.05)。LC3与Beclin1在大肠癌中表达呈正相关(rs=0.593,P<0.01),与m TOR表达呈负相关(rs=-0.165,P<0.01),Beclin1和m TOR表达之间无明显相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Beclin1和LC3均阳性、m TOR阴性、无淋巴结转移的大肠癌患者5年生存率高于Beclin1和LC3均阴性、m TOR阳性及有淋巴结转移的患者。多因素分析显示,LC3、m TOR和淋巴结转移是影响大肠癌预后的独立因素。RT-PCR和Western blot检测结果显示:Beclin1、LC3和m TOR mRNA和蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论自噬相关基因Beclin1、LC3和m TOR的异常表达可能与大肠癌的发生、发展及预后相关;联合检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达有助于评估进展程度和预后判断。

Beclin1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的检测人非小细胞肺癌标本中自噬相关基因Beclin1的表达并讨论其意义及与细胞病理类型和临床分期的关系。方法采用免疫荧光染色、RT-PCR和Western blot法检测54例非小细胞肺癌的肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织Beclin1蛋白、mRNA表达。结果免疫荧光染色显示Beclin在肺癌组织中表达较低,表达率为8.3%,显著低于癌旁和正常组织(P=0.00)。Beclin1 mRNA在肺癌、癌旁及正常组织中的相对表达量为1.302±0.074、1.691±0.100、1.673±0.081(F=6.6,P=0.002),Western blot检测Beclin1蛋白在肺癌、癌旁、正常组织中的相对表达量分别为3.489±0.293、5.306±0.459、6.329±0.580(F=9.73,P<0.01)。Beclin1蛋白和mRNA表达与肺癌病理组织类型和临床分期无明显关系。结论Beclin1蛋白和mRNA表达在肺癌组织中明显低于癌旁和正常组织,表达量的差异有统计学意义,在癌旁和正常肺组织中表达接近。

非小细胞肺癌中p-mTOR、Beclin1及LC3蛋白的表达及意义

目的检测自噬相关蛋白磷酸化的雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)在非小细胞肺癌及正常肺组织中表达水平,探讨细胞自噬在肺癌演变中的作用机制。方法应用免疫组织化学法测定96例非小细胞肺癌、64例正常肺泡、60例正常支气管断端黏膜组织p-mTOR、Beclin1及LC3蛋白表达水平,分析其表达差异与临床病理特征相关性。结果 Beclin1、LC3蛋白在非小细胞肺癌中表达下降,二者表达水平呈正相关,p-mTOR蛋白表达升高。随肿瘤增大、分化程度下降及淋巴结转移,Beclin1蛋白表达下降。随肿瘤分化程度下降及淋巴结转移,LC3蛋白表达下降。随肿瘤分化程度下降及淋巴结转移,p-mTOR蛋白表达升高。p-mTOR与Beclin1、LC3表达均呈负相关。结论自噬在非小细胞肺癌发病中起重要作用,自噬相关蛋白Beclin1、LC3起协同抑癌作用,p-mTOR蛋白促进非小细胞肺癌发生、发展。

α-硫辛酸对糖尿病肾病自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1表达的影响

目的:研究α-硫辛酸对糖尿病肾病(DN)自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1表达的影响。方法:2型糖尿病肾病Ⅲ期患者110例,其中55例常规治疗为对照组,55例患者在常规治疗的基础上加用硫辛酸治疗为研究组;建立DN模型大鼠,对比硫辛酸治疗的DN患者和DN模型组大鼠Scr、BUN水平和肾脏组织中LC3、Rab7和Beclin1的表达的影响。结果:治疗后两组患者Scr和BUN均显著降低(P<0.05),且研究组患者治疗后Scr和BUN均显著低于对照组患者(P<0.05),肾脏组织中LC3、Rab7和Beclin1蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05);DN模型大鼠经硫辛酸治疗后,Scr和BUN均显著降低(P<0.05),肾脏组织中LC3、Rab7和Beclin1基因表达显著升高(P<0.05)。结论:α-硫辛酸对糖尿病肾病肾脏的保护作用可能通过促进肾脏中自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1的表达有关。

丹参酮ⅡA对ox-LDL诱导血管内皮细胞自噬效应蛋白Beclin1表达的影响

目的氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-densitylipoprotein,ox-LDL)可诱导血管内皮细胞发生自噬,造成血管内皮损伤,从而导致动脉粥样硬化的发生。该研究拟探讨丹参酮ⅡA对ox-LDL诱导的血管内皮细胞自噬效应蛋白Beclin1表达的影响。方法 (1)运用不同浓度ox-LDL处理人脐静脉血管内皮细胞HUVECs,MDC染色、流式细胞仪检测ox-LDL对HUVECs自噬水平的影响,采用免疫印迹技术检测自噬标记蛋白Beclin1表达;(2)ox-LDL处理后,运用不同浓度丹参酮ⅡA干预,MDC染色、流式细胞仪HUVECs自噬水平变化,免疫印迹检测Beclin1蛋白水平变化。结果 ox-LDL能诱导HUVECs发生自噬,丹参酮ⅡA能抑制ox-LDL诱导的HUVECs自噬效应蛋白Beclin1表达。结论丹参酮ⅡA通过抑制ox-LDL诱导的HUVECs自噬,从而对ox-LDL所致的HUVECs损伤起保护作用。