射干提取物对慢性咽炎家兔血清中白细胞介素-4和免疫球蛋白E表达的影响

目的观察射干提取物用于慢性咽炎家兔血清中白细胞介素-4(IL-4)和免疫球蛋白E(IgE)指标的变化,以进一步探讨其治疗作用机制。方法应用氨水和松节油直接作用于大耳白家兔咽部黏膜制备慢性咽炎病理模型,以射干提取物进行治疗,观察药物对模型动物血清IL-4和Ig E表达的影响。结果模型组动物血清中的IL-4和Ig E含量显著高于空白组(P<0.05),经射干提取物治疗后血清中IL-4和Ig E水平均较模型组降低。结论射干治疗慢性咽炎药理活性作用可能是通过调节细胞因子的表达而实现的。

射干中异黄酮提取工艺的研究

采用正交试验法研究射干中异黄酮的提取工艺。以射干异黄酮提取率为指标,考察了药材粒径、乙醇浓度、乙醇用量、提取时间及提取次数等5个因素。结果表明,射干提取的最佳工艺为:药材粉碎为4～20目,加入6倍量70％乙醇,回流2次,每次1小时。

基于中医理论及临床验证基础上的射干作用机制研究

目的:以中医理论为指导,依据射干临床应用病种,探讨射干提取物对合胞病毒(RSV)感染豚鼠气道炎症白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、白三烯-4(LTC4)表达的影响。方法:实验分空白组、模型组、给药组,每组10只,除空白组外,其余各组豚鼠在乙醚浅麻后鼻腔滴注100TCID50的RSV悬液100μL(每天滴鼻2次,早晚各1次,空白组给予相同剂量的5%DMEM培养液),连续给药1周。收集肺泡灌洗液(BALF)计数,并测定肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ、LTC4水平变化,HE染色观察肺组织形态学变化。结果:射干提取物的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4、LTC4水平显著下降,与RSV感染模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:射干提取物能明显降低豚鼠模型BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,减轻肺组织炎症。

射干提取物对大鼠长期毒性试验研究

目的:观察射干提取液连续重复给药对实验大鼠的毒性反应,为拟定临床人用安全剂量提供参考。方法:以151.70 g生药/kg、15.17 g生药/kg和1.157 g生药/kg剂量,每日大鼠灌胃给药一次,连续4周,对其进行一般状况观察,血液学、血液生化学检查,系统尸检、主要脏器系数及组织学检查等。结果:与空白对照组比,射干高剂量组动物体质量、摄食量降低,高剂量组大鼠给药4周后红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、网织红细胞百分率、血小板计数比明显降低,凝血酶元升高,停药2周后恢复。高剂量组大鼠给药4周后血清谷草转氨酶、血清钾、血清肌酸激酶、血糖与空白对照组比明显降低,停药2周后,除高剂量组大鼠血清谷草转氨酶、血糖降低外,其余血液生化学指标恢复正常。给药4周后,高剂量组大鼠肝脾脏器指数与空白对照组比明显增大,脾脏器指数与空白对照组比明显减少,对其余脏器指数无明显影响。停药2周后恢复。结论:射干大鼠灌胃给药安全剂量为15.17 g生药/kg以下,约为临床成人拟用量的101倍(成人按60 kg计)。

射干止咳有效成分白射干素提取优化

目的:优化射干抗炎止咳有效成分白射干素的提取工艺。方法:以白射干素含量为指标,采用HPLC-DAD检测,对药材提取过程中提取溶剂、溶剂倍数以及提取时间3个影响因素进行L9(34)正交试验分析,设计优选出射干中白射干素的提取工艺。结果:白射干素最佳提取工艺为加70%乙腈8倍量、8倍量提取2次,每次提取1 h。结论:优选出的提取工艺稳定可行,白射干素提取率高,适于射干药材中白射干素的提取。

浊点萃取结合UPLC-MS/MS法测定气道炎症模型豚鼠灌胃射干提取物后血浆中LTB_4的浓度

目的:建立测定气道炎症豚鼠血浆中白三烯B_4(LTB_4)浓度的方法,考察给予射干提取物后其对豚鼠血浆中LTB_4浓度的影响,为阐明射干提取物抗炎止咳的作用机制提供参考。方法:将30只豚鼠随机分为空白组、模型组和射干提取物组,每组10只。除空白组外,其余2组豚鼠采用烟熏+合胞病毒滴鼻法制造气道炎症模型。造模结束后次日,射干提取物组豚鼠灌胃给药(10mg/kg射干提取物,以野鸢尾黄素计),空白组和模型组豚鼠灌胃等体积生理盐水,每天给药1次,连续给药7 d,末次给药后收集血浆样品。分别考察表面活性剂Triton X-114浓度、盐酸浓度、盐酸加入量、平衡温度和平衡时间对LTB_4提取回收率的影响(以44.5g/L的牛血清白蛋白生理盐水溶液替代空白血浆),确定最优浊点萃取工艺进行生物样品处理。然后以吲哚美辛为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定血浆中LTB_4浓度。色谱条件:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C_(18),流动相为0.2%甲酸水-乙腈(40∶60,V/V),流速为0.4 m L/min,柱温为40℃,进样量为5μL;MS条件:电喷雾离子源,正离子模式下扫描,LTB_4用于定量的离子为[M+H]^+质荷比(m/z)335.219 4→195.099 8,吲哚美辛为[M+H]^+m/z 356.083 6→312.084 2。结果:浊点萃取最优条件为Triton X-114浓度5%,加入0.3 mol/L盐酸50μL调至酸性、平衡温度50℃,平衡时间20 min。在该含量测定条件下方法学验证结果均符合相关要求。与空白组比较,模型组豚鼠血浆中LTB_4浓度显著升高(P<0.05);与模型组比较,射干提取物组豚鼠血浆中LTB_4浓度显著降低(P<0.05)。结论:本研究中样品处理方法绿色环保,含量检测方法灵敏度高、准确性好,适用于血浆中LTB_4浓度的测定;射干提取物可使气道炎症豚鼠血浆中升高的LTB_4浓度得到显著回调。

射干提取物对小鼠免疫功能的影响

目的研究射干提取物对小鼠免疫功能的影响。方法以环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型,测定腹腔注射印度墨汁后小鼠网状内皮细胞(RES,单核巨噬细胞)炭粒廓清指数,观察其对小鼠非特异性免疫功能的影响;通过测定正常小鼠血清溶血素水平观察射干提取物对小鼠体液免疫的影响。结果射干提取物可增强小鼠网状内皮细胞的吞噬功能;促进抗体溶血素的产生。结论射干提取物对非特异性免疫功能和特异性免疫功能都有增强的作用。

射干提取物止咳祛痰药理实验研究

[目的]研究射干提取物对浓氨水引起小鼠咳嗽次数及咳嗽潜伏期的影响、对小鼠腹腔注射酚红后引起气管酚红排泌量的影响。[方法]将小鼠放入加有浓氨水的诱咳引喘仪内,雾化5sec,观察记录小鼠的咳嗽潜伏期和2min内咳嗽次数,小鼠腹腔注射5%酚红溶液,测定30min后小鼠气管酚红的排泌量。[结果]射干提取物0.46g(提取物)/kg、0.92g(提取物)/kg、1.84g(提取物)/kg剂量能明显延长氨水引起的小鼠咳嗽潜伏期、降低2min内小鼠咳嗽次数,明显增加小鼠气管酚红排泌量,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。[结论]射干提取物具有止咳祛痰作用。

射干中药效物质成分提取工艺研究

目的 :优选射干有效部位群的提取工艺。方法 :以射干药材中药效物质组分群为指标,采用正交试验考查乙醇浓度、加醇量及提取时间对提取效果的影响。结果 :最佳提取工艺为加70%乙醇8倍量、6倍量提取2次,分别提取1 h及0.5 h。结论 :该提取工艺简单、合理,药效成分转移率高。

HPLC法同时测定射干提取物多组分含量

目的：建立同时测定射干提取物中鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾黄素、野鸢尾黄素、次野鸢尾黄素及白射干素6种有效成分含量的HPLC法。方法：采用KromasilC18色谱柱（5μm,4.6mm×200mm）,流动相为乙腈和0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0mL/min;检测波265nm。结果：鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾黄素、野鸢尾黄素、次野鸢尾黄素及白射干素线性范围分别是：0.3188~1.9129μg（r=0.9910）,0.1156~0.5782μg（r=0.9998）,0.0633~0.3164μg（r=0.9990）,0.4146~2.0730μg（r=0.9991）,0.0818~0.4091μg（r=0.991）,0.0458~0.2291μg（r=0.9990）,对照品线性关系良好,各对照品的平均回收率分别为：97.44%、98.29%、97.41%、98.01%、98.34%、96.73%。结论：该方法准确、可靠、重现性好可用于射干提取物的质量控制。

超临界CO_2萃取射干的最佳工艺研究

目的探索用超临界CO2萃取射干成分的最佳工艺条件。方法以射干萃取物得率为考察指标,采用正交试验方法,优选射干SFE-CO2最佳工艺。结果当压力为33 MPa,温度为50℃,流量为15 kg·h-1,时间为2 h时,为射干萃取的优选工艺。结论该工艺具有萃取率高、速度快、操作简便等优点,可用于射干药材的提取。

超声波提取射干种子皮及其清除自由基活性研究

以超声波法提取射干种子皮的活性组分,优化提取工艺,测试了提取物在不同溶液中的自由基清除活性,就溶剂效应对自由基清除活性的影响进行了研究。结果表明,以超声波法提取射干种子皮的最优工艺:提取溶剂为80%乙醇,提取温度为80℃,提取时间为1.0h,在此最佳工艺条件下,提取物得率为37.3%;提取物的乙醇溶液的自由基清除率最高,水溶液次之,DMF溶液最低,IC50分别为0.25、0.47和0.63mg/mL。

气相色谱法测定射干提取物中大孔吸附树脂残留

目的:建立射干提取物中的大孔吸附树脂16种残留物的气相测定方法。方法:采用气相色谱法,HP-5MS气相色谱柱,FID检测器,N2为载气。结果:3批射干提取物中均未检出16种残留物。结论:本法操作方便,重现性好,可用于本品中16种残留物测定。

射干提取物在大鼠体内分布研究

目的研究射干提取物在大鼠体内的组织分布特征。方法射干提取物给大鼠灌药后,以鸢尾黄素为研究指标,采用高效液相色谱法测定其在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量。结果鸢尾黄素在大鼠体内各部分的分布顺序为:肝>肾>肺>心>脾。结论射干提取物中鸢尾黄素在大鼠体内分布广泛,在肝肾肺组织中药物浓度较高,并且在肺组织中达到平衡后能较长时间保持药物浓度,与射干药材归肺经相符合,提示鸢尾黄素可能是射干用于治疗上呼吸道作用的药效物质之一。

射干的提取纯化工艺研究

目的优选射干的提取纯化工艺。方法运用正交试验,筛选最佳提取工艺;用大孔吸附树脂对提取液进行纯化;用HPLC法测定次野鸢尾黄素的含量并评价工艺。结果提取工艺以8倍量50%乙醇,提取3次,每次1 h最佳;纯化工艺以进样量为5BV(树脂床体积),用8BV的70%乙醇进行洗脱效果最佳。经纯化后射干次野鸢尾黄素可达40.9 mg.g-1。结论该法简单可行,分离效果好,适于工业化大生产。

正交试验优选AB-8大孔树脂分离射干总异黄酮工艺

目的:优化射干总异黄酮提取及分离工艺。方法:采用正交试验考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间3个因素及AB- 8大孔吸附树脂分离技术对射干总异黄酮得率的影响。结果:射干的适宜提取工艺为用10倍量70%乙醇,提取2次,提取时间分别为2.0和1.5h,洗脱液为60%乙醇。采用该工艺射干总异黄酮纯度达60%。结论:该工艺简便,该纯化方法可取。

鸢尾苷的提取分离及其对透明质酸酶活性的影响

用乙醇提取射干中鸢尾苷,使用AB-8型大孔树脂、硅胶柱层析对提取液进行分离纯化;运用高效液相、红外、紫外、液质联用、核磁等对鸢尾苷进行定性定量分析;采用Elson-Morgan改良法测定鸢尾苷与透明质酸酶的作用。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度70%,固液比1∶8(w/v),每次提取30 min;分离纯化得纯度96.8%的鸢尾苷,提取率为0.653%;鸢尾苷提取物对透明质酸酶有明显抑制作用,抑制率达到81.2%。

射干乙醇提取物的镇痛抗炎活性及作用机制研究

目的探究射干乙醇提取物(EEBC)镇痛、抗炎活性及作用机制。方法采用醋酸扭体法、福尔马林镇痛模型、热板法测定射干乙醇提取物(50、100和200 mg/kg,i.p.)的镇痛活性。采用角叉菜胶致小鼠足肿胀模型和二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型及体外LPS致Raw264.7细胞炎症模型评价EEBC的抗炎活性。结果腹腔注射50、100和200 mg/kg剂量的EEBC对醋酸诱导的小鼠疼痛具有不同程度的抑制作用,且呈剂量依赖性。在剂量为100和200 mg/kg时对热刺激和福尔马林引起的痛觉刺激均有显著的抑制作用。EEBC在100和200 mg/kg剂量下显著减轻角叉菜胶引起的小鼠足肿胀,抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀(28.96%和37.54%),显示出较好的抗炎作用。EEBC显著降低LPS诱导的Raw264.7细胞分泌NO,抑制iNOS活力,降低TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结论EEBC具有显著的镇痛和抗炎活性,而且这种镇痛活性主要为外周镇痛而非中枢镇痛作用。本研究为射干在传统医学中的广泛应用提供了科学依据,揭示射干可能在治疗疼痛和炎症相关疾病方面具有潜在研究价值。

射干总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究

采用超声辅助提取射干总黄酮,在单因素试验的基础上,采用正交试验设计,对射干总黄酮提取工艺进行优化;然后,采用优化后的工艺对射干不同部位(须根、主根、花梗、叶、花、茎)的总黄酮进行提取,通过DPPH自由基清除率和ABTS^(+)自由基清除率2个指标对射干不同部位提取物的抗氧化能力进行了比较。结果表明:射干总黄酮超声提取的最佳工艺条件为乙醇浓度60%、液料比1∶20、提取温度70℃、超声波功率80 W,该提取条件下射干不同部位的总黄酮含量具有显著差异,其中叶的总黄酮含量最高、茎的总黄酮含量相对较低。射干不同部位提取物对DPPH和ABTS^(+)自由基的清除能力存在着一定差异,其中,花梗提取物对DPPH自由基的清除能力最强,IC_(50)为0.48 mg/mL;须根和叶提取物对ABTS^(+)自由基的清除作用较好,清除率分别为97.98%和96.90%。射干总黄酮含量与其抗氧化活性的相关性分析结果显示,射干总黄酮含量与其DPPH自由基的清除能力相关不显著,但与ABTS^(+)自由基的清除能力呈极显著正相关。

射干药材最佳干燥温度的研究

目的对不同干燥温度的射干药材的各项指标进行比较分析,以确定最佳干燥温度。方法以所含水分、有效成分含量及醇溶性浸出物含量为考察指标,综合评价,优选干燥温度。结果不同干燥温度的射干药材含水量、有效成分含量及醇溶性浸出物含量存在明显差异,其中50℃干燥的药材含水量最高,依次减低,90℃干燥的药材含水量最低;60℃干燥的药材次野鸢尾黄素含量最高,依次为50℃、90℃、70℃、80℃;50℃醇溶性浸出物含量最高,依次为60℃、80℃、70℃、90℃。结论综合比较,射干的最佳干燥温度为60℃。