甜菜花叶病毒新疆分离物的特性鉴定

1985年从新疆石河子地区糖用甜菜上分离到一个病毒分离物,样品代号85-04。生物测定证明其寄主范围主要限于藜科。可系统侵染甜菜、菠菜引起系统退绿斑驳花叶;系统侵染苋色藜、昆诺阿藜和番杏,引起黄褐色坏死斑。病毒的体外热钝化温度为55～66℃。体外存活期1～2天,稀释限点1/4000。可由桃蚜等多种蚜虫进行非持久性传播。用PEG沉淀,硫酸铯平衡密度梯度离心,可获得较纯的病毒。病毒形态为线状,长约730nm,直径13nm。病叶的超薄切片中可见到大量的风轮状,旋涡状和束状内含体。用纯化的病毒制备出效价为32的抗血清,能与甜菜花叶病毒产生明显的沉淀线。由以上研究结果证实85-04分离物是甜菜花叶病毒(Beet Mosaic Virus,BtMV)。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测出该病毒的外壳蛋白有两条区带、分子量分别为35075和25118道尔顿,前者为单一亚基病毒外壳蛋白,该蛋白由17种氨基酸组成(由于色氨酸在水解过程中被破坏,未能测定)25k区带为降解产物。

芜菁花叶病毒提纯技术的研究

将繁殖于大白菜上的病叶榨汁,结合聚乙二醇(PEG)沉淀及差速离心技术,拟定三种提纯程序,所得芜菁花叶病毒(TuMV)粗提纯物,可侵染芜菁、萝卜和大白菜,并在苋色藜和普通烟黄茵榆上产生局部枯斑。测定提纯物表现出典型的核蛋白紫外吸收光谱,在电镜观察下,其丝状病毒粒子形态清晰且排列疏松均匀、病毒粒子长度集中分布在730nm、宽12～13nm。用水醋酸分解、可获得本病毒的提纯的衣壳蛋白,它具有典型蛋白质紫外吸收光谱,上述三种提纯程序中,以第三种程序最佳。初步认为,若设备不足情况下省用蔗糖密度梯度离心步骤,仅用第三种提纯程序,亦可获得较好提纯效果。