丽格海棠组织培养外植体再生体系建立关键技术的研究

以丽格海棠的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养,着重研究丽格海棠的最佳外植体,最佳培养基配方及接种模式的关键技术。研究表明初代培养基本培养基为MS,激素配比为6-BA0 5mg/L+NAA0 1mg/L,培养30d可获得较多的不定芽。外植体分化能力的研究表明丽格海棠的不同类型外植体能力大小为:叶>茎>花茎>叶柄;从叶片的不同部位来看,叶中>叶侧>叶边缘;从不同叶龄来看,中等成熟叶>幼叶>完全成熟叶>芽叶。叶片的接种模式:反放比正放好。

EMS对丽格海棠离体诱变的生物学效应

将不同浓度EMS处理的丽格海棠叶片作为外植体进行离体再生,以期获得性状优异的变异材料。结果表明:随EMS浓度的增加,其诱导率和增殖倍数降低,而变异率增加,0.4%(20℃,8h)EMS为丽格海棠叶片外植体再生的半抑制剂量,该浓度为诱变处理的适合浓度。对21株表型变异植株进行RAPD-PCR分析表明,有12株的电泳条带表现出多态性,进一步证明这些变异是由于基因组DNA的变异而引起的。

丽格海棠无土栽培基质的优化筛选

以丽格海棠(Begoniaelatior)为试材,泥炭、蛭石、珍珠岩、炉渣为栽培基质材料,按不同比例混合,选用Hoagland-Arnon全营养液浇灌,进行无土栽培试验。试验以土壤栽培为对照,分析比较了6种基质配方对丽格海棠生长及开花的影响。结果表明:丽格海棠无土栽培基质以处理T4:泥炭+蛭石+珍珠岩(2∶1∶1)为最佳,其次为处理T1:泥炭+蛭石(1∶1)。

丽格海棠的组织培养

由于丽格海棠通过扦插获得的量有限 ,进口种子的价格又很昂贵 ,所以以它的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体 ,进行组织培养来快速获得丽格海棠。通过诱导芽分化和诱导愈伤两种途径 ,研究不同植物生长调节剂及浓度 ,对外植体萌发和生根的影响。研究表明基本培养基为MS ,最佳分化培养基为 6 -BA 1.0 0mg L +NAA 0 .10mg L ;最佳生根培养基为 1 2MS +NAA 0 .10mg L ;花土∶沙子 =1∶1,是丽格海棠最佳的驯化移栽基质 ,在该基质中生根苗移栽成活率达 90 %

丽格海棠细菌性叶斑病病原菌鉴定

2011年在云南石林丽格海棠上发现一种由细菌侵染引起的新病害,称为丽格海棠细菌性叶斑病.该病主要危害叶片,症状为叶片边缘形成倒V字型坏死和起皱.从病叶上分离到14株细菌菌株,菌株接种于不同丽格海棠品种上,发病症状与田间自然症状一致,采用柯赫氏法则重新分离得到此病的病原细菌.经培养性状、菌落形态观察、生理生化特性分析(Biolog系统)和16SrDNA序列分析以及病原菌的寄主范围测定,确定该病原菌为野油菜黄单胞菌秋海棠致病变种Xanthomonas campestris pv.begoniae.这是中国关于Xcb侵染丽格海棠的首次报道.

丽格海棠再生体系建立的研究

对丽格海棠幼嫩叶片和叶柄离体培养与植株再生过程进行了研究，建立了丽格海棠的再生体系。该体系是以1cm^2左右带叶脉的幼嫩叶切片为外植体；丛生芽诱导培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L或Ms＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋4％芦荟原汁，接种培养30-40d；丛生芽继代培齐基为Ms＋6-BA 0．05mg／L＋NAA 0．1mg/L，培养时间20d；生根培养基为1／2MS＋IBA 0．5mg／L，培养时间30d。该体系的建立对丽格海棠种苗快速繁殖和规模化生产将有着重要的指导意义。

外植体和激素对丽格海棠组培不定芽分化的影响

以丽格海棠的茎段、叶片及叶柄为外植体,通过培养直接诱导不定芽的形成,研究了外植体类型及外植体前处理,生长素、细胞分裂素类型及其配比对不定芽分化的影响。结果表明:丽格海棠中度成熟茎段经4℃冷藏处理后离体培养,死亡率低、分化出芽快、分化率高;叶片及叶柄分化所需时间长、无效芽数多;NAA和6-BA诱导不定芽分化效果好,且6-BA0 75mg/L+NAA0 1mg/L配比中不定芽分化率最高。

丽格海棠组织培养技术的研究

采用丽格海棠中度成熟叶片为外植体进行丛生芽诱导,并进行扩繁培养和诱导生根,以期筛选适宜的丽格海棠组织培养的培养基配方,并建立其组织培养技术体系。结果表明:较好外植体诱导丛生芽培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,扩繁培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.3mg/L。

丽格海棠离体培养植株再生关键技术的研究

以丽格海棠叶片、叶柄和花茎为试材进行培养.研究了不同浓度的NAA和6-BA对叶片不定芽的诱导作用,同时研究了不同类型的外植体,叶片的不同部位对不定芽的诱导影响,结果表明:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.2-0.5 mg/L有利于不定芽的诱导.叶片再生不定芽的能力最强,而叶片中以叶中和叶侧的再生效果最好.1/2MS+NAA 1.0 mg/L有利于不定根的诱导.

丽格海棠组培快繁技术体系的建立及优化

对丽格海棠离体快繁的关键技术作了进一步的优化,利用种子萌发的无菌幼苗,建立了丽格海棠的快繁技术体系,主要结果有:1/2MS+3%蔗糖的培养基是丽格海棠种子萌发的最适培养基,萌发率达72.7%。16种不定芽发生的培养基中,MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L最有利于幼叶不定芽的分化,不定芽数达10.6个/外植体;9种不定芽增殖培养基中,MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L效果最优,诱导出的芽数多,增殖系数达6.8倍,且小苗健壮。在MS+IBA0.2 mg/L+1.5%蔗糖为最佳生根培养基,根粗而壮。炼苗移栽后易成活,成活率达90%以上,上盆移栽后,3个月植株开出艳丽的花朵。

丽格海棠高效再生体系的建立及对抗生素敏感性研究

以丽格海棠叶片和叶柄为外植体,通过离体培养分化成苗以及对卡那霉素和头孢霉素的敏感性实验,建立了农杆菌介导的稳定、高效的基因转化受体系统。结果表明:丽格海棠的最适生芽培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L+KT 0.1 mg/L,不定芽的最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.15 mg/L;75 mg/L卡那霉素可以完全抑制叶柄的生芽,100 mg/L卡那霉素可以完全抑制叶片的生芽,75 mg/L卡那霉素完全抑制不定芽的生根,头孢霉素浓度小于等于250 mg/L时对生芽和生根的影响不大。

丽格海棠的组织培养与快速繁殖

从培养条件、生长分化、试管苗生根、炼苗、移栽等方面进行了对丽格海棠的组织培养研究,并对其组培快繁的意义进行了探讨。

丽格海棠‘宣言’离体再生因素的优化

丽格海棠再生分化受到多种因子的影响,通过对丽格海棠离体再生影响因素的优化试验表明:以叶片为外植体,MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1最利于海棠的不定芽诱导;不定芽增殖分化的培养基为MS+1/2MS(Trace element)+6-BA 1.5 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1+Sucrose 30 g.L-1;生根壮苗培养基为1/2MS+IAA 0.1 mg.L-1。

丽格海棠再生体系的建立

[目的]研究丽格海棠组织培养再生植株的最佳培养基配方条件,为其快速繁殖提供技术参考。[方法]以丽格海棠幼嫩叶片为外植体,对其进行诱导、增殖和生根培养,确定其再生体系。[结果]以1 cm2左右带叶脉的幼嫩叶片为外植体,诱导愈伤和丛生芽的培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.50 mg/L+4%芦荟原汁,诱导率分别为94.44%和66.67%;生根培养基为1/2MS+NAA 0.10 mg/L,生根率为100%。[结论]该研究建立了丽格海棠离体再生体系。

培养及接种方式对丽格海棠组培快繁的影响

以丽格海棠叶片为外植体,研究不同接种模式和培养方式对丽格海棠组培快繁的影响.结果表明:丽格海棠叶片诱导分化培养时,叶片反放的接种模式优于叶片正放;丽格海棠丛生芽增殖培养时,液体培养,尤其是丛生芽前期增殖时采用液体旋转培养效果优于固体培养.此结果对丽格海棠组培快繁具有一定的指导意义.

丽格海棠无土栽培营养液配方的筛选

通过丽格海棠的无土栽培,比较了5种营养液配方的作用效果.试验结果表明:不同营养液配方处理对丽格海棠植株生长发育的影响不同,综合考虑各营养液处理对丽格海棠生长发育各项指标的影响,认为处理T2(霍格兰和施奈德配方)是最佳营养液配方.

丽格海棠叶片的组织培养研究

取丽格海棠叶片作外植体,通过试验,分析不同激素配比对芽的诱导、增殖及生根的影响,筛选出丽格海棠叶片组织培养的适宜培养基及试管苗最佳移栽基质。结果表明:其最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.8 mg/L,不定芽诱导率达100%;最佳继代培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,增殖倍数达6.5倍;最佳生根培养基是1/2 MS+NAA 0.4 mg/L,生根率达100%;试管苗最佳移栽基质为用1/2MS大量元素浇透的草炭,移栽成活率为85%。

诱导丽格海棠系统抗冷性研究

试验用丽格海棠组培苗的叶片进行低温暗培养诱导出愈伤组织后培养至开花,测定愈伤组织、花序周围叶片电导率及现蕾期逆境培养生理指标,以研究丽格海棠性抗冷性表达。结果表明:5℃低温暗培养诱导有利于愈伤组织产生,愈伤组织5℃低温处理24 h时,电导率为43.53%,对照为52.9%;养至开花,5℃低温处理24 h时,花序周围叶片电导率为10.7%,对照为43.8%;逆境培养,SOD、POD、CAT活性及脯氨酸含量明显高于对照。表明丽格海棠组培苗叶片经过低温暗培养诱导的愈伤组织不但获得耐冷性,而且具有一定的稳定性,可提高植株的耐冷性。

光照条件对丽格海棠不定芽诱导和增殖的影响

[目的]研究光照条件对丽格海棠体外快繁的影响。[方法]用丽格海棠幼嫩叶片作为外植体,给予不同光照条件,观察不定芽的诱导率和增殖率。[结果]在1000lx光照条件下培养14d,后移到2000lx光照条件下培养的不定芽诱导率最高,可达100%;在2000lx的光照条件时,增殖效果最好。[结论]不同光照强度直接影响丽格海棠不定芽的诱导和增殖。

植物激素与芦荟原汁对丽格海棠组培快繁的影响

[目的]研究植物激素和芦荟原汁对丽格海棠丛生芽诱导的影响。[方法]以丽格海棠叶片为外植体,研究了不同浓度的6-BA和NAA和芦荟原汁对丽格海棠丛生芽诱导的影响。[结果]不同浓度的NAA对丽格海棠丛生芽的诱导有明显影响,NAA浓度为0.5 mg/L的诱导效果最好(83.3%),随着NAA浓度的下降,诱导率也随之下降;6-BA不同浓度对丛生芽诱导有一定影响,但影响程度不大,以浓度为0.5 mg/L的诱导效果较好(66.7%);在一定的植物激素浓度下,添加适宜浓度的芦荟原汁对丛生芽的诱导有明显的促进作用,以MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%芦荟原汁和MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+1%芦荟原汁的诱导丛生芽的效果较好,诱导率均为100%。[结论]6-BA和NAA和芦荟原汁以适宜的浓度搭配可缩短丽格海棠的出芽时间,提高丛生芽的诱导率。